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文本内容:
土壤微生物生物量的测定方法1土壤微生物碳的测定方法(熏蒸提取----仪器分析法)
1.1基本原理新鲜土样经氯仿熏蒸后(24h),土壤微生物死亡细胞发生裂解,释放出微生物生物量碳,用一定体积的
0.5mol/LK2SO4溶液提取土壤,借用有机碳自动分析仪测定微生物生物量碳含量根据熏蒸土壤与未熏蒸土壤测定有机碳的差值及转换系数(KEC),从而计算土壤微生物生物量碳
1.2实验仪器自动总有机碳(TOC)分析仪(ShimadzuModelTOC—500JANPAN)、真空干燥器、烧杯、三角瓶、聚乙烯熟料管、离心管、滤纸、漏斗等
1.3实验试剂1)无乙醇氯仿(CHCL3);2)
0.5mol/L硫酸钾溶液称取87gK2SO4溶于1L蒸馏水中3)工作曲线的配制用
0.5mol/L硫酸钾溶液配制10ugC/L、30ugC/L、50ugC/L、70ugC/L、100ugC/L系列标准碳溶液(其实一般情况下,仪器会自带的标曲,一般不用自己做的)
1.4操作步骤
1.
4.1土壤的前处理(过筛和水分调节略)
1.
4.2熏蒸称取新鲜(相当于干土
10.0g,这个可以根据自己土样的情况而定)3份分别放入25ml小烧杯中将烧杯放入真空干燥器中,并放置盛有无乙醇氯仿(约2/3)的15ml烧杯2或3只,烧杯内放入少量防暴沸玻璃珠,同时放入一盛有NaOH溶液的小烧杯,以吸收熏蒸过程中释放出来的CO2,干燥器底部加入少量水以保持容器湿度盖上真空干燥器盖子,用真空泵抽真空,使氯仿沸腾5分钟关闭真空干燥器阀门,于25℃黑暗条件下培养24小时
1.
4.2抽真空处理熏蒸结束后,打开真空干燥器阀门(应听到空气进入的声音,否则熏蒸不完全,重做),取出盛有氯仿(可重复利用)和稀NaOH溶液的小烧杯,清洁干燥器,反复抽真空(5或6次,每次3min,每次抽真空后最好完全打开干燥器盖子),直到土壤无氯仿味道为止同时,另称等量的3份土壤,置于另一干燥器中为不熏蒸对照处理(注意熏蒸后不可久放,应该快速浸提)※
1.
4.4浸提过滤从干燥器中取出熏蒸和未熏蒸土样,将土样完全转移到80ml聚乙烯离心管中,加入40ml
0.5mol/L硫酸钾溶液(土水比为1:4,考虑到土样的原因,此部分熏蒸和不熏蒸土均为4g,即,4g土
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