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文本内容:
2019-2020年高中生物第四章生物化学与分子生物学技术实践
4.1DNA粗提取与鉴定教案(选修1)
一、学习目标
1、通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取,了解DNA的物理化学性质
2、理解DNA粗提取与鉴定的原理
3.掌握DNA如提取计数,能利用DNA的性质进行实验设计和操作
二、知识构成1提取DNA的原理包括DNA的溶解性和耐受性两个方面问提取DNA的溶解性原理包括哪些方面?
2.DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特点?要使DNA溶解,需要使用什么浓度?要使DNA析出,又需要使用什么浓度?
3、酒精是一种常用有机溶剂,但DNA却不能溶于酒精(特别是95%冷却酒精),但细胞中蛋白质可溶于酒精问采用DNA不溶于酒精的原理,可以达到什么目的?
4、提取DNA还可以利用DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性原理利用该原理时,应选用怎样的酶和怎样的温度值?
5、思考洗涤剂在提取DNA中有何作用?
6、当鉴定提取出的物质是否是DNA时,需要使用什么指示剂进行鉴定?
7、不同生物的组织中DNA含量不同在选取材料时,应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则你认为教材提供的材料中哪些不适合提取DNA?
8、从核DNA数目来看,猪38条,鸡78条,哺乳动物血0条,猕猴桃58条,洋葱16条,豌豆14条,菠菜12条,大肠杆菌1条请选择动植物材料各一种
9、若选用鸡血和洋葱作实验材料,则怎样获取含DNA的滤液?
10、在以上实验中,加入蒸馏水、洗涤剂和食盐的作用分别是什么?过滤时应当选用(滤纸、尼龙布)
11、在处理植物组织时需要进行研磨,其目的是什么?研磨不充分产生什么结果?具体做法
12、在滤液中仍然含有一些杂质,怎样除去这些杂质呢?得到的DNA呈何颜色?
13、怎样鉴定析出的白色丝状物就是DNA呢?阅读教材具体做法试管2支,编号甲乙→各加等量5mLNaCl溶液→甲中放入少量白色丝状物,使之溶解→各加4mL二苯胺,混合均匀→沸水浴5min→观察颜色变化3.总结DNA粗提取和鉴定的实验操作过程
三、学法和自检1在DNA分子的粗提取实验中,两次向烧杯中加入蒸馏水的作用是()A.稀释血液、冲洗样品B.使血细胞破裂,降低NaCl浓度使DNA析出C.使血细胞破裂,增大DNA溶解度D.使血细胞破裂,提取含杂质较少的DNA2在制备鸡血细胞液的过程中,加入柠檬酸钠的目的是()A.防止凝血B.加快DNA析出C.加快DNA溶解D.加速凝血课题
四、达标检测
1.在研究DNA的基因样本前,采集来的血样需要蛋白水解酶处理,然后用有机溶剂除去蛋白质用蛋白水解酶处理血样的目的是()A.除去血浆中的蛋白质B.除去染色体上的蛋白质C.除去血细胞表面的蛋白质D.除去血细胞中的所有的蛋白质,使DNA释放,便于进一步提纯2.与析出DNA粘稠物有关的叙述,不正确的是()A.操作时缓缓滴加蒸馏水,降低DNA的溶解度B.在操作A时,用玻璃棒轻缓搅拌,以保证DNA分子完整C.加蒸馏水可同时降低DNA和蛋白质的溶解度,两者均可析出D.当丝状粘稠物不再增加时,此时NaCl的浓度相当于
0.14mol/L3.洗涤剂能够瓦解(),但对DNA没有影响A.细胞壁B.细胞膜C.细胞核D.细胞质4.在沸水浴的条件下,DNA遇()会被染成蓝色A.斐林试剂B.苏丹Ⅲ染液C.双缩脲试剂D.二苯胺5.在DNA提取过程中,最好使用塑料试管和烧杯,目的是()A.不易破碎B.减少提取过程中DNA的损失C.增加DNA的含量D.容易洗刷6.下列操作中,对DNA的提取量影响最小的是()A.使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂,放出DNA等核物质B.搅拌时,要使用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌C.在“析出DNA粘稠物”时,要缓缓加蒸馏水,直至溶液中粘稠物不再增加D.在用酒精沉淀DNA时,要使用冷酒精,甚至再将混合液放入冰箱中冷却E在DNA的溶解和再溶解时,要充分搅拌7.DNA的粗提取中,将与滤液体积相等的、冷却的(),静置2—3min,溶液中会出现白色丝状物A.0.9%的NaClB.
0.14mol/L的NaCl溶液C.质量分数15%的HClD.体积分数为95%的酒精溶液
8.以血液为实验材料时,需要向血液中加入(),防止血液凝固A.醋酸钠B.龙胆紫C.柠檬酸钠D.醋酸洋红
9.在向溶解DNA的NaCl溶液中,不断加入蒸馏水的目的是()A.加快溶解DNA的速度B.加快溶解杂质的速度C.减少DNA的溶解度,加快DNA析出D.减小杂质的溶解度,加快杂质的析出
10.去除滤液中的杂质时,直接在滤液中加入嫩肉粉,利用嫩肉粉中的()分解蛋白质A.胃蛋白酶B.胰蛋白酶C.木瓜蛋白酶D.肠肽酶
五、学习小结和课外作业
1、学习小结
2、上本作业
3、课本或资料选题
4、补充练习DNA在NaCl溶液中溶解度有二重性,随着NaCl溶液的变化而变化
(1)请在下列NaCl溶液中选出溶解度能使DNA析出最彻底的一种()和溶解度最高的一种()A.
0.14mol/lB.2mol/lC.
0.15mol/lD.
0.3mol/l
(2)DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶液,利用这一原理可以____________,可以推测溶于酒精中的物质可能有____________
(3)利用DNA与_____变蓝色的特性,将该物质作为鉴定______的试剂其实验过程要点是向放有_____的试管中加热4ml的____混合均匀后,将试管置于___5min,待试管______,观察试管中溶液颜色的变化,这个实验也说明DNA耐___温答案
(1)A;B
(2)除去杂质;某些脂类、蛋白质、糖类或其他大分子物质
(3)二苯胺;DNA;DNA;二苯胺试剂;沸水中水浴加热;冷却后;高。