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文本内容:
1.生物药物泛指包括生物制品在内的生物体的初级和次极代谢产物或生物体的某一组成部分,甚至整个生物体用作诊断和治疗疾病的医药品,生物制品用基因工程、细胞工程、发酵工程等生物学技术制成的免疫制剂或有生物活性的制剂可用于疾病的预防、诊断和治疗
2.生物技术制药采用现代生物技术人为地创造一些条件,借助某些微生物、植物或动物来生产所需的医药品
3.生物技术药物采用DNA重组技术、单克隆抗体技术或其它生物新技术研制的蛋白质(包括治疗性抗体等)或核酸类药物
4.生物技术以生命科学为基础,利用生物体(或生物组织、细胞及其组分)的特性和功能,设计构建具有预期性状的新物种或新品系,并与工程相结合,利用这样的新物种(品系)进行加工生产,为社会提供商品和服务的一个综合性技术体系
5.血液是一种流动性结缔组织,循环于心血管系统内,它将身体必须的营养物质和氧气输送到各个器官、组织和细胞;同时将机体不需要的代谢产物运送到排泄器官血液还对入侵的微生物、病毒、寄生虫等,以及其它有害物质发生反应,保护机体免遭损害;血液是体液的一个重要组成部分,在维持机体内环境相对稳定方面起着重要的作用
6.体液人体内含有大量液体,包括水分和其中溶解的物质,成人,约占体重的60%,总称为体液体液三分之二在细胞内,三分之一在细胞外,存在于血管内的血浆、淋巴管内的淋巴液、细胞间隙的和组织7天然药物化学是运用现代科学理论和方法研究天然药物中的化学成分及其生理功能的一门科学内容包括各类天然药物的化学成分、结构特征、性质、提取和分离方法、结构鉴定及生理活性等的研究主要研究内容是植物中的天然有机化合物的分离提纯、结构鉴定、构效关系
7.基因工程技术是将重组对象的目的基因插入载体,拼接后转入新的宿主细胞,构建成工程菌,实现遗传物质的重新组合,并使目的基因在工程菌内进行复制和表达的技术
8.下游阶段将实验室成果产业化、商品化,为获得高质量、高产量的表达产物,需对影响表达及分离纯化的因素进行分析(如新型生物反应器、高效分离介质及装置、分离纯化的优化控制、高纯度产品的制备技术等)
9.上游阶段在实验室完成,获得目的基因后,用限制性内切酶和连接酶将目的基因插入载体,并转入宿主菌
10.逆转录法是先分离纯化目的基因的mRNA,再反转录成互补DNA,然后进行互补DNA的克隆表达从产生该蛋白质的真核细胞中提取mRNA,以其为模板,在逆转录酶的作用下,反转录合成该蛋白质mRNA的互补DNA,再以互补DNA为模板,在逆转录酶或DNA聚合酶作用下,最终合成编码该蛋白质的双链DNA序列,该序列不含内含子
11.表达型载体在cDNA插入位置的上游具有启动子序列,重组后插入的cDNA能够表达,并经转录和翻译合成相应蛋白质的载体
12.非表达型载体在cDNA插入位置的上游无启动子序列,重组后插入的cDNA不能表达,不能经转录和翻译合成相应蛋白质的载体
13.化学合成法过程用化学方法合成目的基因不同部位的两条链的寡核苷酸短片段,再退火成为两端形成粘末端的DNA双链片段,然后将这些双链片段按正确的次序进行退火使连接成较长的DNA片段,再用连接酶连接成完整的基因
14.基因表达是指结构基因在生物体中的转录、翻译以及所有加工过程,用基因工程制备药物,必须使目的基因进行高效表达
15.酵母是研究基因表达调控最有效的单细胞真核微生物
16.松弛型载体其复制可不依赖于宿主细胞,在宿主细胞中拷贝多达3000个
17.严紧型载体伴随宿主染色体的复制而复制,在宿主细胞中拷贝少(1-3)
18.载体根据真核基因在原核细胞中表达的特点
19.外源基因是克隆到载体上的,所以载体在宿主中的拷贝数就直接与外源基因的表达相关,应将外源基因克隆到高拷贝的质粒载体上,这对于提高外源基因的总体表达水平非常有利
19.融合蛋白是由一条短的原核多肽和真核蛋白结合在一起所形成的蛋白质;其氨基端是原核序列,羧基端是真核序列
20..酵母载体是可以携带外源基因在酵母细胞内保存和复制,并随酵母分裂传递到子代细胞的DNA或RNA单位
21.普通表达载体只能方便地引入外源基因并进行表达,对表达产物的组成,特别是对其N-末端氨基酸是否有增减并无严格要求
22.精确表达载体——要求在启动子或前导肽编码序列的适当部位有内切酶位点,以利于接入外源基因,并使它在表达和加工后N-末端氨基酸序列与天然产物相同,既无多余的氨基酸,也无缺失的氨基酸
23.两阶段培养法第一阶段先使菌体生长至一定密度,第二阶段诱导外源基因的表达
24.选择性压力(如抗生素等)通过向培养基中加入“压力”,抑制质粒丢失菌的生长
25.菌体生长是菌体各成分尤其是生物大分子——核酸和蛋白质的综合表现,通常用比生长速率来表示工程菌培养可通过选用不同的碳源、控制补料或稀释速率等方法来控制菌体的生长控制菌体生长对提高质粒的稳定性、减少代谢副产物的积累、提高外源蛋白产率都有重要
26.严紧反应在高拷贝质粒工程菌中,由于质粒复制和外源基因的转录、翻译消耗了大量前体物和催化结构,造成蛋白质合成过程中,因前体物和氨基酰-tRNA的不足使核糖体在密码子上停留,并合成“魔点”ppGpp现象
27.补料分批培养将种子(基因工程菌)接种至发酵反应器,经过一段时间培养后,间歇或连续地补加新鲜培养基,使菌体进一步生长的方法
28.连续培养将种子(基因工程菌)接种至发酵反应器中,搅拌培养至一定菌体浓度后,启动进料蠕动泵,以控制稀释率进行不间断地培养,为微生物提供一个相对恒定的生活环境,控制其比生长速率
29.透析培养利用膜的半透性原理,使代谢物和培养基分离,去除培养液中代谢物对工程菌的不利影响
30.有机氮源酪蛋白水解物作为氮源有利于产物的合成与分泌
31.接种量指移入的种子液体积和培养液体积的比例
32.双水相分配法水溶性高聚物-无机盐组成双水相系统(如PEG-无机盐)将混合物与双水相混合,离心分相,则PEG、目的物和杂蛋白富集在上相,而细胞碎片、核酸、多糖等分布于下相
33.反相色谱利用pro分子中非极性基团(氨基酸R侧链)与非极性固定相之间的作用力大小、pro分子中极性基团(-COOH、-NH
2、-OH等)与流动相之间的作用力大小的差异进行分离
34.疏水色谱利用pro分子表面的疏水区域与固定相的疏水基团之间的相互作用,用不同浓度的无机盐溶液洗脱(浓稀)
35.干扰素(interferonIFN)是人体细胞分泌的一种活性蛋白质,具有广泛的抗病毒、抗肿瘤和免疫调节活性,是人体防御系统的重要组成部分根据其结构可分为α、β、γ、ω等4个类型α干扰素又依其结构分为α1b、α2a、α2b等亚型,其区别在于个别氨基酸的差异上,早期干扰素是用病毒诱导人白血球产生的,产量低、价格昂贵,不能满足需要,现在可利用基因工程技术并在大肠杆菌中发酵、表达来进行生产
36.抗体由淋巴细胞产生,能与相应抗原特异性结合的具有免疫功能的球蛋白
37.免疫球蛋白是化学结构上的概念,抗体是生物学功能上的概念,所有抗体都是免疫球蛋白,但并非所有免疫球蛋白都具有抗体活性
38.单克隆抗体(McAb)将抗体产生细胞(淋巴细胞)与具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞相融合,通过有限稀释法及克隆化使杂交瘤细胞成为纯一的单克隆细胞系而产生的由于这种抗体是针对一个抗原决定簇的抗体,又是由单一的B淋巴细胞克隆产生的,所以称为单克隆抗体
39.有限稀释法把杂交瘤细胞悬液稀释后,加入到96孔板中,使每孔理论上只含有一个细胞,第一次克隆化时用HT培养液,以后的克隆化可以用不含HT的RPMI1640培养液(也需加入饲养细胞)
40.软琼脂法在培养液中加入
0.5%左右的琼脂糖凝胶,细胞分裂后形成小球样团块,由于培养基是半固体的,可用毛细管将小球吸出,团块经打碎后,移入96孔板继续培养
41.体内诱生法在接种前1-2周,先给小鼠(也用BALB小鼠)腹腔注射
0.5ml的降植烷(或液体石蜡),然后接种1×106杂交瘤细胞,待生成腹水后再抽取,离心去细胞沉淀,取上清夜冻存(一般接种后7~12d便可抽取腹水)
42.人-鼠嵌合抗体制备原理由于抗体与抗原特异结合的功能取决于抗体分子的V区,而异种免疫原性则决定于抗体分子的C区将编码鼠源性McAb的V区基因和编码人Ig的C区基因连接起来,再共转染骨髓瘤细胞,就可表达出完整的人-鼠嵌合抗体[(VH+VL)鼠—(CH+CL)人]
43.改形抗体(又称CDR移植抗体)制备原理用鼠源性单克隆抗体的CDR区序列替换人Ig中的互补决定区序列,使人的Ig具有鼠源性单克隆抗体的抗原结合特异性
44.抗体特性具有鼠源性单克隆抗体与抗原结合的特异性;但抗体分子中鼠源部分只占很小比例,可基本消除免疫原性
45.模板替换使用与鼠对应部分有较大同源性的人框架区替换鼠框架区的方法
46.补偿变换在人的框架区选择与CDR有相互作用,与抗体的亲合力有密切关系或对框架区空间结构折叠起关键作用的残基进行改变,以补偿完全的CDR移植的方法
47.定位保留在人源化的改形抗体中,保留了鼠源性抗体可变区中参与抗原结合的氨基酸残基(包括CDR和框架区中的一些关键残基)的方法
48.双功能抗体(研制阶段)又称为双特异性抗体(BsAb),是由人工构建的,具有同时与两种抗原特异结合的双臂抗体
49.化学交联法将两个抗体交联在一起,此法快速、简便、高效,纯化简单;但此法构建的双功能抗体,可能由于化学交联过程会影响抗体的功能,不太容易达到靶部位,体内稳定性较差,且无连续性等
50.生物学方法(杂种-杂交瘤法)将普通抗体产生细胞(脾细胞)与产生McAb的杂交瘤细胞融合而成;此法连续性好,但构建过程复杂、周期长、纯化技术复杂,基因组过大且不稳定,又不能对双功能抗体进行改造故不常用
51.基因工程法1993年由Holligen等人首次构建而成,即用人工接头连接不同抗体的VH和VL,以融合蛋白的形式表达
53.HBsAg的反向被动血凝诊断试剂检测原理红细胞经甲醛处理后,在酸性条件下能吸附蛋白质,当纯化的抗乙肝病毒血清吸附其上时便具有抗体活性,若待测样品中有乙型肝炎病毒表面抗原时,则发生特异性结合反应而使血细胞发生凝集
52.组织培养或细胞培养是将组织或细胞从机体取出,在体外模拟机体体内生理条件进行培养,使之生存和生长已有近百年历史了随着细胞生物学、分子生物学、生物化学和基因工程等一系列学科和技术的发展,逐渐形成了细胞工程学
53.细胞工程以细胞为单位,按人们的意志,应用生物学、分子生物学等理论和技术,有目的地进行精心操作,使细胞的某些遗传特性发生改变,从而达到改良或产生新品种的目的,以及使细胞增加或重新获得产生某种特定产物的能力,从而在离体条件下进行大量培养、增殖,并提取出对人类有用的产品
54.病毒载体如牛痘病毒、腺病毒、逆转录病毒和杆状病毒等牛痘病毒已广泛用于构建多价疫苗;逆转录病毒正被试验用于基因治疗;杆状病毒载体-昆虫细胞体系也已成功用于几百种外源基因的高效表达
55.磷酸钙沉淀法将溶解的DNA加在NaH2PO4溶液中,再逐渐加入CaCl2溶液,当NaH2PO4和CaCl2形成Ca3PO4沉淀时,DNA被包裹在当中,形成DNA-Ca3PO4共沉淀当沉淀物与细胞表面接触时,通过细胞吞噬作用将DNA导入其中优点是方法简单、可进行共转化,可将不含选择性标记的DNA和含选择性标记的DNA放在一起进行形成混合的共沉淀物,一起导入细胞
56.磷酸钙沉淀法将溶解的DNA加在NaH2PO4溶液中,再逐渐加入CaCl2溶液,当NaH2PO4和CaCl2形成Ca3PO4沉淀时,DNA被包裹在当中,形成DNA-Ca3PO4共沉淀当沉淀物与细胞表面接触时,通过细胞吞噬作用将DNA导入其中优点是方法简单、可进行共转化,可将不含选择性标记的DNA和含选择性标记的DNA放在一起进行形成混合的共沉淀物,一起导入细胞
57.植物组织和细胞培养指在无菌和人工控制的营养(培养基)及环境条件(光照、温度)下,研究植物的细胞、组织和器官的生长以及控制其生长发育的技术
58.悬浮培养在液体培养基中,能够保持良好分散性的细胞和小的细胞聚集体(细胞团)的培养(在此培养条件下,组织化水平较低)
59..细胞培养利用单个细胞进行液体或固体培养,诱导其增殖及分化(目的是为了得到单细胞无性繁殖系)
60.分生组织培养又称生长锥培养,在人工培养基上培养茎端分生组织细胞
61.外植体用于植物组织(细胞)培养的器官或组织(的切段),植物的各部位如根、茎、叶、花、果、穗、胚珠、胚乳、花药和花粉等均可作为外植体进行组织培养
62..器官形成是指在组织培养或悬浮培养物中芽、根或花等器官的分化与形成或者在先形成的小根基部迅速形成愈伤组织,然后再形成芽;或者在不同部位分别形成芽和根之后,再形成锥管组织而将二者连成一个轴,最后形成小植株
63.无性繁殖又叫克隆,指使用母体培养物反复进行继代培养时,通过同种外植体而获得越来越多的无性繁殖后代
65.突变体细胞本身发生遗传变异或应用诱变处理发生的遗传变异所得的新细胞66.继代培养由最初的外植体上切下的新增殖的组织,培养一代称为“第一代培养”,连续多代的培养就称为继代培养67.培养基是植物离体器官、组织或细胞的无菌土壤,营养成分可调控植物细胞或组织培养基常含有无机盐、碳源、有机氮源、植物生长激素、维生素等成分(表6-6列出了几种常用培养基的化学组成)68.植物激素是植物代谢过程中形成的生长调节物质,在极低浓度(小于1微摩尔)时即能调节植物的生育过程,并能从合成部位转运到作用部位而发挥作用69.成批培养法将培养基一次性地加入反应器,接种、培养一定时间后收获细胞的方式70.半连续培养法在反应器中投料和接种培养一段时间后,将部分培养液和新鲜培养液进行交换的培养方法71,连续培养法利用连续培养反应器,在投料和接种一段时间后,以一定的速度连续采集细胞和培养液,并以同样速度供给新鲜培养基以使细胞生长环境维持恒定的培养方法
72.固定化培养法:利用固定化反应器进行培养,将细胞固定于网状多孔板、尼龙网套和中空纤维膜等反应器的膜表面,放入培养液中进行培养及连续收集培养物的方法
73.诱导子:能触发形成植物抗生素信号的物质细胞内或细胞外
74.生物诱导子:植物体在防御过程中为对抗微生物感染而产生的物质
75.非生物诱导子不是植物细胞中天然成分但又能触发植物细胞形成抗毒素信号的物质
76.前体饲养:是增加次级代谢产物产率的重要方法,次级代谢产物的合成依赖于3中主要原材料的供应
77.发酵工程又称为微生物工程:是利用微生物制造工业原料与工业产品并提供服务的技术
78.微生物发酵工程:是一个十分复杂的自催化工程,是生物技术的基础工程,用于:如基因工程、细胞工程、酶工程都与发酵工程相关
79.自然选育:即不经人工处理,利用微生物的自然突变进行菌种选育的过程称为~80诱变育种即用人工方法诱发突变;突变发生部位一般是在遗传物质DNA上,并可稳定遗传81原生质体融合:是将两个亲株分别通过去除细胞壁,使菌体细胞在高渗环境中释放出由原生质体包被着的球状体,在高渗条件下混合两个亲株的原生质体,由PEG作促融剂使它们相互凝集发生细胞融合,接着两细胞基因组由接触到交换,从而实现遗传物质重组,在再生细胞中就有可能挑选出较理想的重组子82氨基酸利用生物技术得到基因克隆的生产菌,或采用融合技术提高氨基酸产量83抗生素可从产生菌中分离出生物合成酶基因,进行克隆,提高生产菌的生物量,或得到新的杂合抗生素84维生素构建基因工程菌,简化维生素的生产工艺(如VitC)85疫苗利用基因工程技术将抗原克隆到E.coli或酵母中,用工程菌生产疫苗,产量高、工艺简单、操作安全86鸟枪克隆法这是一种由生物基因组提取目的基因的方法首先利用物理方法如剪切力、超声波等或酶化学方法如限制性内切核酸酶将生物细胞染色体DNA切割成为基因水平的许多片段,继而将这些片段与适当的载体结合,将重组DNA转入受体菌扩增87杂合抗生素应用遗传重组技术改造菌种,产生新的工程菌,制备的新型抗菌活性化合物88诱导法是利用反应过渡态类似物为半抗原制作单克隆抗体,筛选出具高催化活性的单抗即抗体酶89拷贝法主要根据抗体生成过程中抗原-抗体互补性来设计的90引入法则借助基因工程和蛋白质工程将催化基因引入到特异抗体的抗原结合位点上,使其获得催化功能91化学修饰法对抗体进行化学修饰,使抗体与催化基团相连92抗体酶:由抗原诱导产生的,在结构上与抗原高度互补并与抗原具有特异结合功能的免疫球蛋白93酶是一类具有催化功能的生物分子94抗体是指能与相应抗原特异性结合具有免疫功能的球蛋白95多克隆抗体病原微生物含有多种抗原决定簇的抗原物质,因此这些抗体制剂也是多种抗体的混合物.96模板替换使用与鼠对应部分有较大同源性的人框架区替换鼠框架区的方法97表面重塑对鼠CDR区及框架区表面残基进行镶饰或重塑,使其类似于人抗体CDR轮廓或人框架区的方法98补偿变换在人的框架区选择与CDR有相互作用,与抗体的亲合力有密切关系或对框架区空间结构折叠起关键作用的残基进行改变,以补偿完全的CDR移植的方法99定位保留在人源化的改形抗体中,保留了鼠源性抗体可变区中参与抗原结合的氨基酸残基(包括CDR和框架区中的一些关键残基)的方法100固定化酶限制或固定于特定空间位置的酶,即经物理化学方法处理,使酶变成不易随水流失即运动受到限制,而又能发挥催化作用的酶制剂101固定化细胞将细胞限制或定位于特定空间位置的方法102人工模拟酶;又称为人工酶或模拟酶,是根据酶的作用原理,用人工的方法合成的具有活性中心和催化作用的非蛋白质结构的化合物103分子印迹指制备对某一特定分子具有选择性的聚合物的过程,该特定分子称为印迹分子或模板104有机相酶是在“非水酶学”的基础上发展起来的新兴(20C,80Y中期)领域105染色体组突变指由有丝分裂或减数分裂异常导致染色体数目或组数的变化;如由单倍体突变成二倍体或多倍体等106阻断变株法:通过一系列阻断变株的互补结果来确定被克隆DNA片段的性质即首先经诱变获得一系列生物合成阻断变株(不能合成抗生素),用互补共合成法来确定这些变株在生物合成途径中的相互位置107突变克隆法:利用整合质粒或噬菌体,将原株DNA转入到抗生素产生菌中108酶是一类具有催化功能的生物分子。