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高中生物选修3重点知识点总结专题1 基因工程基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,又叫做DNA重组技术
(一)基因工程的基本工具
1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)
(1)来源主要是从原核生物中分离纯化出来的
(2)功能能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性
(3)结果经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式黏性末端和平末端
2.“分子缝合针”——DNA连接酶
(1)两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶)的比较
①相同点都缝合磷酸二酯键
②区别E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌,只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端,但连接平末端的之间的效率较低
(2)与DNA聚合酶作用的异同DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键
3.“分子运输车”——载体
(1)载体具备的条件
①能在受体细胞中复制并稳定保存
②具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入
③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择
(2)最常用的载体是质粒它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环状DNA分子
(3)其它载体λ噬菌体的衍生物、动植物病毒
(二)基因工程的基本操作程序第一步目的基因的获取
1.目的基因是指编码蛋白质的结构基因
2.原核基因采取直接分离获得,真核基因是人工合成人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法
3.PCR技术扩增目的基因
(1)PCR的含义是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术
(2)目的获取大量的目的基因
(3)原理DNA双链复制
(4)过程第一步加热至90~95℃DNA解链为单链;第二步冷却到55~60℃,引物与两条单链DNA结合;第三...。