还剩3页未读，继续阅读
文本内容:
专题训练22 基因工程和克隆技术
一、选择题
1.以下关于植物组织培养的说法正确的是 A.同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因相同B.植物根尖细胞中无叶绿体故用根尖细胞不能培养出含叶绿体的植物体C.组织培养过程中获得的胚性细胞细胞质丰富、液泡小、细胞核大D.利用植物组织培养技术可按人们的意愿定向改造生物答案C解析同一株绿色开花植物不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织基因可能不同如组织细胞和花粉A项错误;根尖细胞经脱分化和再分化后能够培育成含叶绿体的植物体B项错误;胚性细胞的特点是细胞核大、细胞体积小、液泡小及细胞质丰富C项正确;转基因技术能够按人们的意愿定向改造生物D项错误
2.某研究小组对某种动物的肝肿瘤细胞甲和正常肝细胞乙进行培养下列叙述正确的是 A.制备肝细胞悬浮液时先用剪刀剪碎肝组织再用胃蛋白酶处理B.肝细胞培养过程中通常在培养液中通入5%的CO2刺激细胞呼吸C.为了防止培养过程中杂菌的污染可向培养液中加入适量的干扰素D.甲、乙细胞在持续的原代培养过程中乙会出现停止增殖的现象答案D解析动物细胞培养的适宜pH为
7.2~
7.4而在这样的环境中胃蛋白酶会变性失活因此在利用两种肝组织块制备肝细胞悬液时不可用胃蛋白酶处理应用胰蛋白酶处理A项错误;细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行CO2的作用是维持培养液的pHB项错误;为了防止培养过程中杂菌的污染可向培养液中加入适量的抗生素C项错误;甲肿瘤细胞失去接触抑制而乙正常肝细胞具有接触抑制因此甲、乙细胞在持续的原代培养过程中乙会出现停止增殖的现象D项正确
3.下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图以下相关叙述正确的是 A.
②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与B.
③侵染植物细胞后重组Ti质粒整合到
④的染色体上C.
④的染色体上若含抗虫基因则
⑤就表现出抗虫性状D.
⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异答案D解析构建载体需要限制酶和DNA连接酶A项错误;
③侵染植物细胞后重组Ti质粒上的T-DNA整合到
④的染色体上B项错误;染色体上含有目的基因但目的基因也可能不能转录或者不能翻译或者表达的蛋白质不具有生物活性C项错误;植株表现出抗虫性状说明含有目的基因属于基因重组为可遗传变异D项正确
4.下图是单克隆抗体制备流程的简明示意图下列有关叙述正确的是 A.
①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞B.
②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成C.
③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性D.
④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群答案D解析
①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应B细胞A项错误;在动物细胞融合的过程中可用物理法、化学法和生物法而胰蛋白酶是在动物细胞培养过程用于分离细胞的B项错误;杂交瘤细胞同时具有效应B细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性C项错误;
④过程表示用选择培养基筛选出能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞D项正确
二、非选择题
5.青蒿素是从黄花蒿茎叶中提取的抗疟疾药物通过组织培养获得青蒿素的途径如图所示请回答下列问题1图中
①和
②分别表示黄花蒿组织培养过程中细胞的 和 过程 2配制生芽培养基时生长素与细胞分裂素的比值应较 填“高”或“低”配制培养基时通常加入凝固剂 配制后还须用 法对培养基进行灭菌外植体在接种前通常可用体积分数为 的酒精进行消毒 3为了得到高产细胞系通常要用酶解法获得原生质体用 酶和 酶在
0.5~
0.6mol/L的 溶液环境较高渗透压下去壁 4科研人员利用转基因技术用细菌作为工程菌获得青蒿素的前体青蒿酸先将目的基因与含有抗青霉素基因的质粒形成 再与细菌菌液混合导入目的基因用玻璃刮刀将稀释后的菌液用 法接种到含 的固体培养基上经培养形成 再进一步筛选和培养若最终能从细菌中提取到 则说明转基因成功 答案1脱分化 再分化2低 琼脂 高压蒸汽灭菌 70%3果胶 纤维素 甘露醇4重组质粒 涂布 青霉素 单菌落 青蒿酸解析1植物组织培养的过程包括脱分化和再分化2培养基中的生长素与细胞分裂素用量的比值低时有利于芽的分化配制固体培养基时通常用琼脂作为凝固剂对培养基彻底灭菌时采用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法外植体在接种前通常可用体积分数为70%的酒精进行消毒3在获得植物原生质体时需在
0.5~
0.6mol/L的甘露醇溶液环境较高渗透压下用纤维素酶和果胶酶混合液处理实验材料将细胞壁消化除去获得球形的原生质体4基因工程过程中先将目的基因与含有抗青霉素基因的质粒形成重组质粒再与细菌菌液混合导入目的基因用玻璃刮刀将稀释后的菌液用涂布法接种到含青霉素的固体培养基上经培养形成单菌落再进一步筛选和培养若最终能从细菌中提取到青蒿酸则说明转基因成功
6.2018台州模拟人胰岛素基因的克隆操作过程如图所示其中mRNA逆转录形成的DNA称为cDNA回答下列问题1提取分离组织细胞中的人胰岛素mRNA时最应选择 细胞过程
①②需要原料是 2通过将所有的cDNA构建基因表达载体去感染细菌可以建立包括目的基因在内的 若使用质粒载体其上存在 基因有助于质粒进入受体细胞中此过程还可以使用 作为载体A.动物病毒 B.植物病毒 C.噬菌体 3除了上述方法外还可以使用 方法扩增目的基因不同的是后者的目的基因若为人胰岛素原基因需要导入 填“真核”或“原核”受体细胞中 答案1胰岛β细胞 四种脱氧核糖核苷酸2基因文库 控制质粒DNA转移的基因 C3PCR 真核解析1人体细胞中只有胰岛β细胞可表达胰岛素基因提取人胰岛素mRNA时最应选择胰岛β细胞过程
①②为合成DNA的过程需要四种脱氧核糖核苷酸为原料2通过将所有的cDNA构建基因表达载体去感染细菌可以建立包括目的基因在内的基因cDNA文库;若使用质粒载体其上应存在控制质粒DNA转移的基因有助于质粒进入受体细胞中噬菌体可侵染细菌动物病毒、植物病毒不能侵染细菌此过程还可以使用噬菌体作为载体3用PCR技术可扩增目的基因PCR扩增的人胰岛素原基因含有内含子序列原核细胞中缺少转录后切除内含子对应序列的机制因此应将人胰岛素原基因需要导入真核受体细胞中
7.2018绍兴模拟基于哺乳动物细胞表达的基因工程制药行业在最近10年发展迅速其中构建稳定表达细胞株是最重要的环节常见过程:获得目的基因→将目的基因导入宿主细胞→初步筛选→扩增→单克隆化→筛选→驯化→工业生产回答下列问题1如果该目的基因的序列是未知的我们可以建立一个 然后在这里面寻找到要研究的目的基因 2为了实现工厂化生产蛋白质类药物常用CHO细胞中国仓鼠卵巢的建株纤维母细胞作为哺乳动物表达系统的宿主细胞这种细胞应该具有 能力从而可以反复传代使用为了得到CHO细胞可以直接将组织从机体中取出后立即进行细胞、组织培养当细胞从组织块中迁移出来形成 并增大后再传代培养 3利用“裹有重组质粒的脂质体与动物细胞融合”“病毒浸染细胞”是将目的基因导入动物细胞的两种常用方法前者所用的脂质体结构上由 分子构成后者不能用噬菌体的原因是 4对细胞进行单克隆化培养时培养基中往往需要添加血清、激素、滋养细胞等这些措施的目的是 确定生产用的细胞株后需要对细胞驯化使其适应生产规模下的培养条件工业生产使用的培养基大多是无血清培养基这对生物制品的好处有 答案1基因文库2无限增殖 生长晕3双层磷脂 噬菌体不能侵染动物细胞4提高细胞克隆形成率 有利于生物制品的纯化解析1如果该目的基因的序列是未知的我们可以建立一个基因文库然后在这里面寻找到要研究的目的基因2常用CHO细胞可以反复传代使用故应无限增殖为了得到CHO细胞可以直接将组织从机体中取出后立即进行细胞、组织培养当细胞从组织块中迁移出来形成生长晕并增大后再传代培养3脂质体是由双层磷脂分子构成噬菌体是专一侵染大肠杆菌的病毒不能侵染病毒4对细胞进行单克隆化培养时培养基中往往需要添加血清、激素、滋养细胞等这些措施的目的是提高细胞克隆形成率确定生产用的细胞株后需要对细胞驯化使其适应生产规模下的培养条件工业生产使用的培养基大多是无血清培养基这样有利于生物制品的纯化
8.2018宁波十校联考科学家用转基因方法培育“巨型小鼠”图1为含大鼠生长激素基因的DNA及限制性核酸内切酶切割位点示意图;图2为含有相应标记基因和限制酶切割位点的质粒示意图其中nptⅡ为卡那霉素抗性基因Tc为四环素抗性基因lacZ为蓝色显色基因复制原点是质粒上必需的一段复制起始的序列与重组质粒的自主复制有关图3是转基因过程中的一个步骤1根据图1在获得目的基因时应使用限制性核酸内切酶 填“PvuⅠ”或“EcoRⅠ”进行切割可以选择图2中的质粒 填“A”或“B”作为目的基因的载体理由是 2图3表示基因工程中将重组DNA分子导入受体细胞的过程该步骤采用的技术方法是 通常选择 作为受体细胞 3获得含目的基因的细胞后该细胞需要进行 然后再进行移植通常移植最适宜的时期是发育到 A.2细胞胚胎 B.4细胞胚胎 C.早期囊胚 D.原肠胚再经分娩产仔就可以获得“巨型小鼠” 答案1PvuⅠ A 选择质粒A其复制原点则不会被限制酶切割复制原点序列保持完整2显微注射法 受精卵3胚胎体外培养 C解析1分析题图1可以发现限制性核酸内切酶EcoRⅠ的切割位点处于目的基因中而限制性核酸内切酶PvuⅠ的切割位点正好位于目的基因两端所以在获得目的基因时应使用限制性核酸内切酶PvuⅠ进行切割;分析图2可知质粒A中的复制原点不会被限制性核酸内切酶切割复制原点序列保持完整而在用切割目的基因的限制性核酸内切酶PvuⅠ切割质粒B时其复制原点会被限制性核酸内切酶切割从而影响重组质粒的自主复制因此可以选择图2中的质粒A作为目的基因的载体2图3表示基因工程中将重组DNA分子导入受体细胞的过程该步骤采用的技术方法是显微注射法通常选择动物的受精卵作为受体细胞3获得含目的基因的细胞后该细胞需要进行胚胎体外培养然后再进行移植;通常移植最适宜的时期是发育到C早期囊胚再经分娩产仔就可以获得“巨型小鼠”。
个人认证
优秀文档
获得点赞 0
