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CyclinD1和PTEN在胃黏膜癌变多阶段中的表达及相关性__高绍芳李佃贵崔建从郭敏张纨【摘要】目的探讨细胞周期蛋白D1CyclinD1和抑癌基因PTEN在胃黏膜癌变多阶段中的表达及其相关性方法应用免疫__化学染色SP法检测CyclinD1和PTEN在不同胃黏膜病变石蜡包埋标本的表达并进行相关性分析结果在慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、不典型增生和胃癌中CyclinD1的表达率逐渐增高,PTEN的表达率逐渐降低,且差异有统计学意义Plt;
0.05;CyclinD1和PTEN在胃黏膜癌变多阶段中的阳性表达率呈负相关结论CyclinD
1、PTEN在胃癌的发生、发展中起协同作用,对其进行联合检测有助于胃癌的早期诊断【关键词】胃癌;胃癌前病变;CyclinD1;PTEN;相关性胃癌__是我国高发的恶性肿瘤之一,近年研究发现其形成是一个多因素、多阶段、多基因作用的复杂过程〔12〕在各种致病因素作用下,胃黏膜在经历慢性浅表性胃炎CSG、萎缩性胃炎CAG、肠上皮化生IM、不典型增生ATP及__的一系列贯序性形态学变化过程中,细胞趋向更为恶性的生物学行为细胞周期调控基因在其发生发展过程中起着一定的作用,他们的表达失衡是导致胃癌发生的机制之一,故本研究采用免疫组化法探讨细胞周期蛋白D1CyclinD1和抑癌基因PTEN在胃黏膜癌变多阶段中的表达及相关性,为研究胃癌发生机制及胃癌的早期诊断提供实验室依据 1材料与方法
1.1研究对象选择河北医科大学中医院临床病理科保存的2004至2008年胃窦部病理活检__存档蜡块,共223例,其中CSG35例,CAG无IM44例,CAG伴IM49例,ATG45例,__50例其中男108例,女116例平均
58.6±
12.3岁其中____标本均未经放射治疗和或化学治疗所用__标本患者均签署知情同意书
1.2试剂与方法鼠抗人单克隆抗体CyclinD1,鼠抗人单克隆抗体PTEN及免疫组化SP广谱超敏试剂盒即用型、DAB显色剂等均购自福州迈新生物技术__公司石蜡切片常规脱蜡、水化,进行水浴抗原修复,继以免疫组化试剂盒进行检测操作步骤按说明书进行以阳性片及PB代替一抗,设阳性及阴性对照
1.3免疫组化结果判定CyclinD
1、PTEN阳性染色主要定位于细胞质中,为深浅不一的棕黄色颗粒,偶可见于细胞膜和或细胞核每张切片由两位观察者随机选择5个有代表性的10×40高倍视野,计数网格自测微尺内阳性细胞数占视野总细胞数的百分比,并按阳性细胞数的百分比对各蛋白阳性表达的程度予以分级阳性细胞lt;5%为阴性;5%~25%为弱阳性+;25%~50%为阳性;gt;50%为强阳性
1.4统计学方法采用线性趋势χ2检验进行各组间率的比较,应用Pearson四格表χ2检验进行相关样本的关联性分析所有数据均利用SPSS
13.0统计学软件处理 2结果
2.1CyclinD1蛋白、PTEN蛋白在胃黏膜各病变中的表达随着胃黏膜癌变的阶段性进展,CyclinD1蛋白表达的阳性率越来越大,PTEN蛋白表达的阳性率越来越小均Plt;
0.001,见表1表1CyclinD
1、PTEN在胃黏膜各期病变的表达
2.2CyclinD1与PTEN表达的相关性经相关样本的关联性检验χ2=1__.233,Plt;
0.001,列__数C=
0.678,可以认为二者有关联性,密切程度中等 3讨论 胃癌的发生是一个多阶段、多步骤、逐渐演变的过程在各种致癌因子作用下,胃黏膜先发生癌前病变,一部分癌前病变可发展成早期胃癌,最后形成进展期胃癌在这一癌变过程中往往涉及到多种癌基因的激活和抑癌基因的失活原癌基因CyclinD1合成于G1早期,是细胞增殖G1~S期的重要控件其调控机制主要是通过对RB蛋白的灭活而释放E2F,以启动S期相关基因的转录,使其渡过G1→S调控点进入S期〔3〕研究发现,CyclinD1基因及其表达的异常在许多肿瘤细胞中存在〔4~6〕Wang等〔7〕研究发现,CyclinD1的表达在人食管基底细胞高度增生与__型性增生间未见差异,从__型性增生发展到鳞状细胞癌可见轻微增高本实验结果提示CyclinD1过度表达可能是关键性控件之一,是肿瘤形成的早期分子__CyclinD1蛋白的检测可能对于胃癌前病变及早期胃癌的诊断有参考价值 抑癌基因PTEN编码的蛋白具有双特异性磷酸酶活性,能使磷酸肌醇三磷酸PIP3去磷酸化而抑制PI3K/AktpAkt__传导途径,在调控细胞生长及维持细胞的增殖、分化和凋亡平衡中起重要作用〔8〕PTEN在胃癌发生发展不同阶段的表达呈递减趋势,李异玲等〔9〕的研究提示PTEN蛋白表达水平可作为判定胃癌病理生物学行为的客观指标本研究发现PTEN蛋白的表达随病理级别增加呈递减趋势总之,PTEN作为一种具有磷酸酶活性的抑癌基因,在胃癌早期发生过程中发挥着重要的作用 CyclinD1和PTEN均为重要的细胞周期调控因子研究表明〔10〕CyclinD1在胃黏膜癌变多阶段中高表达,PTEN在胃黏膜癌变多阶段中低表达,但两者之间是否存在__却未有研究报道本研究表明CyclinD1和PTEN在胃黏膜癌变多阶段中表达呈负相关PTEN失表达与CyclinD1的高表达在胃癌的发生发展过程中可能具有协同作用,使肿瘤生长获得更大的生长趋势故此联合检测CyclinD1和PTEN比检测单一指标更有价值,能为临床检测和诊断胃癌及胃癌前期病变提供更多生物学信息,但他们之间具体相互作用机制有待深入研究【____】 1YinGY,ZhangWN,ShenXJ,etal.Ultrastructureandmolecularbiologicalchangesofchronicgastritis,gastricandgastricprecan__rouslesions:acomparativestudy〔J〕.WorldJGastroenterol,2003;54:851
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8.。