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抗酸染色法抗酸染色法acid-faststainingmethod1882年由埃利希F.Ehrlich首创并经F.齐尔Ziehl改进而创造出的细菌染色法简介其中最具代表性的为对结核菌的齐尔-尼尔森Ziehl-Neelsen染色法和齐尔-加贝特Ziehl-Gabbet染色法用石炭酸复红染色后,用盐酸乙醇分色,再用美蓝进行对比染色,即不再脱色而呈现石炭酸复红的红色抗酸染色的原理折叠分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质,包围在肽聚糖的外面,所以分枝杆菌一般不易着色,要经过加热和延长染色时间来促使其着色但分枝杆菌中的分枝菌酸与染料结合后,就很难被酸性脱色剂脱色,故名抗酸染色齐-尼氏抗酸染色法是在加热条件下使分枝菌酸与石炭酸复红牢固结合成复合物,用盐酸酒精处理也不脱色当再加碱性美兰复染后,分枝杆菌仍然为红色,而其他细菌及背景中的物质为蓝色抗酸染色一般步骤折叠1初染折叠用玻片夹夹持涂片标本,滴加石炭酸复红2-3滴,在火焰高处徐徐加热,切勿沸腾,出现蒸汽即暂时离开,若染液蒸发减少,应再加染液,以免干涸,加热3-5分钟,待标本冷却后用水冲洗2脱色折叠3%盐酸酒精脱色30秒~1分钟;用水冲洗3复染折叠用碱性美兰溶液复染1分钟,水洗,用吸水纸吸干后用油镜观察抗酸染色的染液配制折叠
1、石炭酸复红碱性复红酒精饱和溶液10mL5%石炭酸90mL
2、3%盐酸酒精浓盐酸3mL95%酒精97mL
3、吕氏美兰液美兰酒精饱和液30mL氢氧化钾1:10000100mL细菌鞭毛染色的方法目前,细菌鞭毛染色方法根据染色剂的不同,可分为碱性复红法、副品红法、结晶紫法、维多利亚蓝B法、镀银染色法和荧光蛋白染色法6类,前5类方法的媒染剂成分中均含有单宁酸,染色原理通常是采用不稳定的胶体溶液做媒染剂,并使其沉淀于鞭毛上而使“鞭毛肿胀(tarandfeather)”,鞭毛直径加粗,进一步染色后即可在油镜下观察
1.碱性复红法和副品红法1926年由Gray首创,其媒染液成分包括20%丹宁酸水溶液
2.0ml,硫酸钾铝饱和水溶液5ml,饱和氯化汞水溶液2ml,3%碱性复红乙醇(95%)溶液
0.4ml,临用前混合,且需过滤后方可使用染片时,媒染剂染色约
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