还剩67页未读,继续阅读
本资源只提供10页预览,全部文档请下载后查看!喜欢就下载吧,查找使用更方便
文本内容:
目 录第一篇土壤分析……………………………………………………….………….…………81—1土壤样品的采集与处理……………………….……………………………………81—
1.1土壤样品的采集…….………………………………………………………….81—
1.2土壤样品的处理………………………………………………………………..91—2土壤水分的测定……………………………………………………………………101—
2.1土壤吸湿水的测定…………………………………………………………….101—
2.2土壤田间持水量的测定……………………………………………………….101—3土壤有机质的测定…………………………………………………………………111—4土壤中氮的测定……………………………………………………………………131—
1.1 籽粒样品的采集、制备与贮存………………………………………..554—
3.1开氏法测定粗蛋白质……………………………………………………58 4—
8.1 单指示剂甲醛滴定法……………………………………………….….754—
8.2 双指示剂甲醛滴定法…………………………………………………..754—
1.1 土壤样品的采集1 土样的采集时间和工具土壤中有效养分的含量因季节的不同而有很大的差异分析土壤养分供应的情况时,一般都在晚秋或早春采样采样时要特别注意时间因素,同一时间内采取的土样分析结果才能相互比较常用的采样工具有铁锨、管形土钻和螺旋土钻2 土壤样品采集的方法采样的方法因分析目的不同而不同1土壤剖面样品研究土壤基本理化性质,必须按土壤发生层次采样一般每层采样1kg,分别装入袋中并做好标记2土壤物理性质样品如果是进行土壤物理性质的测定,必须采集原状土壤样品在取样过程中,须保持土块不受挤压,样品不变形,并要剥去土块外面直接与土铲接触而变形部分3土壤盐分动态样品研究盐分在土壤剖面中的分布和变动时,不必按发生层次采样,可从地表起每10cm或20cm采集一个样品4耕作层土壤混合样品为了评定土壤耕层肥力或研究植物生长期内土壤耕层中养分供求情况,采用只取耕作层20cm深度的土样,对作物根系较深的或熟土层较厚的土壤,可适当增加采样深度采样点的选择一般可根据土壤、作物、地形、灌溉条件等划分采样单位在同一采样单位里地形、土壤、生产条件应基本相同土壤的混合样品是由多点混合而成一般采样区的面积小于10亩时,可取5个点的土壤混合;面积为10—40亩时,可取5—15个点的土壤混合;面积大于40亩时,可取15—20个点的土壤混合在丘陵山区,一般5—10亩可采一个混合样品在平原地区,一般30—50亩可采一个混合样品采样点的分布方式主要有对角线取样法图1适用于面积不大,地势平坦,肥力均匀的地块棋盘式取样法图2适用于中等面积,地势平坦、地形完整,但地力不均匀的地块之字形取样法图3适用于面积较大,地势不平坦地形多变的地块如果采来的土壤样品数量太多,可用四分法将多余的土壤弃去,一般保留1kg左右的土壤即可四分法的方法是将采集的土壤样品弄碎混合并铺成四方形,然后划对角线分成四等份,取其对角的两份,其余两份弃去如果所得的样品仍然很多,可再用四分法处理,直到所需数量为止取土样1kg装袋,袋内外各放一标签,上面用铅笔写明编号、采集地点、地形、土壤名称、时间、深度、作物、采集人等,采完后将坑或钻眼填平× × ×× × 图1 × × × × × × × ×× × × × × × × × 图2 × ×× ×× × × × × ×× × × × ×× × × × ××× ×× × 图3 1—
1.2 土壤样品的处理土壤样品的处理包括风干、去杂、磨细、过筛、混匀、装瓶保存和登记等操作过程1 风干和去杂从田间采回的土样,除特殊要求鲜样外,一般要及时风干其方法是将土壤样品放在阴凉干燥通风、又无特殊的气体如氯气、氨气、二氧化硫等、无灰尘污染的室内,把样品弄碎后平铺在干净的牛皮纸上,摊成薄薄的一层,并且经常翻动,加速干燥切忌阳光直接曝晒或烘烤在土样稍干后,要将大土块捏碎尤其是粘性土壤,以免结成硬块后难以磨细样品风干后,应拣出枯枝落叶、植物根、残茬、虫体以及土壤中的铁锰结核、石灰结核或石子等,若石子过多,将其拣出并称重,记下所占的百分数2 磨细、过筛和保存进行物理分析时,取风干土样100—200g,放在牛皮纸上,用木块碾碎,放在有盖底的18号筛孔径1mm中,使之通过1mm的筛子,留在筛上的土块再倒在牛皮纸上重新碾磨如此反复多次,直到全部通过为止不得抛弃或遗漏,但石砾切勿压碎筛子上的石砾应拣出称重并保存,以备石砾称重计算之用同时将过筛的土样称重,以计算石砾重量百分数,然后将过筛后的土壤样品充分混合均匀后盛于广口瓶中,作为土壤颗粒分析以及其它物理性质测定之用化学分析时,取风干好的土样如以上方法将其研碎,并使其全部通过18号筛孔径1mm所得的土壤样品,可用以测定速效性养分、pH值等测定全磷、全氮和有机质含量时,可将通过18号筛的土壤样品,进一步研磨,使其全部通过60号筛孔径
0.25mm测定全钾时,应将全部通过100号筛孔径
0.149mm的土壤样品,作为其分析用研磨过筛后的土壤样品混匀后,装入广口瓶中样品装入广口瓶后,应贴上标签,并注明其样号、土类名称、采样地点、采样深度、采样日期、筛孔径、采集人等一般样品在广口瓶内可保存半年至一年瓶内的样品应保存在样品架上,尽量避免日光、高温、潮湿或酸碱气体等的影响,否则影响分析结果的准确性主要仪器土壤筛、土钻、牛皮纸、木块、广口瓶、米尺、铁锨、土壤袋、标签、铅笔 1—2 土壤水分的测定吸湿水和田间持水量 田间持水量是土壤排除重力水后,本身所保持的毛管悬着水的最大数量它是研究土、水、植物的关系,研究土壤水分状况,土壤改良、合理灌溉不可缺少的水分常数吸湿水是风干土样水分的含量,是各项分析结果计算的基础1—
2.1 土壤吸湿水的测定测定原理风干土壤样品中的吸湿水在105±2℃的烘箱中可被烘干,从而可求出土壤失水重量占烘干后土重的百分数在此温度下,自由水和吸湿水都被烘干,然而土壤有机质不能被分解 测定步骤
1.取一干净又经烘干的有标号的铝盒或称量瓶在分析天平上称重为A
2.然后加入风干土样5—10g精确到
0.0001g,并精确称出铝盒与土样的总重量B
3.将铝盒盖斜盖在铝盒上面呈半开启状态,放入烘箱中,保持烘箱内温度105±2℃,烘6小时
4.待烘箱内温度冷却到50℃时,将铝盒从烘箱中取出,并放入干燥器内冷却至室温称重,然后再启开铝盒盖烘2小时,冷却后称其恒重为C前后两次称重之差不大于3mg结果计算该土样吸湿水的含量%=[B-A-C-A/C-A×100%=[湿土重-烘干土重/烘干土重×100%注意事项1要控制好烘箱内的温度,使其保持在105±2℃,过高过低都将影响测定结果的准确性2干燥器内所放的干燥剂要在充分干燥的情况下方可放入烘干土样否则干燥剂要重新烘干或更换后方可放入干燥器中主要仪器铝盒、分析天平
0.0001g、角匙、烘箱、坩埚钳、干燥器、瓷盘 1—
2.2 田间持水量的测定测定方法铁框法
1.在田间选择具有代表性的地块,面积不少于
0.5m2,仔细平整地面
2.将铁框击入平整好的地块约6—7cm深,其中大框50×50cm2在外,小框25×25cm2在内,大小框之间为保护区,其之间距离要均匀一致小框内为测定区
3.在上述地块旁挖一剖面,测定各层容重及其自然含水量从而计算出总孔隙度及自然含水量所占容积%,然后根据总孔隙度与现有自然含水量所占容积%之差,求出实验土层一般为1m左右全部孔隙都充满水时应灌水的数量,为保证土壤充分渗透,实际灌水量将为计算需水量的
1.5倍按下式计算测试区和保护区的灌水量灌水量m3=Ha-w×d×s×h式中a—土壤饱和含水量%;w—土壤自然含水量%;d—土壤容重g/cm3;s—测试区面积m2;h—土层需灌水深度m;H—使土壤达饱和含水量的保证系数H值大小与土壤质地、地下水位深度有关,通常为
1.5—3,一般粘性土或地下水位浅的土壤选用
1.5,反之,选用2或
34.灌水前在测试区和保护区各插厘米尺一根,灌水时,为防止土壤冲刷,应在灌水处铺上草或席子
5.灌水时先往保护区灌水,灌到一定程度后,立即向测定区灌水,使内外均保持5cm厚的水层,一直到灌完为止
6.灌水完毕,土表要用草或席子以及塑料布盖严,以防蒸发和雨淋
7.取样时间,一般为砂土类、壤土类在灌水后24小时取样,粘土类必须在48小时或更长时间以后方可采样测定
8.采样于测定区按正方形对角线打钻,每次打3个钻孔,从上至下按土壤发生层分别采土15—20g精确到
0.01g,放入铝盒,测其含水量以后每天测定一次,直到前后两天的含水量无显著差异,水分运动基本平衡为止结果计算重量田间持水量%=湿土重-烘干土重/烘干土重×100容积田间持水量=重量田间持水量×容积注意事项因地下水位的高低可影响所测得的田间持水量的数值,因此在报所测田间持水量的结果时必须注明地下水的深度主要仪器铁锨、锤子、铁框50×50cm2和25×25cm2各1个、草席、塑料布、水桶、土钻、铝盒、天平
0.01g、厘米尺 1—3 土壤有机质的测定重铬酸钾容量法 土壤有机质既是植物矿质营养和有机营养的源泉,又是土壤中异养型微生物的能源物质,同时也是形成土壤结构的重要因素测定土壤有机质含量的多少,在一定程度上可说明土壤的肥沃程度因为土壤有机质直接影响着土壤的理化性状测定原理在加热的条件下,用过量的重铬酸钾—硫酸K2Cr2O7-H2SO4溶液,来氧化土壤有机质中的碳,Cr2O-27等被还原成Cr+3,剩余的重铬酸钾K2Cr2O7用硫酸亚铁FeSO4标准溶液滴定,根据消耗的重铬酸钾量计算出有机碳量,再乘以常数
1.724,即为土壤有机质量其反应式为重铬酸钾—硫酸溶液与有机质作用2K2Cr2O7+3C+8H2SO4=2K2SO4+2Cr2SO43+3CO2↑+8H2O硫酸亚铁滴定剩余重铬酸钾的反应K2Cr2O7+6FeSO4+7H2SO4=K2SO4+Cr2SO43+3Fe2SO43+7H2O测定步骤
1.在分析天平上准确称取通过60目筛子<
0.25mm的土壤样品
0.1—
0.5g精确到
0.0001g,用长条腊光纸把称取的样品全部倒入干的硬质试管中,用移液管缓缓准确加入
0.136mol/L重铬酸钾—硫酸K2Cr2O7-H2SO4溶液10ml,在加入约3ml时,摇动试管,以使土壤分散,然后在试管口加一小漏斗
2.预先将液体石蜡油或植物油浴锅加热至185—190℃,将试管放入铁丝笼中,然后将铁丝笼放入油浴锅中加热,放入后温度应控制在170—180℃,待试管中液体沸腾发生气泡时开始计时,煮沸5分钟,取出试管,稍冷,擦净试管外部油液
3.冷却后,将试管内容物小心仔细地全部洗入250ml的三角瓶中,使瓶内总体积在60—70ml保持其中硫酸浓度为1—
1.5mol/l此时溶液的颜色应为橙黄色或淡黄色然后加邻啡罗啉指示剂3—4滴,用
0.2mol/l的标准硫酸亚铁FeSO4溶液滴定,溶液由黄色经过绿色、淡绿色突变为棕红色即为终点
4.在测定样品的同时必须做两个空白试验,取其平均值可用石英砂代替样品,其他过程同上结果计算在本反应中,有机质氧化率平均为90%,所以氧化校正常数为100/90,即为
1.1有机质中碳的含量为58%,故58g碳约等于100g有机质,1g碳约等于
1.724g有机质由前面的两个反应式可知1mol的K2Cr2O7可氧化3/2mol的C,滴定1molK2Cr2O7,可消耗6molFeSO4,则消耗1molFeSO4即氧化了3/2×1/6C=1/4C=3计算公式为有机质g/kg=[V0-VN×
0.003×
1.724×
1.1/样品重×1000式中V0—滴定空白液时所用去的硫酸亚铁毫升数V—滴定样品液时所用去的硫酸亚铁毫升数N—标准硫酸亚铁的浓度mol/L附我国第二次土壤普查有机质含量分级表如下,以供参考级 别一 级二 级三 级四级五 级六 级有机质%>4030—4020—3010—206—10<6注意事项
1.根据样品有机质含量决定称样量有机质含量在大于50g/kg的土样称
0.1g,20—40g/kg的称
0.3g,少于20g/kg的可称
0.5g以上
2.消化煮沸时,必须严格控制时间和温度
3.最好用液体石蜡或磷酸浴代替植物油,以保证结果准确磷酸浴需用玻璃容器
4.对含有氯化物的样品,可加少量硫酸银除去其影响对于石灰性土样,须慢慢加入浓硫酸,以防由于碳酸钙的分解而引起剧烈发泡对水稻土和长期渍水的土壤,必须预先磨细,在通风干燥处摊成薄层,风干10天左右
5.一般滴定时消耗硫酸亚铁量不小于空白用量的1/3,否则,氧化不完全,应弃去重做消煮后溶液以绿色为主,说明重铬酸钾用量不足,应减少样品量重做仪器、试剂
1.主要仪器分析天平
0.0001g、硬质试管、长条腊光纸、油浴锅、铁丝笼消煮时插试管用、温度计0—360℃ 、滴定管25ml、吸管10ml、三角瓶250ml、小漏斗、量筒100ml、角匙、滴定台、吸水纸、滴瓶50ml、试管夹、吸耳球、试剂瓶500ml
2.试剂
10.136mol/LK2Cr2O7-H2SO4的标准溶液准确称取分析纯重铬酸钾K2Cr2O740g溶于500ml蒸馏水中,冷却后稀释至1L,然后缓慢加入比重为
1.84的浓硫酸H2SO41000ml,并不断搅拌,每加入200ml时,应放置10—20分钟使溶液冷却后,再加入第二份浓硫酸H2SO4加酸完毕,待冷后存于试剂瓶中备用
20.2mol/LFeSO4标准溶液准确称取分析纯硫酸亚铁FeSO4·7H2O56g或硫酸亚铁铵[FeNH42SO42·6H2O]80g,溶解于蒸馏水中,加3mol/L的硫酸H2SO460ml,然后加水稀释至1L,此溶液的标准浓度,可以用
0.0167mol/L重铬酸钾K2Cr2O7标准溶液标定3邻啡罗啉指示剂称取分析纯邻啡罗啉
1.485g,化学纯硫酸亚铁FeSO4·7H2O
0.695g,溶于100ml蒸馏水中,贮于棕色滴瓶中此指示剂以临用时配制为好 1—4 土壤中氮的测定全氮、速效氮 1—
4.1 土壤全氮量的测定重铬酸钾—硫酸消化法土壤含氮量的多少及其存在状态,常与作物的产量在某一条件下有一定的正相关,从目前我国土壤肥力状况看,80%左右的土壤都缺乏氮素因此,了解土壤全氮量,可作为施肥的参考,以便指导施肥达到增产效果方法原理土壤与浓硫酸及还原性催化剂共同加热,使有机氮转化成氨,并与硫酸结合成硫酸铵;无机的铵态氮转化成硫酸铵;极微量的硝态氮在加热过程中逸出损失;有机质氧化成CO2样品消化后,再用浓碱蒸馏,使硫酸铵转化成氨逸出,并被硼酸所吸收,最后用标准酸滴定主要反应可用下列方程式表示NH2·CH2CO·NH-CH2COOH+H2SO4=2NH2-CH2COOH+SO2+[O]NH2-CH2COOH+3H2SO4=NH3+2CO2↑+3SO2↑+4H2O2NH2-CH2COOH+2K2Cr2O7+9H2SO4=NH42SO4+2K2SO4+2Cr2SO43+4CO2↑+10H2ONH42SO4+2NaOH=Na2SO4+2H2O+2NH3↑NH3+H3BO3=H3BO3·NH3H3BO3·NH3+HCl=H3BO3+NH4Cl操作步骤
1.在分析天平上称取通过60号筛孔径为
0.25mm的风干土壤样品
0.5—1g精确到
0.001g,然后放入150ml开氏瓶中
2.加浓硫酸H2SO45ml,并在瓶口加一只弯颈小漏斗,然后放在调温电炉上高温消煮15分钟左右,使硫酸大量冒烟,当看不到黑色碳粒存在时即可如果有机质含量超过5%时,应加1—2g焦硫酸钾,以提高温度加强硫酸的氧化能力
3.待冷却后,加5ml饱和重铬酸钾溶液,在电炉上微沸5分钟,这时切勿使硫酸发烟
4.消化结束后,在开氏瓶中加蒸馏水或不含氮的自来水70ml,摇匀后接在蒸馏装置上,再用筒形漏斗通过Y形管缓缓加入40%氢氧化钠NaOH25ml
5.将一三角瓶接在冷凝管的下端,并使冷凝管浸在三角瓶的液面下,三角瓶内盛有25ml2%硼酸吸收液和定氮混合指示剂1滴
6.将螺丝夹打开蒸汽发生器内的水要预先加热至沸,通入蒸汽,并打开电炉和通自来水冷凝
7.蒸馏20分钟后,检查蒸馏是否完全检查方法取出三角瓶,在冷凝管下端取1滴蒸出液于白色瓷板上,加纳氏试剂1滴,如无黄色出现,即表示蒸馏完全,否则应继续蒸馏,直到蒸馏完全为止或用红色石蕊试纸检验
8.蒸馏完全后,降低三角瓶的位置,使冷凝管的下端离开液面,用少量蒸馏水冲洗冷凝的管的下端洗入三角瓶中,然后用
0.02mol/L盐酸HCl标准液滴定,溶液由蓝色变为酒红色时即为终点记下消耗标准盐酸的毫升数测定时同时要做空白试验,除不加试样外,其它操作相同结果计算N%=[V-V0×N×
0.014]/样品重×100式中V—滴定时消耗标准盐酸的毫升数;V0—滴定空白时消耗标准盐酸的毫升数;N—标准盐酸的摩尔浓度;
0.014—氮原子的毫摩尔质量g/mmol;100—换算成百分数注意事项
1.在使用蒸馏装置前,要先空蒸5分钟左右,把蒸汽发生器及蒸馏系统中可能存在的含氮杂质去除干净,并用纳氏试剂检查
2.样品经浓硫酸消煮后须充分冷却,然后再加饱和重铬酸钾溶液,否则作用非常激烈,易使样品溅出加入重铬酸钾后,如果溶液出现绿色,或消化1—2分钟后即变绿色,这说明重铬酸钾量不足,在这种情况下,可补加1g固体重铬酸钾K2Cr2O7,然后继续消化
3.若蒸馏产生倒吸现象,可再补加硼酸吸收液,仍可继续蒸馏
4.在蒸馏过程中必须冷凝充分,否则会使吸收液发热,使氨因受热而挥发,影响测定结果
5.蒸馏时不要使开氏瓶内温度太低,使蒸气充足,否则易出现倒吸现象另外,在实验结束时要先取下三角瓶,然后停止加热,或降低三角瓶使冷凝管下端离开液面仪器、试剂
1.主要仪器开氏瓶150ml、弯颈小漏斗、分析天平、电炉、普通定氮蒸馏装置
2.试剂1 浓硫酸化学纯,比重
1.842饱和重铬酸钾溶液称取200g化学纯重铬酸钾溶于1000ml热蒸馏水中340%氢氧化钠NaOH溶液称取工业用氢氧化钠NaOH400g,加水溶解不断搅拌,再稀释定容至1000ml贮于塑料瓶中42%硼酸溶液称取20g硼酸加入热蒸馏水60℃溶解,冷却后稀释定容至1000ml,最后用稀盐酸HCl或稀氢氧化钠NaOH调节pH至
4.5定氮混合指示剂显葡萄酒红色5定氮混合指示剂称取
0.1g甲基红和
0.5g溴甲酚绿指示剂放入玛瑙研钵中,加入100ml95%酒精研磨溶解,此液应用稀盐酸HCl或氢氧化钠NaOH调节pH至
4.
560.02mol/L盐酸标准溶液取浓盐酸HCl比重
1.
191.67ml,用蒸馏水稀释定容至1000ml,然后用标准碱液或硼砂标定7钠氏试剂定性检查用称氢氧化钾KOH134g溶于460ml蒸馏水中;称取碘化钾KI20g溶于50ml蒸馏水中,加碘化汞HgI使溶液至饱和状态大约32g左右然后将以上两种溶液混合即成1—
4.2 土壤水解性氮的测定碱解扩散法土壤水解性氮,包括矿质态氮和有机态氮中比较易于分解的部分其测定结果与作物氮素吸收有较好的相关性测定土壤中水解性氮的变化动态,能及时了解土壤肥力,指导施肥测定原理在密封的扩散皿中,用
1.8mol/L氢氧化钠NaOH溶液水解土壤样品,在恒温条件下使有效氮碱解转化为氨气状态,并不断地扩散逸出,由硼酸H3BO3吸收,再用标准盐酸滴定,计算出土壤水解性氮的含量旱地土壤硝态氮含量较高,需加硫酸亚铁使之还原成铵态氮由于硫酸亚铁本身会中和部分氢氧化钠,故需提高碱的浓度
1.8mol/L,使碱保持
1.2mol/L的浓度水稻土壤中硝态氮含量极微,可以省去加硫酸亚铁,直接用
1.2mol/L氢氧化钠水解操作步骤
1.称取通过18号筛孔径1mm风干样品2g精确到
0.001g和1g硫酸亚铁粉剂,均匀铺在扩散皿外室内,水平地轻轻旋转扩散皿,使样品铺平水稻土样品则不必加硫酸亚铁
2.用吸管吸取2%硼酸溶液2ml,加入扩散皿内室,并滴加1滴定氮混合指示剂,然后在皿的外室边缘涂上特制胶水,盖上毛玻璃,并旋转数次,以便毛玻璃与皿边完全粘合,再慢慢转开毛玻璃的一边,使扩散皿露出一条狭缝,迅速用移液管加入10ml
1.8mol/L氢氧化钠于皿的外室水稻土样品则加入10ml
1.2mol/L氢氧化钠,立即用毛玻璃盖严
3.水平轻轻旋转扩散皿,使碱溶液与土壤充分混合均匀,用橡皮筋固定,贴上标签,随后放入40℃恒温箱中24小时后取出,再以
0.01mol/LHCl标准溶液用微量滴定管滴定内室所吸收的氮量,溶液由蓝色滴至微红色为终点,记下盐酸用量毫升数V同时要做空白试验,滴定所用盐酸量为V0结果计算水解性氮mg/100g土=N×V-V0×14/样品重×100式中N—标准盐酸的摩尔浓度;V—滴定样品时所用去的盐酸的毫升数;V0—空白试验所消耗的标准盐酸的毫升数;14—一个氮原子的摩尔质量mg/mol;100—换算成每百克样品中氮的毫克数注意事项1滴定前首先要检查滴定管的下端是否充有气泡若有,首先要把气泡排出2滴定时,标准酸要逐滴加入,在接近终点时,用玻璃棒从滴定管尖端沾取少量标准酸滴入扩散皿内3特制胶水一定不能沾污到内室,否则测定结果将会偏高4扩散皿在抹有特制胶水后必须盖严,以防漏气主要仪器扩散皿、微量滴定管、1/1000分析天平、恒温箱、玻璃棒 毛玻璃、皮筋、吸管2ml和10ml,腊光纸、角匙、瓷盘试剂
11.8mol/L氢氧化钠溶液称取化学纯氢氧化钠72g,用蒸馏水溶解后冷却定容到1000ml
21.2mol/L氢氧化钠溶液称取化学纯氢氧化钠48g用蒸馏水溶解定容到1000ml32%硼酸溶液称取20g硼酸,用热蒸馏水约60℃溶解,冷却后稀释至1000ml,用稀盐酸或稀氢氧化钠调节pH至
4.5定氮混合指示剂显葡萄酒红色
40.01mol/L盐酸标准溶液先配制
1.0mol/L盐酸溶液,然后稀释100倍,用标准碱标定5定氮混合指示剂与土壤全氮的测定配法相同6特制胶水阿拉伯胶称取10g粉状阿拉伯胶,溶于15ml蒸馏水中10份、甘油10份,饱和碳酸钾5份混合即成最好放置在盛有浓硫酸的干燥器中以除去氨7硫酸亚铁粉状将分析纯硫酸亚铁磨细保存于阴凉干燥处 1—5 土壤中磷的测定全磷、速效磷 1—
5.1 土壤全磷的测定硫酸一高氯酸消煮法方法原理在高温条件下,土壤中含磷矿物及有机磷化合物与高沸点的硫酸和强氧化剂高氯酸作用,使之完全分解,全部转化为正磷酸盐而进入溶液,然后用钼锑抗比色法测定操作步骤
1.在分析天平上准确称取通过100目筛孔径为
0.25mm的土壤样品1g精确到
0.0001置于50ml三角瓶中,以少量水湿润,并加入浓H2SO48ml,摇动后最好放置过夜再加入70—72%的高氯酸HClO410滴摇匀
2.于瓶口上放一小漏斗,置于电炉上加热消煮至瓶内溶液开始转白后,继续消煮20分钟,全部消煮时间约为45—60分钟
3.将冷却后的消煮液用水小心地洗入100ml容量瓶中,冲冼时用水应少量多次轻轻摇动容量瓶,待完全冷却后,用水定容,用干燥漏斗和无磷滤纸将溶液滤入干燥的100ml三角瓶中同时做空白试验
4.吸取滤液2—10ml于50ml容量瓶中,用水稀释至30ml,加二硝基酚指示剂2滴,用稀氢氧化钠NaOH溶液和稀硫酸H2SO4溶液调节pH至溶液刚呈微黄色
5.加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀,用水定容至刻度
6.在室温高于15℃的条件下放置30分钟后,在分光光度计上以700nm的波长比色,以空白试验溶液为参比液调零点,读取吸收值,在工作曲线上查出显色液的P—mg/L数
7.工作曲线的绘制分别吸取5mg/L标准溶液0,1,2,3,4,5,6ml于50ml容量瓶中,加水稀释至约30ml,加入钼锑抗显色剂5ml摇匀定容即得0,
0.
10.
20.
30.
40.
50.6mg/LP标准系列溶液,与待测溶液同时比色,读取吸收值在方格坐标纸上以吸收值为纵坐标,Pmg/L数为横坐标,绘制成工作曲线结果计算全P %=显色液mg/L×显色液体积×分取倍数/W×106×100式中显色液Pmg/L—从工作曲线上查得的Pmg/L;显色液体积—本操作中为50ml;分取倍数—消煮溶液定容体积/吸取消煮溶液体积;106—将ug换算成gW—土样重g两次平行测定结果允许误差为
0.005%仪器、试剂
1.主要仪器分析天平、小漏斗、大漏斗、三角瓶50ml和100ml、容量瓶50ml和100ml、移液管5ml和10ml、电炉、分光光度计
2.试剂
10.5mol/L碳酸氢钠浸提液称取化学纯碳酸氢钠
42.0g溶于800ml水中,以
0.5mol/L氢氧化钠调节pH至
8.5,洗入1000ml容量瓶中,定容至刻度,贮存于试剂瓶中此溶液贮存于塑料瓶中比在玻璃瓶中容易保存,若贮存超过1个月,应检查pH值是否改变2无磷活性炭活性碳常常含有磷,应做空白试验,检查有无磷存在如含磷较多,须先用2mol/L盐酸浸泡过夜,用蒸馏水冲洗多次后,再用
0.5mol/L碳酸氢钠浸泡过夜,在平瓷漏斗上抽气过滤,每次用少量蒸馏水淋洗多次,并检查到无磷为止如含磷较少,则直接用碳酸氢钠处理即可3磷P标准溶液准确称取45℃烘干4—8小时的分析纯磷酸二氢钾
0.2197g于小烧杯中,以少量水溶解,将溶液全部洗入1000ml容量瓶中,用水定容至刻度,充分摇匀,此溶液即为含50mg/L的磷基准溶液吸取50ml此溶液稀释至500ml,即为5mg/L的磷标准溶液此溶液不能长期保存比色时按标准曲线系列配制4硫酸钼锑贮存液取蒸馏水约400ml,放入1000ml烧杯中,将烧杯浸在冷水中,然后缓缓注入分析纯浓硫酸
208.3ml并不断搅拌,冷却至室温另称取分析纯钼酸铵20g溶于约60℃的200ml蒸馏水中,冷却然后将硫酸溶液徐徐倒入钼酸铵溶液中,不断搅拌,再加入100ml
0.5%酒石酸锑钾溶液,用蒸馏水稀释至1000ml,摇匀贮于试剂瓶中5二硝基酚称取
0.25g二硝基酚溶于100ml蒸馏水中6钼锑抗混合色剂在100ml钼锑贮存液中,加入
1.5g左旋旋光度+21—+22°抗坏血酸,此试剂有效期24小时,宜用前配制1—
5.2 土壤中速效磷的测定碳酸氢钠法了解土壤中速效磷供应状况,对于施肥有着直接的指导意义土壤速效磷的测定方法很多,由于提取剂的不同所得的结果也不一致提取剂的选择主要根据各种土壤性质而定,一般情况下,石灰性土壤和中性土壤采用碳酸氢钠来提取,酸性土壤采用酸性氟化铵或氢氧化钠—草酸钠法来提取方法原理石灰性土壤由于大量游离碳酸钙存在,不能用酸溶液来提取速效磷,可用碳酸盐的碱溶液由于碳酸根的同离子效应,碳酸盐的碱溶液降低碳酸钙的溶解度,也就降低了溶液中钙的浓度,这样就有利于磷酸钙盐的提取同时由于碳酸盐的碱溶液也降低了铝和铁离子的活性,有利于磷酸铝和磷酸铁的提取此外,碳酸氢钠碱溶液中存在着OH-、HCO-
3、CO2-3等阴离子有利于吸附态磷的交换,因此,碳酸氢钠不仅适用于石灰性土壤,也适用于中性和酸性土壤中速效磷的提取待测液用钼锑抗混合显色剂在常温下进行还原,使黄色的锑磷钼杂多酸还原成为磷钼蓝进行比色操作步骤
1.称取通过18号筛孔径为1mm的风干土样5g精确到
0.01g于200ml三角瓶中,准确加入
0.5mol/L碳酸氢钠溶液100ml再加一小角勺无磷活性碳,塞紧瓶塞,在振荡机上振荡30分钟振荡机速率为每分钟150—180次,立即用无磷滤纸干过滤,滤液承接于100ml三角瓶中最初7~8ml滤液弃去
2.吸取滤液10ml含磷量高时吸取
2.5—5ml;同时应补加
0.5mol/L碳酸氢钠溶液至10ml于50ml量瓶中,加硫酸钼锑抗混合显色剂5ml充分摇匀,排出二氧化碳后加水定容至刻度,再充分摇匀
3.30分钟后,在分光光度计上比色波长660nm,比色时须同时做空白测定
4.磷标准曲线绘制分别吸取5mg/L磷标准溶液
0、
1、
2、
3、
4、5ml于50ml容量瓶中,每一容量瓶即为
0、
0.
1、
0.
2、
0.
3、
0.
4、
0.5mg/L磷,再逐个加入
0.5mol/L碳酸氢钠10ml和硫酸一钼锑抗混合显色剂5ml,然后同待测液一样进行比色绘制标准曲线结果计算土壤速效Pmg/kg=比色液mg/L×定容体积/W×分取倍数式中比色液mg/L—从工作曲线上查得的比色液磷的mg/L数;W—称取土样重量g分取倍数—100/10土壤速效磷Pmg/kg 等级<5 低5—10 中>10 高注意事项
1.活性碳一定要洗至无磷无氯反应
2.钼锑抗混合剂的加入量要十分准确,特别是钼酸量的大小,直接影响着显色的深浅和稳定性标准溶液和待测液的比色酸度应保持基本一致,它的加入量应随比色时定容体积的大小按比例增减
3.温度的大小影响着测定结果提取时要求温度在25℃左右室温太低时,可将容量瓶放入40—50℃的烘箱或热水中保温20分钟,稍冷后方可比色仪器药品
1.主要仪器往复振荡机、电子天平1/
100、分光光度计、三角瓶250ml和100ml、烧杯100ml、移液管10ml、50ml、容量瓶50ml、吸耳球、漏斗60ml、滤纸、坐标纸、擦镜纸、小滴管
2.试剂配制见1—
5.1 1—6 土壤钾素的测定 钾是作物生长发育过程中所必需的营养元素之一土壤中的钾素主要呈无机形态存在,根据钾的存在形态和作物吸收能力,可把土壤中的钾素分为四部分土壤矿物态钾,此为难溶性钾;非交换态钾,为缓效性钾;交换性钾;水溶性钾后两种为速效性钾,可以被当季作物吸收利用,是反映钾肥肥效高低的标志之一因此,了解钾素在土壤中的含量,对指导合理施用钾肥具有重要的意义 1—
6.1 土壤速效钾的测定醋酸铵—火焰光度计法方法原理以中性1mol/LNH4OAc溶液为浸提剂,NH+4与土壤胶体表面的K+进行交换,连同水溶性的K+一起进入溶液,浸出液中的钾可用火焰光度计法直接测定主要仪器1/1000天平、振荡机、火焰光度计、三角瓶250ml100ml、漏斗60ml、滤纸、坐标纸、角匙、吸耳球、移液管50ml试剂1中性
1.0mol/LNH4OAc溶液,称
77.08gNH4OAc溶于近1升水中,用稀HOAc或NH4OH调节至pH
7.0用水定容至1升2K标准溶液 称取
0.1907克KCl溶于1mol/LNH4OAc溶液中,完全溶解后用1mol/LNH4OAc溶液定容至1升,即为含100mg/LK的NH4OAc溶液用时分别吸取此100mg/LK标准液0,2,5,10,20,40ml放入100ml容量瓶中,用1mol/LNH4OAc定容,即得0,2,5,10,20,40mg/LK标准系列溶液操作步骤称取风干土样1mm孔径
5.××g于150ml三角瓶中,加1mol/LNH4OAc溶液
50.0ml土液比为110,用橡皮塞塞紧,在20—25℃下振荡30分钟用干滤纸过滤,滤液与钾标准系列溶液一起在火焰光度计上进行测定,在方格纸上绘制成曲线,根据待测液的读数值查出相对应的mg/L数,并计算出土壤中速效钾的含量结果计算土壤速效钾Kmg/kg=待测液mg/L×加入浸提剂毫升数/风干土重1—
6.2 土壤全钾的测定NaOH熔融—火焰光度计法方法原理样品经碱熔后,使难溶的硅酸盐分解成可溶性化合物,用酸溶解后可不经脱硅和去铁、铝等手续,稀释后即可直接用火焰光度计法测定主要仪器银坩埚或镍坩埚,30ml;高温电炉;火焰光度计试剂1 NaOH二级粒状;2 2无水酒精二级;3 311HCl三级;4
40.2mol/LH2SO4;5
54.5mol/LH2SO4 取浓H2SO4二级1体积缓缓注入3体积水中混合6K标准溶液 称取
0.1907gKCl二级,在110℃烘2小时溶于水中,定容至1升,即为100mg/LK溶液,存于塑料瓶中钾标准系列溶液的配制吸取100mg/LK标准溶液0,2,5,10,20,40,60ml分别放于100ml容量瓶中,加入与待测液中等量的其他离子成份,使标准液中的离子成分和待测液相近例如土样经NaOH熔融后定容50ml吸取5ml稀释50ml测读时,则在配制标准系列溶液时应各加
0.4gNaOH和
4.5mol/LH2SO41ml,用水定容至100ml此系列溶液分别为0,2,5,10,20,40,60mg/L标准溶液操作步骤 称取烘干土样100目
0.25xxg于银坩埚底部,加几滴无水酒精湿润之,然后加
0.2g固体NaOH,平铺于土样的表面,暂放于大干燥器中,以防吸湿将坩埚放在高温电炉内,由低温升至720℃保持此温度15分钟坩埚必须在低温时放入电炉,当炉温升至400℃时关闭电源15分钟后继续升温这样可以避免坩埚内NaOH和样品溢出取出稍冷,加入10ml水,加热至80℃左右,待熔块溶解后,再煮沸5分钟,转入50ml容量瓶中,然后用少量
0.2mol/LH2SO4溶液清洗数次,一起倒入容量瓶内,使总体积至约40ml再加11HCl5滴和
4.5mol/LH2SO45ml用水定容,过滤吸取滤液
5.00或
10.00ml于50ml容量瓶中钾的浓度最好控制在10—30mg/L,用水定容,直接在火焰光度计上测定,记录读数,同时测得钾标准系列溶液的读数值,绘制工作曲线,然后从工作曲线上查得待测液的钾浓度mg/L结果计算全K,%=mg/L×测读液定容体积×分取倍数/(W×106)×100式中,mg/L—从工作曲线查得溶液中K的mg/L数;测读液定容体积—50ml;分取倍数—待测液体积/吸取待测液体积=50/5;W—烘干样品重g;样品含钾量低于1%时,两次平行测定结果允许误差为
0.05% 1—7 土壤阳离子交换量的测定 土壤的阳离子交换性能是由土壤胶体表面性质所决定,由有机质的交换基与无机质的交换基所构成,前者主要是腐殖质酸,后者主要是粘土矿物它们在土壤中互相结合着,形成了复杂的有机无机胶质复合体,所能吸收的阳离子总量包括交换性盐基K+、Na+、Ca++、Mg++和水解性酸,两者的总和即为阳离子交换量其交换过程是土壤固相阳离子与溶液中阳离子起等量交换作用阳离子交换量的大小,可以作为评价土壤保水保肥能力的指标,是改良土壤和合理施肥的重要依据之一测量土壤阳离子交换量的方法有若干种,这里只介绍一种不仅适用于中性、酸性土壤,并且适用于石灰性土壤阳离子交换量测定的EDTA—铵盐快速法方法原理 采用
0.005mol/LEDTA与1mol/L的醋酸铵混合液作为交换剂,在适宜的pH条件下酸性土壤pH
7.0,石灰性土壤pH
8.5,这种交换络合剂可以与二价钙离子、镁离子和三价铁离子、铝离子进行交换,并在瞬间即形成为电离度极小而稳定性较大的络合物,不会破坏土壤胶体,加快了二价以上金属离子的交换速度同时由于醋酸缓冲剂的存在,对于交换性氢和一价金属离子也能交换完全,形成铵质土,再用95%酒精洗去过剩的铵盐,用蒸馏法测定交换量对于酸性土壤的交换液,同时可以用作为交换性盐基组成的待测液用主要仪器 架盘天平500g、定氮装置、开氏瓶150ml、电动离心机转速3000—4000转/分;离心管100ml;带橡头玻璃棒、电子天平1/100试剂
10.005mol/LEDTA与1mol/L醋酸铵混合液称取化学纯醋酸铵
77.09克及EDTA
1.461克,加水溶解后一起冼入1000ml容量瓶中,再加蒸溜水至900ml左右,以11氢氧化铵和稀醋酸调至pH至
7.0或pH
8.5,然后再定容到刻度,即用同样方法分别配成两种不同酸度的混合液,备用其中pH
7.0的混合液用于中性和酸性土壤的提取,pH
8.5的混合液仅适用于石灰性土壤的提取用295%酒精工业用,应无铵离子反应32%硼酸溶液称取20g硼酸,用热蒸馏水60℃溶解,冷却后稀释至1000ml,最后用稀盐酸或稀氢氧化钠调节pH至
4.5定氮混合指示剂显酒红色4定氮混合指示剂分别称取
0.1克甲基红和
0.5克溴甲酚绿指示剂,放于玛瑙研钵中,并用100ml95%酒精研磨溶解此液应用稀盐酸或氢氧化钠调节pH至
4.55纳氏试剂定性检查用称氢氧化钠134克溶于460ml蒸馏水中;称取碘化钾20克溶于50ml蒸馏水中,加碘化汞使溶液至饱和状态大约32克左右然后将以上两种溶液混合即可
60.05mol/L盐酸标准溶液取浓盐酸
4.17ml用水稀释至1000ml,用硼酸标准溶液标定7氧化镁固体在高温电炉中经500—600℃灼烧半小时,使氧化镁中可能存在的碳酸镁转化为氧化镁,提高其利用率,同时防止蒸馏时大量气泡发生8液态或固态石蜡操作步骤 称取通过60目筛的风干土样
1.××克精确到
0.01g,有机质含量少的土样可称2—5克,将其小心放入100ml离心管中沿管壁加入少量EDTA—醋酸铵混合液,用带橡皮头玻璃棒充分搅拌,使样品与交换剂混合,直到整个样品呈均匀的泥浆状态再加交换剂使总体积达80ml左右,再搅拌1—2分钟,然后洗净带橡皮头的玻璃棒将离心管在粗天平上成对平衡,对称放入离心机中离心3—5分钟,转速3000转/分左右,弃去离心管中的清液然后将载土的离心管管口向下用自来水冲洗外部,用不含铵离子的95%酒精如前搅拌样品,洗去过剩的铵盐,洗至无铵离子反应为止最后用自来水冲洗管外壁后,在管内放入少量自来水,用带橡皮头玻璃棒搅成糊状,并洗入150ml开氏瓶中,洗入体积控制在80—100ml左右,其中加2ml液状石蜡或取2克固体石蜡、1克左右氧化镁然后在定氮仪进行蒸馏,同时进行空白试验结果计算阳离子交换量cmol/kg土=M×V-V0/样品重式中V—滴定待测液所消耗盐酸毫升数V0—滴定空白所消耗盐酸毫升数M—盐酸的摩尔浓度样品重—烘干土样质量 1—8 土壤可溶性盐分的测定 土壤水溶性盐是盐碱土的一个重要属性,是限制作物生长的一个障碍因素分析土壤中可溶性盐分的阴、阳离子含量,和由此确定的盐分类型和含量,可以判断土壤的盐渍化状况和盐分动态,以作为盐碱土分类和利用改良的依据1—
8.1 待测液的制备方法原理 土壤样品和水按一定的水土比例混合,经过一定时间振荡后,将土壤中可溶性盐分提取到溶液中,然后将水土混合液进行过滤,滤液可做为土壤可溶盐分测定的待测液主要仪器 往复式电动振荡机;离心机;真空泵;1/100扭力天平;巴氏漏斗;广口塑料瓶1000ml操作步骤 称取通过1mm筛孔的风干土样
100.0g放入1000ml广口塑料瓶浸提瓶中,加入去CO2水500ml,用橡皮塞塞紧瓶口,在振荡机上振荡3分钟,立即用抽滤管或漏斗过滤,最初约10ml滤液弃去如滤液浑浊,则应重新过滤,直到获得清亮的浸出液清液存于干净的玻璃瓶或塑料瓶中,不能久放电导、pH、CO2-
3、HCO-3离子等项测定,应立即进行,其它离子的测定最好都能在当天做完如不用抽滤,也可用离心分离,分离出的溶液也必须清晰透明1—
8.2 水溶性盐分总量的测定重量法方法原理 取一定量的待测液蒸干后,再在105—110℃烘干,称至恒重,称为“烘干残渣总量”,它包括水溶性盐类及水溶性有机质等的总和用H2O2除去烘干残渣中的有机质后,即为水溶性盐总量主要仪器 电热板;水浴锅;干燥器;瓷蒸发皿;分析天平1/10000试剂 12%Na2CO3,
2.0克无水Na2CO3溶于少量水中,稀释至100ml215%H2O2操作步骤吸出清晰的待测液50ml,放入已知重量的烧杯或瓷蒸发皿W1中,移放在水浴上蒸干后,放入烘箱,在105—110℃烘干4小时取出,放在干燥器中冷却约30分钟,在分析天平上称重再重复烘2小时,冷却,称至恒重W2,前后两次重量之差不得大于1mg计算烘干残渣总量在上述烘干残渣中滴加15%H2O2溶液,使残渣湿润,再放在沸水浴上蒸干,如此反复处理,直至残渣完全变白为止,再按上法烘干后,称至恒重W3计算水溶性盐总量结果计算 水溶性盐总量%=W3-W1/W×100式中,W—与吸取浸出液相当的土壤样品重g 1—
8.3 碳酸根和重碳酸根的测定方法原理 在待测液中碳酸根CO2-3和重碳酸根HCO-3同时存在的情况下,用标准盐酸滴定时,反应按下式进行Na2CO3+HCl→NaHCO3+NaClpH
8.2为酚酞终点1NaHCO3+HCl→NaCl+H2CO3pH
3.8为甲基橙终点2当1式反应完成时,有酚酞指示剂存在,溶液由红色变为无色,pH为
8.2,只滴定了碳酸根的二分之一当2式反应完成时,有甲基橙指示剂存在,溶液由橙黄变成桔红,pH为
3.8主要仪器 滴定管;滴定台、移液管25ml;三角瓶150ml试剂
10.02mol/L盐酸标准溶液配制方法参照土壤全氮测定,用标准硼砂溶液标定
20.5%酚酞指示剂95%酒精溶液
30.1%甲基橙指示剂水溶液操作步骤 吸取待测液25ml于150ml三角瓶中,加酚酞指示剂2滴溶液呈红色,用标准盐酸滴至无色,记下消耗的标准盐酸毫升数V1,若加入酚酞指示剂后溶液不显色,则表示没有CO2-3存在于上述三角瓶中再加甲基橙指示剂1滴,继续用标准盐酸滴定,由橙黄滴至桔红色即达终点,记下消耗的盐酸毫升数V2结果计算CO2-3mmol1/2CO2-3/kg土=2V1×C/W×100CO2-3%=mmol1/2CO2-3/kg土×
0.030HCO-3mmol1/2CO2-3/kg=V2-V1×C/W×100HCO-3%=mmol1/2HCO-3/kg土×
0.061 式中V
1、V2—滴定时消耗标准盐酸毫升数;C—标准盐酸的摩尔浓度;W—吸取待测液的毫升数相当的样品量;
0.030—每1/2mmol碳酸根的克数;
0.061—每1/2mmol重碳酸根的克数100—换算成每百克土中的百分数1—
8.4 氯离子的测定硝酸银滴定法方法原理 根据生成氯化银比生成铬酸银所需的银离子浓度小得多,利用分级沉淀的原理,用硝酸银滴定氯离子,以铬酸钾作指示剂,银离子首先与氯离子生成氯化银的白色沉淀当待测溶液中的氯离子被银离子沉淀完全后等当点,多余的硝酸银才能与铬酸钾作用生成砖红色沉淀,即达滴定终点反应如下NaCl+AgNO3→NaNO3+AgCl↓滴到等当点时,过量的硝酸银与指示剂铬酸钾作用,产生砖红色的铬酸银沉淀K2CrO4+2AgNO3→2KNO3+Ag2CrO4↓砖红色沉淀由消耗的标准硝酸银用量,即可计算出氯离子的含量主要仪器 滴定管;滴定台;移液管试剂 15%铬酸钾指示剂铬酸钾K2CrO45克溶于少量水中,加饱和的硝酸银溶液到有红色沉淀为止,过滤后稀释至100ml
20.03mol/L硝酸银标准溶液准确称取经105℃烘干的硝酸银
5.097g溶于蒸馏水中,移入量瓶,加水定容至1升,摇匀,保存于暗色瓶中必要时用
0.0400mol/L氯化钠标准溶液标定
30.0400mol/L氯化钠标准溶液准确称取经105℃烘干的氯化钠
2.338g,溶于水后再加水定容至1升,摇匀操作步骤 吸取待测液25ml,加碳酸氢钠
0.2~
0.5g左右,即可使溶液的pH达中性或微碱性向溶液中加5滴铬酸钾指示剂,用标准的硝酸银滴定至溶液出现淡红色为止,记下毫升数V结果计算 Cl-mmol/kg=V×N/W×100Cl-%=Cl-mmol/kg×
0.0355式中 V—滴定时所耗硝酸银的体积;N—硝酸银的摩尔浓度;W—吸取待测液的毫升数相当的样品重
0.0355—每1mol/L氯离子的克数1—
8.5 硫酸根离子的测定容量法方法原理 先用过量的氯化钡将溶液中的硫酸根沉淀完全过量的钡在pH10时加钙,镁混合指示剂,用EDTA二钠盐溶液滴定为了使终点明显,应添加一定量的镁从加入钡镁所耗EDTA的量用空白方法求得减去沉淀硫酸根剩余钡、镁所耗EDTA量,即可算出消耗于硫酸根的钡量,从而求出硫酸根量主要仪器 滴定管;滴定台;移液管25ml;三角瓶150ml;调温电炉试剂
10.01mol/LEDTA溶液称取EDTA二钠盐
3.72g溶于无二氧化碳蒸馏水中,定容至1升,其浓度可用标准钙或镁液标定
20.01mol/L钡镁混合液
2.44g氯化钡BaCl2·2H2O和
2.04g氯化镁MgCl2·6H2O溶于水,定容至1升,摇匀此溶液中钡、镁浓度各为
0.01mol/L每毫升约可沉淀硫酸根1毫克3pH10缓冲剂
67.5g氯化铵溶于水中,加入570ml浓氢氧化铵比重
0.90,含NH325%,加水稀释至1升4钙镁混合指示剂
0.5g酸性铬蓝K、1克萘粉绿B与100克氯化钠在玛瑙研钵中研磨均匀,贮于暗色瓶中,密封保存备用操作步骤1吸取土壤浸出液
25.00ml于150ml三角瓶中,加入11HCl2滴,加热煮沸趁热用吸管缓缓地加入过量25—100%的钡镁混合液约5—10ml,并继续加热5分钟,放置2小时以上,加入氨缓冲液5ml摇匀,再加入K—B指示剂或铬黑T指示剂1小勺约
0.1g,摇匀后立即用EDTA标准液滴定至溶液由酒红色突变成纯蓝色,记录EDTA溶液ml数V32空白标定 取25ml水,加11HCl2滴,钡镁混合液约5—10ml氨缓冲液5ml,K—B混合指示剂1小勺约
0.1g,摇匀后用EDTA标准液滴定至溶液由酒红色变为纯蓝色,记录EDTA溶液的用量V43土壤浸出液中Ca2++Mg2+合量的测定 见1—
8.6,记录EDAT溶液的ml数V1结果计算硫酸根mmol1/2SO4/kg=2MV4+V1-V3/W×100W—与吸取浸出液相当的土样重gM—EDTA标准溶液的浓度mol/l1—
8.6 钙和镁离子的测定方法原理 EDTA能与多种金属阳离子在不同的pH条件下形成稳定的络合物,而且反应与金属阳离子的价数无关用EDTA滴定钙、镁时,应首先调节待测液的适宜酸度,然后加钙、镁指示剂进行滴定在pH10并有大量铵盐存在时,将指示剂加入待测液后,首先与钙、镁离子形成红色络合物,使溶液呈红色或紫红色当用EDTA进行滴定时,由于EDTA对钙、镁离子的络合能力远比指示剂强,因此,在滴定过程中,原先为指示剂所络合的钙、镁离子即开始为EDTA所夺取,当溶液由红色变为兰色时,即达到滴定终点钙、镁离子全部被EDTA络合在pH12,无铵盐存在时,待测液中镁将沉淀为氢氧化镁故可用EDTA单独滴定钙,仍用酸性铬蓝K—萘酚绿B作指示剂,终点由红色变为兰色试剂
10.01mol/LEDTA标准溶液称取
3.720克EDTA二钠盐溶解于无二氧化碳的蒸馏水中,微热溶解,冷却后定容到1升,再用标准钙标定2氨缓冲液称取氯化铵
33.75克,溶于150毫升无二氧化碳蒸馏水中,加浓氢氧化铵比重
0.90285毫升混合,然后加水稀释至500毫升,此溶液pH为103K—B指示剂先称取50克无水硫酸钾放在玛瑙研钵中研细,然后分别称取
0.5克酸性铬蓝K,1克萘酚绿B,放于玛瑙研钵中,继续进行研磨,混合均匀4铬黑T指示剂
0.5克铬黑T与100克烘干的NaCl共研至极细,贮于棕色瓶中5钙指示剂
0.5克钙指示剂C21H14O7N2S与50克NaCl研细混匀,贮于棕色瓶中62mol/LNaOH溶液
0.8克NaOH溶于100ml无二氧化碳水中操作步骤1 Ca2++Mg2+合量的测定吸取待测液
25.00ml于150ml三角瓶中,加pH10氨缓冲液2ml,摇匀后加K—B指示剂或铬黑T指示剂1小勺约
0.1克,用EDTA标准溶液滴定至由酒红色突变为纯蓝色为终点记录EDTA溶液的用量为V12 Ca2+的测定另吸取土壤浸出液25ml于三角瓶中,加11HCl1滴,充分摇动煮沸1分钟赶出CO2,冷却后,加2mol/LNaOH2ml,摇匀,用EDTA标准溶液滴定,接近终点时须逐滴加入,充分摇动,直至溶液由酒红色突变为纯蓝色,记录EDTA溶液的体积为V2结果计算土壤钙,mmol1/2Ca2+/kg=2×V2/W×100Ca2+%=Ca2+mmol1/2Ca2+/kg×
0.0200土壤镁,mmol1/2Mg2+/kg=2MV1-V2/W×100Mg2+%=Mg2+mmol1/2Mg2+/kg×
0.0122式中V1和V2—滴定Ca2++Mg2+和Ca2+时所消耗的EDTA标准液ml数;M—EDTA的摩尔浓度,折合为1/2Ca2+或1/2Mg2+摩尔浓度时须乘2;W—与吸取浸出液相当的样品重g
0.0200和
0.0122—Ca2+和Mg2+摩尔质量,mg/mmol1—
8.7 钠和钾离子的测定方法原理 待测液在火焰高温激发下,辐射出钾、钠元素的特征光谱,通过钾、钠滤光片,经光电池或光电倍增管,把光能转换为电能,放大后用微电流表指示其强度;从钾钠标准液浓度和检流计读数作的工作曲线,即可查出待测液的钾、钠浓度,然后计算样品的钾、钠含量主要仪器火焰光度计试剂Na、K混合标准液先分别配制1000mg/LNa和K的标准溶液,然后配成混合标准溶液1000mg/LNa标准溶液;
2.542gNaCl二级,105℃ 烘干,溶于少量水中,定容至1升1000mg/LK标准溶液
1.907gKCl二级,105℃烘干,溶于少量水中,定容至1升将1000mg/LNa和K标准溶液等体积混合,即得500mg/L的Na、K混合液,贮于塑料瓶中,应用时配制成0,5,10,20,30,50,70mg/L的Na和K混合标准系列溶液操作步骤将配制好的Na、K混合标准系列溶液在火焰光度计上分别测定Na和K的发射光强度,以水为空白参比液,分别绘制Na和K的工作曲线吸取土壤浸出液
5.00~
10.00ml视Na+含量而定于25ml容量瓶中,用水定容,用火焰光度计测定Na和K的发射光强度由测得结果分别在Na和K工作曲线上查Na、K的浓度mg/L结果计算土壤Na+%=查得Na浓度mg/L×25/V×5×10-4Na+,mmol/kg=Na%×1000/
23.0土壤K+,%=查得K浓度mg/L×25/V×5×10-4K+,mmol/kg=K%×1000/
39.1式中V—吸取土壤浸出液的体积ml; 25—定容体积ml;5—水土比例10-4—将mg/L换算成%的因数;
23.0和
39.1—Na+和K+的毫摩尔质量mg/mmol 1—9 土壤微量元素的测定 科学研究和生产实践证明微量元素为有机体正常生命活动所必需,在有机体的生活中起着重要作用土壤和植物中的微量元素都很低,并且这些微量元素在植物体中的缺乏量、适量及致毒量范围很窄,因此微量元素的分析测定工作较常量元素要求更加严格1—
9.1 土壤有效硼的测定姜黄素比色法方法原理 土样经沸水浸提5分钟,浸出液中的硼用姜黄素比色法测定姜黄素是由姜中提取的黄色色素,以酮型和稀醇型存在,姜黄素不溶于水,但能溶于甲醇、酒精、丙酮和冰醋酸中而呈黄色,在酸性介质中与B结合成玫瑰红色的络合物,即玫瑰花青苷它是两个姜黄素分子和一个B原子络合而成,检出B的灵敏度是所有比色测定硼的试剂中最高的摩尔吸收系数ε550=
1.80×105最大吸收峰在550nm处在比色测定B时应严格控制显色条件,以保证玫瑰花青苷的形成玫瑰花青苷溶液在
0.0014—
0.06mg/LB的浓度范围内符合Beer定律溶于酒精后,在室温下1—2小时内稳定主要仪器 石英或其他无硼玻璃;三角瓶250或300ml和容量瓶100ml1000ml;回流装置;离心机;瓷蒸发皿Φ
7.5cm;恒温水浴;分光光度计;电子天平1/100试剂195%酒精二级;2无水酒精二级;3姜黄素—草酸溶液称取
0.04g姜黄素和5g草酸,溶于无水酒精二级中,加入
4.2ml6mol/LHCl移入100ml石英容量瓶中,用酒精定容贮存在阴凉的地方姜黄素容易分解,最好当天配制如放在冰箱中,有效期可延长至3—4天4B标准系列溶液称取
0.5716gH3BO3一级溶于水,在石英容量瓶中定容成1升此为100mg/LB标准溶液,再稀释10倍成为10mg/LB标准贮备溶液吸取10mg/LB溶液
1.
02.
03.
04.
05.0ml用水定容至50ml成为
0.2,
0.4,
0.6,
0.8,
1.0mg/LB的标准系列溶液,贮存在塑料试剂瓶中51mol/LCaCl2溶液称取
7.4gCaCl2·2H2O二级溶于100ml水中操作步骤1待测液制备称取风干土壤通过1mm尼龙筛
10.00g于250ml或300ml的石英三角瓶或塑料瓶中,加
20.0ml无硼水连接回流冷凝器后煮沸5分钟整,立即停火,但继续使冷却水流动稍冷后取下石英三角瓶放置片刻使之冷却倒入离心管中,加2滴1mol/LCaCl2溶液以加速澄清但不要多加,离心分离出清液或过滤到塑料杯中2测定吸取
1.00ml清液,放入瓷蒸发皿中,加入4ml姜黄素溶液在55±3℃的水浴上蒸发至干,并且继续在水浴上烘干15分钟除去残存的水分在蒸发与烘干过程中显出红色,加
20.0ml95%酒精溶解,用干滤纸过滤到1cm光径比色槽中,在550nm波长处比色,用酒精调节比色计的零点假若吸收值过大,说明B浓度过高,应加95%酒精稀释或改用580或600nm的波长比色3工作曲线的绘制分别吸取
0.2,
0.4,
0.6,
0.8,
1.0mg/LB标准系列溶液各1ml放入瓷蒸发皿中,加4ml姜黄素溶液,按上述步骤显色和比色以B标准系列的浓度mg/L对应吸收值绘制工作曲线结果计算有效B,mg/L=C×液土比式中 C—由工作曲线查得B的mg/L数;液土比—浸提时,浸提剂毫升数/土壤克数 1—
9.2 土壤有效钼的测定KCNS比色法方法原理 在酸性溶液中,硫氰酸钾KCNS与五价钼在有还原剂存在的条件下形成橙红色络合物M0CNS5或[M0OCNS5]2-,用有机溶剂异戌醇等萃取后比色测定此络合物最大吸收峰在波长470nm处,摩尔吸收系数ε470=
1.95×104由于反应条件不同,可能形成颜色较深的其它组成的络合物,因此,对显色的条件必须严格遵守溶液的酸度和KCNS的浓度都影响颜色强度和稳定性HCl浓度应小于4mol/L,KCNS浓度应保持至小
0.6%主要仪器 往复振荡机;高温电炉;125ml分液漏斗;振荡机;分光光度计;石英或硬质玻璃器皿试剂1草酸—草酸铵浸提剂
24.9克草酸铵NH42C2O4·H2O,二级与
12.6克草酸H2C2O4·2H2O,二级溶于水,定容成1升酸度应为pH
3.3必要时在定容前用pH计校准所用草酸铵及草酸不应含钼
26.5mmol/L盐酸用重蒸馏过的盐酸配制3异戊醇—CCl4混合液异戊醇[CH32CH·CH2·CH2·OH,二级],加等量体积计CCl4二有作为增重剂,使比重大于1为了保证测定结果的准确性,应先将异戊醇加以处理将异戊醇盛在大分液漏斗中,加少许KCNS和SnCl2溶液,振荡几分钟,静置分层后弃去水相4柠檬酸二级520%KCNS溶液20克KCNS二级溶于水,稀释至100ml610%SnCl2·2H2O溶液10克未变质的SnCl2·2H2O溶解在50ml的浓HCl中加水稀释至100ml,由于SnCl2不稳定,应当天配制也可以用金属锡配制将
5.3克薄锡片溶于20ml浓HCl中,加热至完全溶解不要使溶液蒸发迅速用无离子水稀释至100ml也可在前一天晚上溶解锡,不必加热,但要使小块的锡留在管底,不要用水稀释;放置过夜,使锡片缓缓溶解,翌日早稀释至所需浓度
70.05%FeCl3·6H2O溶液
0.5克FeCl3·6H2O二级溶于1升
6.5mol/LHCl中81mg/LMO标准液
0.2522克钼酸钠Na2MoO4·2H2O;二级溶于水加入1ml浓HCl一级,用水稀释成1升,成为100mg/LMo的贮备标准液吸取5ml贮备标准液准确稀释至500ml,即为1mg/LMo的标准溶液操作步骤1待测液制备称取风干土壤通过1mm尼龙网筛
25.00g盛于500ml三角瓶中加250ml草酸一草酸铵浸提剂加瓶塞后在往复振荡机上振荡8小时或过夜过滤,滤纸事先用6mol/LHCl洗净过滤时弃去最初的10—15ml滤液2测定取200ml滤液含钼量不超过6ug在烧杯中继续蒸发至干加强热破坏部分草酸盐后,放于高温电炉中450℃灼烧,破坏草酸盐和有机物冷却后加10ml
6.5mol/LHCl溶解残渣放于125ml分液漏斗中加水至体积约为45ml加1克柠蒙酸和2—3ml异戊醇—CCl4混合溶液,摇2分钟,静置分层后弃去异戊醇…CCl4层,加入3mlKCNS溶液,混合均匀,这时红色逐渐消失,准确地加入
10.0ml异戊醇混合液,摇动2—3分钟静置分层后,用干滤纸将异戊醇层过滤到比色杯中,在波长470nm处比色测定3工作曲线的绘制吸取1mg/LMo标准溶液0,
0.1,
0.3,
0.5,
1.0,
2.0,
4.0,
6.0ml分别放入125ml分液漏斗中,各加10ml
0.05%FeCl3溶液按上述步骤萃取和比色系列比色液的浓度为0—
0.6mg/LMo,绘制工作曲线计算结果有效钼,mg/kg=C×显色液体积×分取倍数/W式中 C—由工作曲线查得比色液Mo的mg/L数;显色液体积10ml;分取倍数—浸提时所用浸提剂体积/测定时吸取浸出液体积=250/200;W—土壤样品重量=25g1—
9.3 土壤中铜、锌、锰、铁的测定采用原子吸收分光光度法测定土壤中Cu、Zn、Mn、Fe,方法迅速、准确,并且可以采用一次处理样品,使用统一工作曲线,测定Cu、Zn、Mn、Fe四个元素方法原理 原子吸收分光光度法测定Cu、Zn、Mn、Fe的灵敏度很高,使用乙炔一空气火焰时,在每种元素的共振线测定,无干扰现象浸出液或消化液可直接上机测定主要仪器 恒温振荡机;高温电炉;原子吸收分光光度计试剂1硝酸、盐酸、氢氟酸优级纯试剂2 高氯酸、优级纯试剂稀释为60%3 3DTPA浸提剂
1.967gDTPA溶于
14.92g三乙醇胺和少量水中;再将
1.47gCaCl2·2H2O溶于水后,一并转入1升容量瓶中,加水至约950ml,用6mol/LHCl调pH至
7.30,最后加水至刻度4 铜标准贮备液100mg/L称取
0.1000g纯金属铜溶解于20ml1:1HNO3;移入1升容量瓶中,加水定容至刻度5锌标准贮备液500mg/L称取
0.5000g纯金属锌,用20ml1:1HCl溶解,移入1L容量瓶中,加水定容至刻度6锰标准贮备液1000mg/L称取
1.000g纯金属锰,用20ml1:1HNO3溶解,移入1L容量瓶中,加水定容至刻度7铁标准贮备液1000mg/L称取
1.000g纯金属铁,溶解于20ml1:1HCl中,加热助溶,移入1L容量瓶中加水定容至刻度操作步骤1土壤全量Cu、Zn、Mn、Fe的测定称取通过
0.25mm筛孔的土样
1.xxxg,放入铂坩埚,加浓HNO317ml60%HClO45ml,在电炉上小火加热,至溶液约剩5ml后取下冷却加HF5ml,继续消煮,蒸发至干,再加HF3ml消煮至冒微量白烟为止若消化不完全,可再加HF消煮用12HCl溶解,然后用热水洗入100ml容量瓶中,定容后过滤;用原子吸收分光光度计分别测定Cu、Zn、Mn、Fe,记录测定数据2土壤有效Cu、Zn、Mn、Fe测定称取通过
0.5mm筛孔的土样
5.xxxg于125ml三角瓶中,加入
0.05mol/LDTPA溶液25ml,振荡1h后过滤于三角瓶中,用原子吸收分光光度计分别测定Cu、Zn、Mn、Fe,记录测定数据同时用标准贮备液稀释为所要求的系列标准溶液,分别测定并绘制统一曲线图结果计算Cu、Zn、Mn或Femg/kg=查得样品在曲线上浓度mg/L/样品重g×取用倍数 1—10 土壤酸碱度的测定 pH是土壤重要的基本性质,也是影响肥力的因素之一它直接影响土壤养分的存在状态、转化和有效性pH值对土壤中氮素的硝化作用和有机质的矿化等都有很大的影响,因此对植物的生长发育有直接影响在盐碱土中测定pH值,可以大致了解是否含有碱金属的碳酸盐和发生碱化,作为改良和利用土壤的参考依据,同时在一系列的理化分析中,土壤pH与很多项目的分析方法和分析结果有密切的联系,也是审查其他项目结果的一个依据1—
10.1 混合指示剂比色法方法原理利用指示剂在不同pH的溶液中显示不同颜色的特性因而可根据指示剂显示的颜色确定溶液的pH值主要仪器白瓷板或石蜡浸纸和聚乙烯薄膜;玛瑙研钵试剂pH4—11混合指示剂称
0.2g甲基红,
0.4g溴百里酚蓝,
0.8g酚酞在玛瑙研钵中混合研匀,溶于400ml95%酒精中,加蒸馏水580ml,用
0.1mol/LNaOH调至pH=7草绿色,定容至1升此指示剂的PH变化范围如下pH 4 5 6 7 8 9 10 11颜色红 橙 黄稍带绿 草绿 绿 暗蓝 紫蓝 紫操作步骤用角匙取少量土壤样品,放于白瓷板凹槽中,加蒸馏水1滴,再加pH混合指示剂3~5滴,以能润湿样品而稍有余为宜且玻璃棒充分搅拌稍澄清,倾斜瓷板,观察溶液色度,与相应的土壤碱度pH比色卡进行比较,确定pH也可用宽约2~3厘米、长约6~8厘米的白色石蜡浸纸代替白瓷板1—
10.2 电位测定法方法原理用水浸提液或土壤悬液测定pH值时,应用指示电极PHS—3C复合电极测定该试液或悬液的电位差由于电极的电位是固定的,因而该电位差的大小取决于试液中的氟离子活度,在酸度计上可直接读出pH值主要仪器pH酸度计、pH玻璃电极、甘汞电极或复合电极试剂配制1pH
4.01标准缓冲液称取经105℃烘干的苯二甲酸氢钾KHC8H4O
410.21g,用蒸馏水溶解后稀释至1000ml2pH
6.87标准缓冲液称取在45℃烘干的磷酸二氢钾KH2PO
43.39g和无水磷酸氢二钠Na2HPO
43.53g,溶解在蒸馏水中,定容至1000ml3pH
9.18标准缓冲液称
3.80g硼砂Na2B4O7·10H2O溶于蒸馏水中,定容至1000ml此溶液的pH值容易变化,应注意保存操作步骤称取通过1mm孔径筛子的风干土25g,放入50ml烧杯中,加入蒸馏水25ml用玻璃棒搅拌1分钟,使土体充分散开,放置半小时,此时应避免空气中有氨或挥发性酸的影响,然后用酸度计测定具体操作方法如下
1.接通电源,开启电源开关,预热15分钟
2.将开关达到pH档
3.将斜率顺时针达到底
4.用温度计测出缓冲液或待测液的温度,将温度旋钮调至此温度
5.将电极放入pH为
6.86的缓冲溶液中,调定位旋钮,使仪器显示
6.
866.将电极冲洗干净后,再放入pH为
9.18或
4.00的缓冲溶液中,调斜率使仪器显示
9.18或
4.
007.如此重复
5、6步直到仪器显示相应的pH值较稳定为止
8.将洗干净的电极放入待测液中,仪器即显示待测液的pH值,待显示数字较稳定时读数即可此值为待测液的pH值1—11 土壤容重和孔度的测定环刀法1—
11.1 土壤容重的测定环刀法土壤容重不仅用于鉴定土壤颗粒间排列的紧实度,而且也是计算土壤孔度和空气含量的必要数据测定土壤容重的方法很多,如环刀法、蜡封法、水银排出法等常用的是环刀法,本法操作简便,结果比较准确,能反映田间实际情况方法原理 本法系利用一定体积的环刀切割未搅的自然状态的土样,使土样充满其中,称量后计算单位体积的烘干土重操作步骤
1.先在田间选择挖掘土壤剖面的位置,然后挖掘土壤剖面,按剖面层次,分层采样,每层重复3次如只测定耕作层土壤容重,则不必挖土壤剖面
2.将环刀托放在已知重量的环刀上,将环刀刃口向下垂直压入土中,直至环刀筒中充满样品为止环刀压入时要平稳,用力一致
3.用削土刀托放在已知重量的环刀上,将环刀刃口向下垂直压入土中,直至环刀筒中充满样品为止环刀压入时要平稳,用力一致
4.用削土刀切开环刀周围的土壤,取出已装满土的环刀,细心削去环刀两端多余的土,并擦净环刀外面的土环刀两端立即加盖,以免水分蒸发随即称重精确到
0.01g并记录
5.同时在同层采样处,用铝盒采样,测定土壤自然含水量或者直接从环刀筒中取出样品,测定土壤含水量结果计算 按下式计算土壤容重d=g·100/[V·100+W]式中d—土壤容重g/cm3g—环刀内湿土重gV—环刀容积cm3W—样品含水量%此法允许平行绝对误差<
0.03g/cm3,取算术平均值仪器设备 环刀容积为100cm
3、环刀托、削土刀、小铁铲、铝盒、干燥器、烘箱、天平感量
0.1g和
0.01g等1—
11.2 土壤孔度的测定土壤孔度与土壤结构、土壤质地及土壤有机质含量有关它们对土壤的水、肥、气、热状况和农业生产有显著影响总孔度的计算土壤总孔度一般不直接测定,常由测定土壤比重和容重之后,通过计算间接求得也可以在没有比重或不用比重值的情况下,直接用容重d通过经验公式计算出土壤总孔度Pt% Pt%=
93.947-
32.995d在工作中为了方便起见,可按上式计算出常用容重范围的土壤孔度,查对下表即可土壤总孔度查对表d d P1
0.
000.
010.
020.
030.
010.
050.
060.
070.
080.
090.
770.
8570.
5270.
1969.
8669.
5369.
2068.
8768.
5468.
2167.
880.
867.
5567.
2266.
8966.
5666.
2365.
9065.
5765.
2464.
9164.
580.
964.
2563.
9263.
5963.
2662.
9362.
6062.
2761.
9461.
6161.
281.
060.
9560.
6260.
2959.
9659.
6359.
3058.
9758.
6458.
3157.
881.
157.
6557.
3256.
9956.
6656.
3356.
0055.
6755.
3455.
0154.
681.
254.
3554.
0253.
6953.
3653.
0352.
7052.
3752.
0451.
7151.
381.
351.
0550.
7250.
3950.
0649.
7349.
4049.
0748.
7448.
4148.
081.
447.
7547.
4247.
0946.
7646.
4346.
1045.
7745.
4445.
1144.
791.
544.
4644.
1343.
8043.
4743.
1442.
8142.
4842.
1241.
8241.
491.
641.
1640.
8340.
5040.
1739.
8439.
5139.
1838.
8538.
5238.
191.
737.
8637.
5337.
2036.
8736.
5436.
2135.
8835.
5535.
2234.89注表中第一纵行d值为容重,第一横行d值为容重的第二位小数使用上表时,依一般对数表的方法即能查出某一容重的总孔度值,而不需要按经验公式计算查表举例d=
0.87时,Pt=
65.24%d=
1.10时,Pt=
57.65%d=
1.72时,Pt=
37.20%毛管孔度的测定环刀法
1.操作步骤1用环刀在野外采取原状土方法同容重2将环刀有孔并垫有滤纸的一端放入盛薄层水的搪瓷托盘内,瓷盘内水深保持在2—3mm内,浸水时间砂土4—6小时,粘土8—12小时或更长时间3环刀中土样吸水膨胀后,用刮土刀削去胀到环刀外面的土样,并立即称重,准确至
0.1g4称重后,从环刀中取出4—5g,放入铝盒中,测定土样吸水后的含水率,以换算环刀中烘干土重
2.结果计算毛管孔度可用下式计算PC%=W/V×100式中Pc%—土壤毛管孔度容积%W—环刀筒内土壤所保持的水量,相当于水的容积cm3;V—环刀筒内容积cm3本测定进行3—4次平行测定,重复误差不得大于1%,取算术平均值
3.仪器设备瓷盘、滤纸、铝盒、环刀100cm
3、烘箱、干燥器、刮土刀等通气孔度的计算 土壤通气孔度可用下式计算Pc%=Pt%-Po%式中Pc%—土壤通气孔度%;Pt%—土壤总孔度%;Po%—土壤毛管孔度%. 第二篇 肥料分析 2—1 肥料样品的采集与制备 2—
1.1 化学肥料样品的采集与制备固体肥料样品采集时,应在每一包装或几个包装中分别采取一小部分,然后混合均匀具体取样方法是先将固体肥料包装袋放平,然后翻动几次再在口角上折开一小口,用取样器按对角线方向插入袋内,转动取样器,使槽口朝上,将肥料装入取样器内,取出肥料后将其装入塑料袋或瓶内待各包装的样品取齐后,把所取肥料样品倒在塑料布上混合均匀,用四分法分取500g左右,盛入磨口瓶中,瓶外贴上标签,注明肥料名称、生产厂家、采样日期、采样人、样品来源等即可大批量固体肥料取样时,可在全部件数总量中抽取2%件数取样数不少于10件,然后按上述方法步骤取样、处理液体肥料样品采集时,对大件容器贮运的液体肥料可在其任意部位抽取需要的样品数量,但对一些不均匀的液体肥料可在容器的上、中、下各部位取样,所取平均样品不少于500ml,然后将其装入密封的塑料瓶或玻璃瓶中,同上处理保存对于用罐、瓶、桶贮运的液体肥料,可按总件数的5%取样,但取样数量不得少于3件,平均样品不少于500ml固、液混合状肥料如人粪尿等,在取样时可用粪勺混匀后,取500ml左右,加盖贮于密封容器中,同上处理保存但应注意在分析前,必须先将其充分摇匀后,从中分取部分样品,再用玻璃棒将其固体部分充分捣碎,并使之全部通过6~10号筛,立即进行分析,否则,应将固体与液体部分分离后,分别进行测定2—
1.2 有机肥料样品的采集与制备有机肥料如堆肥、厩肥、沤肥及工业下脚料等因其均匀性很差,应注意多点取样一般先予以翻堆、混匀后,再选10~20个采样点,每点采样品1~
1.5kg左右,最后将各点样品充分混合均匀,以四分法取样2kg左右,将其弄碎,再以四分法取样500g左右,带回室内自然风干、磨碎并通过1mm筛孔的筛子,贮于磨口瓶中,瓶外贴上标签,注明有关事项即可 2—2 肥料含水量的测定 各种肥料中含水量的测定是评价肥料品质、计算肥料中有效成分含量及其施用量的重要依据,因此,测定水分是通常的分析项目肥料中水分的形态一般包括游离态、吸湿态和结晶态等,通常均将其作为水分的总量来进行测定,对于含有结晶水及挥发性物质的肥料,其水分的测定比较困难,必须用特殊方法测定2—
2.1 常见化肥中含水量的测定烘干法称取一定量的肥料样品放入扁式称量瓶中,按表2—1中的规定条件进行烘干,直至恒重,根据烘干前后肥料样品的重量即可计算出样品中的水分含量水分%=W1-W2×100/W2式中W1为烘干前的样品重g;W2为烘干后的样品重g表2—1 烘干法测定化肥含水量的条件样 品称取量g烘干温度℃烘干时间h备 注铵态氮肥
2.5080±15烘箱中烘干NH4HCO3除外磷 肥
5.00100±13烘箱中烘干硝态氮肥、钾肥2~
2.50130±15烘箱中烘干,用PbO进行干燥液体肥料5~20ml100±13预先在水浴上蒸干,再在烘箱中烘干含挥发性物质的化肥2~
5.00100±15另外要进行挥发物质校正酰胺态肥料
5.0075±14烘箱中烘干碳酸氢铵极易挥发,不能用烘干法测定其含水量,常用电石气量法参阅中国科学院南京土壤研究所编《土壤理化分析》,上海科学技术出版社,1978年2—
2.2 有机肥料中含水量的测定105℃烘干法称取有机肥料样品5~
10.00g盛于已知重量的称量瓶内,于100~105℃烘箱内烘至恒重若为湿样品则需先在50~60℃下烘4~6h,使大部分水分挥发后再增温至100~105℃,烘至恒重,根据烘干前、后样品重量W
1、W2计算其含水量水分%=W1-W2×100/W2 2—3 氮素化肥分析 氮是肥料三要素之一,是目前我国所使用的各种肥料中对植物生长影响最大、增产作用最明显的化学肥料根据化肥中氮的存在形态可将其分为铵态氮肥、硝态氮肥、酰胺态氮肥和氰氨态氮肥在测定其含氮量时,可以通过一定的化学处理方法,将各种形态的氮素转化为铵形态再行定量测定以铵形态存在的氮可采用甲醛法、蒸馏法测定其含氮量,氨水、碳酸氢铵和碳铵母液还可用简便的酸量法测定各种测定方法各有优缺点,本书着重介绍测定氮的标准方法—蒸馏法尽管其操作比较麻烦,但其测定结果准确可靠,应用十分广泛2—
3.1 氮素化肥总氮量的测定方法原理在催化剂的作用下,用浓硫酸加热分解氮素化肥,使氮素全部转变为硫酸铵NH42SO4,再取其溶液或部分溶液在碱性条件下蒸馏,使氨吸收在硼酸溶液中,用标准酸滴定之仪器同1—
4.1试剂同1—
4.1操作步骤
①消煮准确称取试样
2.5~
5.0000g于凯氏瓶中,加入催化剂4g,再加入浓硫酸30ml,摇匀后放置过夜消煮时,开始用文火缓慢加热,注意观察,若气泡过多应暂停加热,待冷却后再缓慢加热,并注意避免试样从凯氏瓶口溢出当凯氏瓶内容物呈现胶状,并冒白烟时,逐渐增大火力,继续加热消煮待凯氏瓶内溶液变为绿色后,再加热15分钟,内容物变白色时表示消煮完全
②蒸馏将消煮液用蒸馏水稀释定容至250ml,然后吸取一定量的溶液使含N=10~25mg左右,按土壤全氮量的凯氏法进行蒸馏见1—
4.1
③滴定硼酸吸收的氨溶液用标准盐酸滴定至溶液颜色由兰色突变为酒红色即为终点同时做空白试验根据滴定所消耗的标准盐酸的量计算样品的含氮量
④计算N%=V-V0×C×
0.014×ts×100/m式中V滴定试样消耗的标准盐酸的量mlV0空白试验消耗的标准盐酸的量mlC标准盐酸溶液的浓度mol/L
0. 041氮原子的毫摩尔质量,g/mmolm肥料样的质量gts试液的分取倍数2—
3.2 氮素化肥中铵态氮的测定含铵态氮的氮素化肥一般都易溶于水,可在碱性介质中蒸馏使氨逸出,然后以硼酸吸收,标准盐酸滴定,根据所耗酸的量计算所含氮的量仪器与试剂同1—
4.1操作步骤称取氮素化肥样品
0.5~
1.0g精确至
0.0001g于100ml烧杯中,用20~30ml蒸馏水溶解后,转移、定容至100ml,摇匀后吸取25ml于凯氏瓶中,加碱蒸馏及计算同土壤全氮量的测定见1—
4.12—
3.3 氮素化肥中硝态氨的测定Zn-FeSO4碱性介质还原蒸馏定氮法方法原理在强碱性溶液中,锌与氢氧化钠作用生成氢,将硝酸态氮还原为亚硝酸态氮,同时也将高价铁还原为低价铁而使亚铁周而复始地存在亚铁将硝态氮和亚硝态氮还原为氨在还原的同时蒸馏出的氨用硼酸吸收,标准盐酸滴定,计算硝态氮含量,其主要反应如下 FeSO4+2NaOH→FeOH2↓+Na2SO48FeOH2+NaNO3+6H2O→8FeOH3+NaOH+NH3Zn+2NaOH→Na2ZnO2+H2H2+NaNO3→NaNO2+H2O6FeOH2+NaNO2+5H2O→6FeOH3+NaOH+NH3本法测定的氮实质上是铵态氮和硝态氮的总量,如果需要分别测定铵态氮和硝态氮的含量,只加氢氧化钠溶液进行蒸馏、吸收、滴定的,即为铵态氮;然后再向凯氏瓶中加入锌—硫酸亚铁还原剂再次进行蒸馏、吸收、滴定,即为硝态氮仪器定氮蒸馏装置、滴定管、凯氏瓶等试剂1锌粉—硫酸亚铁还原剂称取化学纯硫酸亚铁50g和锌粉10g于瓷研钵中,一并磨细通过60目筛,混匀后贮于棕色磨口瓶中备用240%氢氧化钠溶液称化学纯氢氧化钠400g溶于水中,稀释至1升,贮于塑料瓶中备用32%硼酸溶液配制方法见1—
4.15 定氮混合指示剂配制方法见1—
4.
150.02mol/L标准盐酸溶液见1—
4.16 液状石蜡操作步骤称取肥料样品
1.1xxg于50ml烧杯中,加少量水溶解后无损地转移于100ml容量瓶中,定容后摇匀吸取此溶液10~20ml使含氮量在20~30mg左右于250ml凯氏瓶中,加Zn—FeSO4还原剂
1.5~
3.0g,加入40%NaOH10ml后立即加热蒸馏、吸收、滴定见土壤全氮的测定结果计算N%=V-V0×C×
0.014/W×100式中V待测液消耗标准盐酸的体积,ml; V0空白消耗标准盐酸的体积,ml;C标准盐酸的浓度,mol/L;
0.014氮原子的毫摩尔质量,g/mmol;W吸收10~20ml待测液相当样品的质量,g2—
3.4 尿素中氮的测定方法原理尿素是含酰胺态氮的氮素化肥,不能加碱直接蒸馏,可将其水溶液在硫酸存在下,加热水解成铵态氮,同时逸出CO2,其加酸水解的反应式为CONH22+2H2SO4+H2O→2NH4HSO4+CO2↑最后加碱蒸馏,测定其氮的含量仪器与试剂同土壤全氮的测定1—
4.1操作步骤称取经75℃烘干的尿素样品
0.2xxxg,加蒸馏水溶解后,定容至100ml,摇匀备用吸取此待测液
5.00ml于150ml凯氏瓶中,加浓硫酸5ml,先用文火加热直至完全除去CO2为止,然后再提高温度使硫酸发烟取下稍冷却,加水稀释至70~80ml,再按土壤全氮的操作步骤蒸馏、滴定,计算结果 2—4 磷素化肥分析 目前生产上使用的磷素化肥品种较多,根据其溶解性可分为水溶性磷肥如过磷酸钙、重过磷酸钙等、弱酸溶性磷肥如钙镁磷肥、钢渣磷肥、脱氟磷肥等和难溶性磷肥如磷矿粉、骨粉等由于磷肥性质不同,测定方法不尽相同2—
4.1 磷素化肥全磷量的测定测定磷素化肥的全磷量对其品质的鉴定、肥效的试验及经济合理施用均具有十分重要的意义方法原理肥料全磷测定样品的分解采用硝酸处理,使难分解的磷进入溶液,在酸性介质中溶液中的正磷酸与钼酸铵和偏钒酸铵反应,生成稳定的黄色络合物三元杂多酸,溶液颜色的深浅与磷的含量在1~20mg/LP范围内成正比,可以比色定量磷H3PO4+NH4VO3+16NH42MoO4+29HNO3→NH43PO4·NH4VO3·16MoO3+29NH4NO3+16H2O仪器分光光度计、烘箱、电热板、玻璃器皿等试剂1钒钼酸铵显色剂称取
12.5gNH46Mo7O24·4H2O钼酸铵溶于约200ml水中另将
0.625gNH4VO3偏钒酸铵溶于150ml沸水中,冷却后加入125ml浓硝酸,再冷至室温然后将钼酸铵溶液缓缓倒入偏钒酸铵的硝酸溶液中,随倒随搅拌,最后用水稀释至500ml 26mol/LNaOH溶液称取24gNaOH溶于水中,稀释至100ml32,6—或2,4—二硝基酚指示剂
0.25g二硝基酚溶于100ml水中饱和4P2O5标准溶液每ml相当500微克P2O5即500mg/LP2O5称取在45℃烘3h的磷酸二氢钾KH2PO
40.9587g,溶于少量水中,然后转移、定容至1000ml容量瓶中吸取上述标准溶液100ml于500ml容量瓶中,用水稀释至刻度即得100mg/L100ppm的P2O5标准溶液,作为工作溶液使用操作步骤称取通过100目筛孔的试样
0.2xxxg于100ml三角瓶中,用少量水湿润后,加入10~15ml11硝酸,瓶口放一小漏斗,置电热板上缓慢加热20分钟,将瓶内溶液低温蒸发至糊状勿蒸干,然后加入20ml沸蒸馏水,再加热至微沸,最后用致密的无磷滤纸过滤于100ml容量瓶中,用热蒸馏水冲洗滤纸若干次,定容、摇匀备用吸取上述待测液2~10ml于50ml容量瓶中含P
0.05~2mg,滴加二硝基酚指示剂2滴,用6mol/LNaOH中和至刚出现微黄色,加水至约35ml,准确加入10ml钒钼酸铵显色剂,定容、静置30分钟后用490nm波长,1cm光径比色皿在光电比色计上进行比色以空白调节比色计吸收值为零点标准曲线的制备吸取100mg/Lppm的P2O5标准溶液
0、
2.
5、
5.
0、
7.
5、
12.
5、
15.0分别放入50ml容量瓶中,加水至35ml,准确加入10ml钒钼酸铵显色剂,定容即得浓度分别为
0、
5.
0、
10.
0、
15.
0、
25.
0、
30.0mg/LP2O5的系列15~20min后用490nm波长、1cm光径比色皿在光电比色计上比色以吸收率为纵坐标,五氧化二磷的浓度mg/L为横坐标,在方格纸上绘制标准曲线结果计算P2O5%=A×显色体积×分取倍数/m×106×100A从标准曲线上查得待测液中P2O5浓度mg/Lm样品质量g;106将mg/L换算成g;100换算为百分含量注释
①本方法显色时间较短,常温下15~20min即可显色完全但在冬季较低温度下显色慢显色恒定的溶液在24h内其吸收值基本不变
②钒钼黄要求比色液的酸度终浓度范围很宽,极限值为
0.04~
1.60mol/L但由于溶液中的硅、亚砷酸等也可形成黄色的络合盐而干扰比色测定若酸度保持在
0.5~
0.8mol/L,并控制钼酸盐在一定量范围1000mg/kg以下,就可抑制这些络合盐的黄色干扰
③显色时钒酸盐的最终浓度范围是
8.0×10-5~
2.2×10-3mol/L,通常用后一浓度钼酸盐的适宜终浓度为
1.6×10-3~
5.7×10-2mol/L浓度过高,有硅干扰时会产生正误差,若无硅干扰时会产生负误差
④制备待测液时,样品处理也可不采用11硝酸而用10%HCl,相应的钒钼酸铵试剂应改用HCl系统配制
⑤根据比色时磷含量的多少,选择合适的比色波长,2~10mg/kgP2O5选用420nm,14~40mg/kgP2O5选用490nm,待测液中铁含量高而产生黄色干扰时,通常选用较长的波长如450nm或470nm本法比色选用的波长范围为400~490nm,然而值得注意的是波长由400nm增加到490nm时,灵敏度会降低10倍
⑥下列元素在1000mg/L以内对测定无干扰铁、铝、锰、钙、镁、钡、钾、钠、铵、一价汞、二价汞、锡、锌、银、砷、醋酸根、焦磷酸盐、钼酸盐、四硼酸盐、柠檬酸盐、草酸盐、硅酸盐、亚硝酸盐、氰化物、硫酸盐和亚硫酸盐等2—
4.2 过磷酸钙中游离酸的测定测定意义由于过磷酸钙在制造过程中常会带来游离的硫酸和少量的磷酸,可增高过磷酸钙的吸湿性,同时当种子与过磷酸钙混合播种时,会降低种子的发芽率,当游离酸较多时,为了更精确地计算在施用以前可用适量的碳酸氢铵或氨水中和游离酸,所需要的中和物质,必须进行游离酸的测定方法原理用水浸提样品,过滤其滤液,用酸碱中和的方法测定,以溴甲酚绿为指示剂pH
3.8~
5.4终点为透明绿色亮绿在酸性中呈黄色,暗绿时,则表示过量反应如下H3PO4+NaOH→NaH2PO4+H2O仪器玻璃器皿、铁架台等试剂1氢氧化钠
0.1mol/L的标准溶液2溴甲酚绿指示剂
0.2%溶液操作步骤1称取样品
5.00g,于250ml容量瓶中预先加150毫升水用手激烈振荡5分钟,加水稀释至刻度,混匀,用干澡滤纸过滤,开始的滤液弃去 2吸取滤液50毫升于150毫升锥形瓶中,加入至体积约100毫升,加溴甲酚绿指示剂5~7滴,由
0.1mol/L氢氧化钠标准溶液滴至呈明亮的绿色为终点结果计算 P2O5%=M×V×
0.071×100/G×50/250式中M—
0.1mol/L氢氧化钠标准溶液浓度V—
0.1mol/L氢氧化钠滴定的体积毫升
0.071—与
1.00ml氢氧化钠标准滴定溶液〔CNaOH=
1.000mol/L〕相当的以克表示的五氧化二磷的质量G—试样重注意事项提取的溶液不宜放置过久,因会发生水解作用H2O CaH2PO42·H2O H3PO4+CaHPO4·2H2O2—
4.3 过磷酸钙中有效磷的测定过磷酸钙与重过磷酸钙均为水溶性磷肥,所含有的能被植物吸收利用的不仅是水溶性的速效磷,也有一部分为不溶于水但能被柠檬酸提取的磷测定其有效磷的含量对评定肥料品质、合理施用磷肥均具有重要意义方法原理用2%柠檬酸浸提过磷酸钙或重过磷酸钙中的有效磷其中包括CaH2PO42·CaHPO4和游离H3PO4,浸出液中的正磷酸盐利用钒钼黄比色法定量测定仪器分光光度计、振荡机等试剂150mg/LP标准溶液准确称取105℃烘干的磷酸二氢钾KH2PO4AR
0.2195g溶于约400ml蒸馏水中,加入25ml3mol/LH2SO4,定容至1L,即为50mg/L的标准溶液,可长期保存使用22%柠檬酸溶液称取20g结晶柠檬酸H3C6H5O7·H2O,AR溶于水中,定容至1L即可33mol/LH2SO4量取浓硫酸
166.7ml,用蒸馏水稀释至1L 4钒钼酸铵显色剂同2—
4.1操作步骤称取通过100目筛孔的过磷酸钙样品
0.5~
1.0000g于150ml三角瓶中,加入2%柠檬酸溶液50ml,用橡皮塞塞紧瓶口,振荡30min,立即用干滤纸过滤,最初7—8ml滤液弃去吸取清亮滤液1~
5.00ml于50ml容量瓶中,加水至约35ml,准确加入10ml钒钼酸铵显色剂,同2—
4.1法比色测定结果计算P2O5%=A×显色体积×分取倍数/m×106×100×
2.291A从标准曲线查得待测液中P2O5浓度mg/L;m样品质量g;106将mg/L换算成g;100换算为百分含量;
2.291将P转换为P2O5的系数2—
4.4 碱性热制磷肥有效磷的测定碱性热制磷肥系高温烧制而成,呈碱性主要品种有钢渣磷肥、钙镁磷肥、钙镁磷钾肥、脱氟磷肥等其主要有效成分为磷酸四钙,不溶于水但能溶于2%柠檬酸溶液,可用钒钼黄比色法测定仪器同2—
4.1试剂同2—
4.1操作步骤称取试样
1.xxxxg置于干燥的250ml三角瓶中,用移液管吸取100ml预先加热至25—30℃的2%柠檬酸溶液注入三角瓶中,塞紧瓶塞,保持温度在25~30℃之间振荡30min,立即用干燥漏斗和双层干燥滤纸过滤于干的三角瓶中,弃去最初滤液,用移液管吸取含有20—30mgP2O5的滤液按2—
4.1步骤比色分析,计算其有效磷含量2—
4.5 磷矿粉中全磷量的测定磷矿粉是磷矿石经磨碎制成的,其全P2O5含量为5~40%,有效P2O51—8%,枸溶率3—30%磷矿粉中的含磷成分主要是氟磷酸钙Ca5FPO43,不溶于水和柠檬酸溶液,而溶于强酸方法原理用硝酸HNO3或10%HCl处理样品,使其中的磷转变为正磷酸形式存在于溶液中CaFPO4+10H+→5Ca2++HF↑+3H3PO4溶液中正磷酸可用钒钼黄比色法测定仪器试剂同2—
4.1操作步骤同2—
4.12—
4.6磷矿粉中有效磷的测定磷矿粉中有效磷通常采用2%柠檬酸或中性柠檬酸铵提取、钒钼黄比色法测定见2—
4.3 2—5钾素化学肥料全钾量分析 常用钾素化肥KCl、K2SO
4、KNO
3、KH2PO4都是水溶性的中性盐,可直接制成溶液采用火焰光度计法进行定量分析方法原理用稀酸浸提钾,火焰光度计比色测定仪器火焰光度计、容量瓶等试剂1浓盐酸溶液比重
1.19的浓HCl2钾标准溶液准确称取于105℃烘干4—6h的分析纯氯化钾KCl
1.9068g,溶于少量蒸馏水中,定容至1L,即为1000mg/L溶液,再以此溶液用蒸馏水稀释成100mg/L标准溶液作为工作溶液操作步骤1钾盐类样品待测液的制备称取
1.xxxxg试样于100ml烧杯中,加蒸馏水40ml溶解,再加少量盐酸酸化1~2ml,盖上表玻璃皿后低温加热煮沸10min,冷却后用蒸馏水转移于100ml容量瓶中,定容后摇匀,放置澄清或用干滤纸过滤2复合肥料或混合肥料待测液的制备称取试样
0.3xxxg于50ml小烧杯中,加6—7滴浓盐酸,再加蒸馏水20ml,低温煮沸10min,冷却后用蒸馏水转移于100ml容量瓶中定容至刻度,放置澄清或用干滤纸过滤待测液的测定吸取上述待测液的清液或滤液5ml相当250~2500微克K2O于50ml容量瓶中,加水定容至刻度,摇匀后在火焰光度计上直接测定,读取检流计上的读数标准曲线的绘制分别取100mg/L标准溶液
0、
5、
10、
15、
25、35ml于50ml容量瓶中,用蒸馏水定容后摇匀,即得含K
0、
10、
20、
30、
50、70mg/L的标准系列,然后在火焰光度计上测定,读取检流计上的读数,在方格纸上的检流计读数为纵坐标,K的浓度mg/L为横坐标,绘制标准曲线结果计算K2O%=C×V×ts×100×
1.2046/m×106C从标准曲线上查得的待测液mg/L;V测定体积;ts分取倍数;
1.2046将K换算为K2O的系数;m称样的质量g 2—6复合肥料的分析 通常所称的复合肥料是指在一种化学肥料中,同时含有氮、磷、钾三要素或只含有其中任何两种元素的化学肥料对含硝态氮或既含硝态氮又含铵态氮的含氮复合肥料可参考2—
3.3,采用Zn—FeSO4碱性介质还原蒸馏定氮法对只含铵态氮的含氮复合肥料参考2—
3.2,直接采用蒸馏定氮法测定对含有酰胺态氮素的含氮复合肥料可参考2—
3.4尿素中氮的测定含磷复合肥料如磷酸铵、磷酸二氢钾、硝酸磷肥等,其中的磷都是水溶性或枸溶性的,其有效磷的测定可采用中性柠檬酸铵溶液浸提,钒钼黄比色法定量分析中性柠檬酸铵溶液的配制称500g柠檬酸溶解于25%氨水溶液约500ml,中和至中性反应为止用pH计测定加入蒸馏水定容至1L,过滤备用用过磷酸钙制成的含磷复合肥料,有效磷的浸提应用微碱性柠檬酸铵溶液彼得曼溶液其配制方法为先配制2:3氨水约500ml,然后用中和滴定法测定其含氮量N%,按下式求出42g氮所需23氨水的ml数42g氮所需2:3氨水ml=100×42/N式中N为100ml23氨水中的含氮量g,再量取所需2:3氨水量,注入1L容量瓶中,将容量瓶置于冰浴中另取173g未风化的结晶柠檬酸溶于约300ml热蒸馏水中,混匀,冷却后经漏斗慢慢注入盛氨水溶液的容量瓶中勿使瓶内溶液温度超过20℃加完后用蒸馏水洗净漏斗,洗液并入容量瓶中,定容混匀后,静置2昼夜后使用复合肥料中全钾量的测定可参考2—5钾素化学肥料全钾量分析 2—7有机肥料的分析 有机肥料种类多、数量大,在我国农业生产中占有重要地位对有机肥料的养分分析,可了解其肥料质量及积制过程中养分变化情况,有利于指导合理施用和科学积制2—
7.1有机肥料全氮量的测定铁锌粉还原法有机肥中全氮包括铵态氮NH4+—N、硝态氮NO3-—N和有机态氮最理想的方法是硫酸—铬粒—重铬酸钾消煮法,硝态氮回收率可达99%,但因铬粒比较昂贵,常用铁锌粉还原法硝态氮回收率
98.9%也可得到理想的结果在测定新鲜人粪尿、沤肥等不含硝态氮的有机肥料全氮量时,可采用硫酸—混合盐消煮法或硫酸—高氯酸消煮法,因二者的消煮液均可适用于氮磷钾连续测定方法原理硝态氮用铁锌粉在酸性环境下还原为铵态氮NO3-+Fe.Zn+H+→NH4++Fe++.Zn+++H2O用硫酸氧化有机质,释放出氨并与硫酸结合,使全部氮均转化为硫酸铵形态,然后加碱蒸馏,逸出的氨用2%硼酸吸收,以标准酸滴定之NH42SO4+2NaOH→Na2SO4+2NH3+2H2ONH3+H2O→NH4OHNH4OH+H3BO3→NH4·H2BO3+H2O2NH4·H2BO3+H2SO4→NH42SO4+2H3BO3仪器分析天平、定氮蒸馏装置、凯氏瓶等试剂1铁锌粉称取锌粉
9.0g与
1.0g铁粉混合均匀210%H2SO4取浓硫酸比重
1.
8456.9ml缓缓注入
943.1ml水中3浓硫酸化学纯,比重
1.844混合加速剂100gK2SO
4、10gCuSO4·5H2O在研钵中研细混匀,过80目筛540%NaOH同1—
4.16定氮混合指示剂同1—
4.172%硼酸同1—
4.1
80.02mol/LHCl标准溶液同1—
4.1操作步骤称取风干样品过1mm筛
0.5~
1.xxxxg于150ml凯氏瓶中或消煮管,加入
0.1g铁锌粉和10ml10%H2SO4,放在电炉或消煮炉上低温加热5min,取下冷却至室温,再加入10ml浓硫酸及
3.5g混合加速剂,摇匀后在凯氏瓶或消煮管口加一弯颈小漏斗,放在电炉或消煮炉上加热煮沸,间断摇动,直到溶液变白瓶壁上无黑色碳粒后,再加热30min,取下冷却至室温后加水30~50ml,再冷却至室温后即可蒸馏、滴定、计算同1—
4.1 第三篇植物分析植物分析按其目的可分为两类一类是营养诊断分析或作物组织分析,在作物不同生育期采取全株或某合适部位组织进行分析,借以了解作物体内各养分的积累和转化的动态,研究作物对各养分元素中的吸收利用和元素之间的拮抗或协调作用以及新陈代谢的规律,测定作物从土壤和肥料吸收各营养元素的量,判断作物体内养分丰缺状况反映土壤中有效养分的供应状况及其它元素的影响,找出养分营养状况的诊断指标为确定肥料施用时期和施用量提供科学的参考数据,以求达到经济、合理施肥的目的另一类是品质检定分析或产品分析见第四篇农产品分析植物分析按其测定和所测成分形态的不同,又可分为两类一类是全量分析,另一类是组织速测,测定植物组织中尚未同化而仅存在于汁液中的营养成分 3—1植物样品的采集制备和保存 3—
1.1植物组织样品的采集植物组织样品多用于诊断分析,采集植物组织样品首先要选定植株样株必须有充分的代表性,通常也象采集土样一样按照一定路线多点采集,组成平均样品组成每一平均样品的样株数目视作物种类、种植密度、株型大小、株龄或生育期以及要求的准确度而定从大田或试验区选择样株要注意群体密度,植株长相、植株长势、生育期的一致,过大或过小,遭受病虫害或机械损伤以及由于边际效应长势过强的植株都不应采用如果为了某一特定目的,例如缺素诊断而采样时,则应注意植株的典型性,并要同时在附近地块另行选取有对比意义的正常典型植株,使分析的结果能在相互比较的情况下,说明问题植株选定后还要决定取样的部位和组织器官,重要的原则是所选部位的组织器官要具有最大的指示意义,也就是说,植株在该生育期对该养分的丰欠最敏感的组织器官大田作物在生殖生长开始时期常采取主茎或主枝顶部新成熟的健壮叶或功能叶;幼嫩组织的养分组成变化很快,一般不宜采样苗期诊断则多采集整个地上部分大田作物开始结实后,营养体中的养分转化很快,不宜再做叶分析,故一般谷类作物在授粉后即不再采诊断用的样品如果为了研究施肥等措施对产品品质的影响,则当然要在成熟期采取茎秆、籽粒、果实、块茎、块根等样品,果树和林木多年生植物的营养诊断通常采用“叶分析”或不带叶柄的“叶片分析”,个别果树如葡萄、棉花则常做“叶柄分析”植物体内各种物质,特别是活动性成分如硝态氮、氨基态氮,还原糖等都处于不断的代谢变化之中,不仅在不同生育期的含量有很大的差别,并且在一日之间也有显著的周期性变化因此在分期采样时,取样时间应规定一致,通常以上午8—10时为宜,因为这时植物的生理活动已趋活跃,地下部分的根系吸收速率与地上部正趋于上升的光合作用强度接近动态平衡此时植物组织中的养料贮量最能反映根系养料吸收与植物同化需要的相对关系,因此最具有营养诊断的意义诊断作物氮、磷、钾、钙、镁的营养成分状况的采样还应考虑各元素在植物营养中的特殊性采得的植株样品如需要分不同器官例如叶片,叶鞘或叶柄、茎、果实等部分测定,须立即将其剪开,以免养分运转3—
1.2植株组织样品的制备与保存采得的样品一般说是需要洗涤的,否则可能引起泥土、施肥喷药等显著的污染,这对微量营养元素如铁、锰等的分析尤为重要洗涤方法一般可用湿布仔细擦净表面沾污物测定易起变化的成分例如硝态氮、氨基态氮、氰、无机磷、水溶性糖、维生素等须用新鲜样品,鲜样品如需短期保存,必须在冰箱中冷藏,以抑制其变化分析时将洗净的鲜样剪碎混匀后立即称样,放入瓷研钵中与适当溶剂或再加石英砂共研磨,进行浸提测定测定不易变化的成分则常用干燥样品洗净的鲜样必须尽快干燥,以减少化学和生物的变化如果延迟过久,细胞的呼吸和霉菌的分解都会消耗组织的干物质而致改变各成分的百分含量、蛋白质也会裂解成较简单的含氮化合物杀酶要有足够的高温,但烘干的温度不能太高,以防止组织外部结成干壳而阻碍内部水分的蒸发,而且高温还可能引起组织的热分解或焦化因此,分析用的植物鲜样要分两步干燥,通常先将鲜样在80—90℃烘箱最好用鼓风烘箱中烘15—30分钟,松软组织烘15分钟,致密坚实的组织烘30分钟,然后,降温至60—70℃,逐尽水分时间须视鲜样水分含量而定,大约12—24小时干燥的样品可用研钵或带刀片的用于茎叶样品或带齿状的用于种子样品磨样机粉碎,并全部过筛分析样品的细度须视称样的大小而定,通常可用圆孔直径为1mm的筛;如称样仅1—2g者,宜用
0.5mm的筛;称样小于1g者,须用
0.25或
0.1mm筛磨样和过筛都必须考虑到样品沾污的可能性样品过筛后须充分混匀,保存于磨口广口瓶中,内外各贴放一样品标签样品在粉碎和贮存过程中又将吸收一些空气中的水分,所以在精密分析工作中,称样前还须将粉状样品在65℃12—24小时或90℃2小时再次烘干,一般常规分析则不必干燥的磨细样品必须保存在密封的玻璃瓶中,称样时应充分混匀后多点勺取3—
1.3植物微量元素分析样品制备与保存样品的采集与制备chapmanchapmanH.D1966DignosticCriteriaforplantsandsoilsUniv.ofCalif.Berkeley的采样技术得到普遍承认,可供参考植物微量元素分析样品的干燥和粉碎过程中,所用方法与分析常量元素样品相似,特别指出的是防止干燥和粉碎过程中仪器对样品的污染例如干燥箱中烘干时,防止金属粉末等的污染,粉碎样品选用的研磨设备,应采用不锈钢工具钢刀和网筛,如要准确分析铁,必须在玛瑙研钵上研磨,研磨分析标本的细度相当重要,至少通过20目筛,并充分混合,磨细过的样品,要贮存在密封的容器中,在分析前,样品应在60—70℃下烘干20小时,然后再进行分析 3—2植物营养诊断3—
2.1植物汁液和浸提液的制备制取植株汁液的方法有三种一是用压汁法将组织汁液挤压出来,然后稀释到一定浓度进行测定,这叫压液稀释法二是用浸提剂浸提,制成速测用的浸提液,这可用热水浸提或冷水浸提三是直接将汁液挤压在比色盘或试纸上进行速测
1.压液稀释法压出植株汁液需用特别压汁器,现介绍三种供参考1特制的压汁钳,这种压汁钳适用于玉米、棉花、麦子和汁液较多的作物不大适用于水稻使用费力,不易压出汁液但可将植物样品直接放在钳盘上压汁2金工用手虎钳压汁,同时要有一个软质塑料管长10厘米,宽25厘米将待测的组织洗清后,用滤纸内外擦干,放入塑料管中对折后再压汁这种压液器力量较大,同时可防止混入铁锈影响测定3无压汁钳时可用木凳压汁法代替取长棒一个,长凳一条,用绳索将棒捆绑在凳上,另取待测植株放于塑料套管内,折叠后,放在木棒之下压汁此方法取材既方便又省力,适宜于推广使用混合植株样品用压汁器进行压汁,将压出汁液稀释20倍,即1滴汁液加19滴水,即成供测NO3—N、P、K之用的待测液
2.水浸提法将切碎的作物组织混匀后,称取05克放入小三角瓶或大试管中,加蒸馏水20毫升,塞紧,用力摇1分钟上下摇动约200次静止片刻,即可吸取上层清液供测定NO3—N、P、K之用,如果溶液混浊,应先过滤再测定,浸提液不宜放置过久,在2~3小时内测定完淀粉、氨基态氮的测定不用上述待测液而应另外制取3—
2.2试剂配制1氮、磷、钾混合标准液用分析天平准确称取烘干的分析纯试剂,磷酸二氢钾KH2PO
40.4393克,硝酸钾KNO
30.7217克,氯化铵NH4Cl
0.3820克,硫酸钾K2SO
41.3247克,放入100毫升烧杯中,用少量蒸馏水溶解,无损地移入1000毫升容量瓶中,并用蒸馏水多次洗烧杯,洗液均并于容量瓶中,最后加水至刻度,摇匀此溶液中硝态氮NO3—N、铵态氮NH4—N、磷P的浓度各为100mg/L,钾的浓度为1000mg/L,溶液中加甲苯5滴,可保存3—4个月二级混合标准液用刻度移液管分别吸取上述贮备液2毫升及16毫升,各在100毫升容量瓶中用蒸馏水稀释至刻度,充分摇匀,由2毫升贮备液稀释而成的标准液,含硝态氮、铵态氮、磷的浓度各为2mg/L,含钾浓度为20mg/L由16毫升贮备液稀释而成的标准液,含硝态氮、铵态氮、磷的浓度各为16mg/L,含钾浓度为160mg/L,均不易长期保存,1~2周后即失效2硝酸试粉称取分析纯硫酸钡105℃烘干4小时,研细、过60目筛100克,分为四份,分别与10克硫酸锰MnSO4·2H2O,2克锌粉研细,过80—100目筛,4克对氨基苯磺酸和2克四苯胺在研钵中研细混匀,最后加入75克柠檬酸颗粒大时,需先研细在研钵中一起研磨、混匀,于棕色瓶中密闭保存,每次用后随即盖严防潮350%醋酸取化学纯冰醋酸,按11稀释而成
42.1%钼酸铵盐酸溶液称取化学纯钼酸铵
10.5克,溶于约100毫升蒸馏水中,加热低于60℃促其溶解,若有混浊,过滤之,另取浓盐酸204毫升加入约100毫升蒸馏水中,搅匀,待两液冷却至室温后,将钼酸铵溶液慢慢注入盐酸中,边加边摇匀,贮入棕色试剂瓶中,此溶液盐酸浓度为
4.9mol/L,每隔二~三个月应检查其是否失效52%氯化亚锡甘油贮备液称取氯化亚锡结晶SnCl2·2H2O2克,加浓盐酸10毫升,充分摇动使其溶解,加化学纯甘油90毫升,混匀,贮入棕色瓶中,可保存半年以上使用前取2%氯化亚锡甘油液1滴,加蒸馏水19滴,摇匀即成
0.1%氯化亚锡溶液,此溶液只供当天使用,气温高时,仅半日内有效63%EDTA碱性溶液称取EDTA二钠3克,氢氧化钠1克,溶于100毫升蒸馏水中737%甲醛若有沉淀,滤其清液使用,如呈酸性,用稀碱液调节至中性82%四苯硼钠溶液称取
0.5克四苯硼钠采用测血钾专用试剂溶于25毫升蒸馏水中,加
0.2mol/L氢氧化钠2克氢氧化钠溶于250毫升蒸馏水中约2滴调节溶液pH值至8—9放置过夜,然后过滤3—
2.3植物组织中硝态氮的测定硝酸试粉比色法测定原理测定硝态氮是利用硝酸试粉和溶液中的硝酸盐起作用,产生粉红色化合物硝酸试粉是几种试剂配制成的混合粉剂,它们的主要作用是在弱酸性条件下,溶液中硝酸盐受试粉中锌和酸产生的氢作用,先被还原成亚硝酸盐,再与对氨基苯磺酸和甲苯胺作用形成粉红色的偶氮化合物,其反应如下NO3-+Zn+2H+→NO2-+Zn2++H2O试粉中硫酸锰对还原和呈色反应起催化作用,也可消除溶液中氯离子的干扰硫酸钡在试粉中起填充作用在一定浓度范围内,形成粉红色的深浅与溶液中硝酸盐含量的多少成正相关,将它与标准色阶比较,即可求出硝态氮的含量测定步骤制备标准色阶和供试液中硝态氮含量的测定,可同时在白瓷比色盘中,按下表顺序进行表格里的双线上部,为制备比色用标准溶液,双线的右上部为待测试液只有在标准溶液和待测试液都按要求依次准备好之后,才能同时按双线以下各操作步骤顺序进行操作硝 态 氮 测 定 步 骤操 作 步 骤用量单位标准色阶浓度(mg/L)供试液用量(滴)
0.51248121. 制备显色液标准系列取混合标准液浓 度2mg/L滴124000416mg/L滴000123加 蒸 馏 水滴3203212.加50%醋酸滴11111113.加硝酸试粉耳勺11111114.搅匀 由低至高浓度逐穴搅匀5.比色读数 3~15分钟内与标准色阶比较记下读数6.结算结果 硝态氮mg/L=读数值*稀释倍数注意事项
①加入醋酸的作用是使显色稳定,据试验在硝态氮含量高的溶液,醋酸浓度达7%以上呈色才稳定
②硝酸试粉用量各穴尽量一致,每一耳勺相当15毫克
③比色读数时,若试液颜色强度介于标准色阶的两个等级之间,可估计其中间数值为读数值;若试液显色超过最高一级标准色阶,应另取试液稀释后重新测定但在计算结果时,根据读数值,除了乘原来制备供试液时的稀释倍数外,必须再乘以第二次的稀释倍数3—
2.4植物组织中磷的测定磷钼蓝比色法测定原理在一定的酸度和钼酸铵浓度下,溶液中的磷与钼酸铵作用生成黄色的磷钼酸,其反应如下NH42MoO4+2HCl→H2MoO4+2NH4ClH3PO4+12H2MoO4→H3[PMo3O104]+12H2O生成的磷钼酸,在一定量的氯化亚锡作用下,使部分钼六价钼被还原,形成蓝色的复杂化合物—磷钼蓝在一定含磷浓度范围内,溶液蓝色的深浅与磷含量成正比根据蓝色的深浅与标准色阶相比较,即可求出磷的含量测定步骤制备标准色阶和供试液中磷含量的测定,可同时在比色盘中,按下表顺序进行 磷测定步骤操 作 步 骤用量单位标准色阶浓度mg/L供试液用量(滴)
0.5124812制备显色用准系列取混合标准液浓度2mg/L滴124000416mg/L滴000123 滴3203211.加
2.1%钼酸铵盐酸液滴11111112.搅匀由低至高浓度逐穴搅匀3.加
0.1%氯化亚锡溶液滴11111114.搅匀由低至高浓度逐穴搅匀5.比色读数5~15分钟内与标准色阶比较记下读数6.计算结果无机磷mg/L=读数*稀释倍数注意事项
0.1%氯化亚锡在临用前由2%氯化亚锡甘油贮备液稀释制备当天有效,每次少配3—
2.5植物组织中钾的测定四苯硼钠比浊法溶液中的钾离子与四苯硼钠Na[BC6H54]作用,生成难溶的四苯硼钾白色沉淀,使溶液呈现浑浊、其反应如下K++Na[BC6H54]→K[BC6H54]↓+Na+在一定含钾浓度范围内,其混浊度与钾含量成正比,根据混浊程度与标准钾的浊度相比较,即可求出钾的含量测定步骤制备标准比浊系列与供试液中钾的测定,可同时在小试管19×70毫米中,按下表顺序进行有效钾测定步骤操 作 步 骤用量单位标准浊度系列浓度mg/L供试液用量(滴)510204060801. 制备比浊用标准系列取混合标准液 浓 度20mg/L滴2480004160mg/L滴000234加 蒸 馏 水滴6406542.加3%EDTA碱性溶液滴11111113.加37%甲醛滴11111114.搅匀逐管搅匀5.加2%四苯硼钠溶液滴22222226.搅匀逐管搅匀7.比浊读数5~15分钟内与标准浊度系列比浊8.计算结果有效钾mg/L=读数值*稀释倍数注意事项
①试液中产生干扰作用的离子,主要有铵离子及其它一些三价、二价金属离子如钙、镁、铁、铝等须加入EDTA二钠盐及甲醛来掩蔽,以消除干扰EDTA二钠盐即乙二胺四乙酸二钠盐能与二价、三价金属离子结合为无色络合物,甲醛与铵离子作用,能形成无色的六次甲基四胺,其反应如下4NH4++6HCHO→CH26N4+6H2O+4H+铵离子含量多时,在碱性条件下,甲醛才能有更好的掩蔽效果
②比浊读数可参考硝态氮测定中的注意事项
③ 3—3植物水分的测定测定植物样品水分的目的有二一是为了了解植物的实际含水情况,因为
①植物水分和干物质水分以外的物质的含量是植物生理状态和成熟度的重要指标;
②在研究作物施肥效应和光合利用率等问题时经常要测定植物干物质积累的情况;
③种子、水果、蔬菜、饲料等的水分含量是检定品质和判断是否适于储藏的重要标准二是为了要以全干样品为基础来计算各成分的%含量,因为新鲜样品的含水量变化很大,风干样品的含水量也随空气的湿度和温度而改变,如果用鲜样或风干样为基础来计算各成分的%含量的数值也就会随样品含水量的改变而变动,只有用全干样品为基础,各成分含量的数值才能保持不变3—
3.1风干植物样品水分的测定方法原理风干的植物组织样品或种子样品的水分常用100—105℃烘干法测定烘干时样品的失重被认为是水分重,所以这是一种间接测定水分的方法样品在高温烘烤时可能有部分易焦化、分解或挥发的成分损失致产生水分测定的正误差,也可能因水分未完全逐尽或在冷却、称量时吸湿或有部分油脂等被氧化增重而造成误差但在严格控制操作的情况下,对大多数样品来说,烘干法仍然是测定水分的较准确的标准方法操作步骤 取洁净铝盒,放入100—105℃烘箱中烘半小时取出,盖好,移入干燥器中冷至室温约20分钟,称重再烘半小时,称重,两次称重差不超过1mg就算已达恒重将粉碎、混匀的风干植物样品约
3.000g平铺在铝盒中,称量后将盖子放在盒底下,放在已预热至约115℃的烘箱中,关门,调整温度在100—105℃之间,烘烤4—5小时,取出,盖好,移入干燥器中冷却至室温后称量再同法烘烤约2小时再称重,此时可先将砝码放好因为重量之差一般只有几毫克如此继续烘称,直到前后两次重量之差不超过2mg为止如果后一次重量大于前次,则以前一次重量为准结果计算水分%风干基=样品烘烤前后重量之差/风干样品重量×100干物质%风干基=样品烘烤后的重量/风干样品重量×100应该指出,在植物和肥料分析中,水分%的计算习惯上都是以分析样品风干或鲜湿的样品为基础的这种表达方式较易为群众理解和接受例如,某一含水%鲜湿基为85%的新鲜植物样品,如以干样计算,它的水分%将为85/15=566%,前者很易理解,后者则颇费解3—
3.2新鲜植物样品水分的测定方法原理新鲜植物样品不宜直接在100℃烘烤,因为高温时外部组织可能形成干壳,反而阻碍内部组织中水分的逸出,因此须在较低温度下初步烘干升温至100—105℃烘干此法只适于热稳定性高的不含易热解和易挥发成分的样品;如果是幼嫩植物组织和含糖、干性油或挥发性油的样品,都不宜用此法操作步骤取一小烧杯,放入约
5.000g干净的纯砂和一支玻棒
①,放入100—105℃烘箱中至恒重向杯中加入剪碎、混匀的多汁新鲜样品约5g
②,与砂搅匀后称重,将杯和内容物先在50—60℃不鼓风烘约3—4小时,冷却,称重,再同法烘约2小时,再称重量,至恒重为止结果计算水分%鲜湿基=称样前后重量之差/新鲜样品重量×100干物质%鲜湿基=称样烘烤后的重量/新鲜样品重量×100注释
①水分不很多的松散的新鲜样品可以不加砂和玻棒,或改用铝盒称样
②粗粒的鲜样应多称些,以提高称样的代表性 3—4植物粗灰分的测定植物有机体灼烧的残余物称为“粗灰分”植物体的灰分含量并不高约占干物质的2—7%,平均5%左右,但对植物的生长发育有很重要的意义植物干物质中灰分的含量随植物种类、品种、不同器官和部位、生育期以及土壤、气候、施肥和其它农业技术措施等因素而变动一般地说,叶部含灰分最高特别是在幼苗期,茎秆次之,种子中更少不同植物和器官中灰分组成也各有其特征,例如一般茎叶的灰分中以钾钙较多,谷类和玉米种子的灰分以磷钾占多数,豆类种子则以钙为较多,有趣的是茎叶中的钙常高于镁,种子中则常为镁高于钙测定植株各部分灰分含量可以了解各种作物在不同生育期和不同器官中灰分的含量及其变动情况,也可以查明施肥、土壤、气候等因素对灰分含量变化的影响农产品及其加工品的粗灰分含量也是品质鉴定的项目之一样品在适当条件下灼烧灰化后,除了测定粗灰分以外,必要时还可以在其中测定各组成—灰分元素,如磷、钾、钙、镁和多种微量元素方法原理粗灰分常用简单、快速、节约的干灰化法测定,即将样品小心地加热碳化和灼烧,除尽有机质,称量残留的矿物质,即可计算粗灰分%这些矿物质主要是各种金属元素的碳酸盐、硫酸盐、磷酸盐、硅酸盐、氯化物等由于燃烧时生成的碳粒不易完全烧尽,样品上粘附的少量尘土也不易完全洗净,而且植物样品灼烧后灰的组成已改变例如碳酸盐增加,氯化物和硝酸盐损失,有机磷、硫转变为磷酸盐和硫酸盐,重量都有变化,这样测得的灰分称为“粗灰分”灼烧时的温度必须控制在525℃左右500—550℃坩锅呈暗红色,不可过高或操之过急,否则会引起部分钾、钠的氯化物挥发损失磷酸盐在600℃以下不致挥发,太高时也会损失;而且钾、钠的磷酸盐和硅酸盐类也会熔融而把磷粒包藏起来,不易烧尽加热的速度也不可太快,以防急剧干馏时灼热物的局部产生大量气体而致微粒飞失—爆热;而且在高温时磷、硫等也可能被碳粒还原为氢化物而逸失对于含磷、硫、氯等酸性元素较多的样品,例如种子类及其加工品,为了防止高温时这些元素的逸失,须在样品中加入一定量的镁盐或钙盐等补充足够量的碱性金属,使酸性元素形成高熔点的盐类而固定起来,再行灰化这时当然要做空白测定,校正加入金属盐的量有人也建议在样品中加2ml纯橄榄油,焦化,525℃灼烧45分钟,可得近于白色的粗灰分;也可以在灼烧过程中加几滴蒸馏水或浓硝酸等,加速灰化过程应该指出,一些灰分元素在干灰化过程中形成难溶的复杂硅酸盐,即使使用盐酸长时间消煮也不溶解例如锰、铜、锌等含有其总量的1/4以上形成这类难溶物这对灰分的测定虽无影响,但对个别微量元素的测定必将产生严重误差因此,用干灰化法制备个别微量元素待测液的操作细节与本书粗灰分测定都不尽相同;或者可改用湿灰化法制备灰分的待测液操作步骤将标有号码的瓷坩锅在高温电炉上灼烧15—30分钟,移至炉门口稍冷,放入干燥器内冷却至室温20—30分钟,称重必要时再次灼烧、冷却、称重,至恒重为止在已知重量的坩锅中准确称取磨细、烘干、混匀的样品2—3g称准到
0.01g,放在电炉上缓缓加热炭化,烧至无烟时,移放在已烧到暗红色的高温电炉门口处,片刻后再放进炉内深处,关闭炉门,加热至约525℃暗红色,在此温度下烧至灰分近于白色为止,大约需1小时45分钟至2小时,视样品种类和称样大小等而异将钳锅移放在炉门口稍冷,再放入干燥器中至室温,立即称重必要时再次灼烧,至恒重为止计算粗灰分%干基粗灰分多为灰白色如现红棕色,表示含铁较多;如带绿色,表示含锰较多如果黑色碳粒较多,可在冷却后加水湿润,使包被的盐膜溶解,碳粒暴露,再在水浴上蒸干,同上灼烧、称重 3—5植物常量元素的分析在植物必需的常量元素中,氮、磷、钾、钙和镁是土壤农化分析的常规分析项目,尤以三要素的测定更为经常和重要不论在诊断作物氮、磷、钾的营养水平和土壤供应各该元素的丰缺情况时,或者在确定作物从土壤摄取各元素的数量和施肥效应时,都经常要测定植物全株或某些部位器官中有关元素的含量在收获物品质检定工作中,这5种元素的测定也有重要意义,例如食品和饲料中蛋白质的测定实际上就是有机氮的测定,而磷、钾、钙等则是营养价值最高的灰分元素在作物化学诊断分析工作中,关于各类作物在不同生育期特别是生长发育的关键时期和不同部位器官特别是敏感部位器官中氮、磷、钾临界浓度或果树诊断的标准值的拟订很重要,它是解释分析结果和提出增产措施建议所必需的资料这方面的数据国内国外都有许多报道,并有专著问世但必须注意,各资料中报道的指标都是仅指某一采样期和某一特定部位器官而言的;诊断工作很复杂,植株内各营养元素彼此之间又有协助作用和拮抗作用,某元素含量的高低会影响到另一元素的指标或临界值3—
5.1植物全氮、磷、钾的测定植物中氮、磷、钾的测定包括待测液的制备和氮磷钾的定量两大步骤植物全氮待测液的制备通常用开氏消煮法参考有机肥料全氮的测定植物全磷、钾可用干灰化或其他湿灰化法制备待测液本书介绍H2SO4—H2O2消煮法,可用同一份消煮液分别测定氮、磷、钾以及其它元素如钙、镁、铁、锰等3—植物样品的消煮H2SO4—H2O2法方法原理植物中的氮磷大多数以有机态存在,钾以离子态存在样品经浓H2SO4和氧化剂H2O2消煮,有机物被氧化分解,有机氮和磷转化成铵盐和磷酸盐,钾也全部释出消煮液经定容后,可用于氮、磷、钾
①等元素的定量本法采用H2O2加速消煮剂,不仅操作手续简单快速,对氮磷钾的定量没有干扰,而且具有能满足一般生产和科研工作所要求的准确度,但要注意遵照操作规程的要求操作,防止有机氮被氧化成N2或氮的氧化物而损失试剂1硫酸化学纯、比重
1.84230%H2O2分析纯操作步骤1常规消煮法称取植物样品
0.5mm
0.3~
0.5g准确至
0.0002g装入100ml开氏瓶的底部,加浓硫酸5ml,摇匀最好放置过夜,在电炉上先小火加热,待H2SO4发白烟后再升高温度,当溶液呈均匀的棕黑色时取下,稍冷后加6滴H2O2
②,再加热至微沸,消煮约7—10分钟,稍冷后重复加H2O2再消煮,如此重复数次,每次添加的H2O2应逐次减少,消煮至溶液呈无色或清亮后,再加热约10分钟,除去剩余的H2O2,取下冷却后,用水将消煮液无损转移入100ml容量瓶中,冷却至室温后定容v1用无磷钾的干燥滤纸过滤,或放置澄清后吸取清液测定氮、磷、钾每批消煮的同时,进行空白试验,以校正试剂和方法的误差2快速消煮法称取植物样品
0.5mm
0.3~
0.5g称准至
0.0002g,放入100ml开氏瓶中,加1ml水润湿,加入4ml浓H2SO4摇匀,分两次各加入H2O22ml,每次加入后均摇匀,待激烈反应结束后,置于电炉上加热消煮,使固体物消失成为溶液,待H2SO4发白烟,溶液成褐色时,停止加热,此过程约需10分钟待冷却至瓶壁不烫手,加入H2O22ml,继续加热消煮约5—10分钟,冷却,再加入H2O2消煮,如此反复一直至溶液呈无色或清亮后一般情况下,加H2O2总量约8—10ml再继续加热5—10分钟,以除尽剩余的H2O2取下冷却后用水将消煮液定量地转移入100ml容量瓶中,定容v1同时做空白试验,校正试剂和方法误差注释
①植物体内的钾以离子态存在于细胞液或与有机成分呈现松散结合态因此,若只测定钾时,可采用简易的浸提法制备待测液浸提剂可用
0.5mol/LHCl或2mol/LNH4AC~
0.2mol/LMgOAC2溶液,也可用热水
②所用的H2O2应不含氮和磷H2O2在保存中可能自动分解,加热和光照能促其分解,故应保存于阴凉处在H2O2中加少量H2SO4酸化,可阻止H2O2分解3—植物全氮的测定半微量蒸馏法和扩散法方法原理植物样品经开氏消煮、定容后,吸取部分消煮液碱化,使铵盐转变成氨,经蒸馏和扩散,用H3BO3吸收,直接用标准酸滴定,以甲基红—溴甲酚绿混合指示剂指示终点试剂140%m/vNaOH溶液22%H3BO3—指示剂溶液3取标准溶液[CHCl或1/2H2SO4=
0.01mol/L]4碱性溶液以上试剂配制见有机肥全氮测定操作步骤1蒸馏法吸取定容后的消煮液
5.00—
10.00ml,V2,含NH4—N约1ml,注入半微量蒸馏器的内室,另取150ml三角瓶,内加入5ml2%H3BO3—指示剂溶液,放在冷凝管下端,管口置于H3BO3液面以下,然后向蒸馏器内室慢慢加入约3ml40%m/vNaOH溶液,通入蒸气蒸馏,注意开放冷凝水,勿使馏出液的温度超过40℃待馏出液体积约达50~60ml时,停止蒸馏,用少量已调节至pH为
4.5的水冲洗冷凝管末端用酸标准溶液滴定馏出液至由蓝绿色突变为紫红色终点的颜色应和空白测定的终点相同用酸标准溶液,同时进行空白液的蒸馏测定,以校正试剂和滴定误差2扩散法吸取定容后的消煮液200~500mlV2,含NH4—N
0.05—
0.5mg于10厘米的扩散皿外室内室加入2%H3BO3—指示剂溶液3ml,参照土壤碱解氮测定的操作步骤进行扩散和滴定,但中和H2SO4需用40%NaOH溶液2ml,扩散可在室温下进行,不必恒温,室温在20℃以上时,放置约24h,低于20℃时,须放置较长时间在扩散期间,可将扩散皿内容物小心转动混匀2~3次,加速扩散,可缩短扩散时间在测定样品的同时,须在同一条件下做空白试验结果计算全N%=Cv-v0×
0.041×100/m×v2/v1式中C—酸标准溶液浓度,mol/L;v—滴定试样所用的酸标准液,ml;v0—滴定空白所用的酸标准液,ml;
0.041—N的毫摩尔质量,g/mmol;m—称样量,g;v1—消煮液定容体积,ml;v2—吸取测定的消煮液体积ml3—植物全磷的测定钒钼黄吸光光度法方法原理植物样品经浓H2SO4消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐待测液中的正磷酸与偏钒酸和钼酸能生成黄色的三元杂多酸,其吸光度与磷浓度成正比,可在波长400~490nm处用吸光光度法测定磷磷浓度较高时选用较长的波长,较低时选用较短的波长
①此法的优点是操作简便,可在室温下显色,黄色稳定
②在HNO3,HClHClO4和H2SO4等介质中都适用,对酸度和显色剂浓度的要求也不十分严格
③,干扰物小
④在可见光范围内灵敏度较低,适测范围广约为1—20mg/L,P故广泛应用于含磷较高而且变幅较大的植物和肥料样品中磷的测定试剂1钒钼酸铵溶液
25.0g钼酸铵[NH46Mo7O24·4H2O分析纯]溶于400ml水中,另将125g偏钒酸铵NH4VO3,分析纯溶于300ml沸水中,冷却后加入250ml浓HNO3分析纯将钼酸铵溶液缓缓注入钒酸铵溶液中,不断搅匀,最后加水稀释到1L,贮入棕色瓶中26mol/LNaOH溶液24gNaOH溶于水,稀释至100ml;
30.2%二硝基酚指示剂
0.2g2,6—二硝基酚或2,4—二硝基酚溶于100ml水中;4磷标准液[CP=50mg/L]
0.2195g干燥的KH2PO4分析纯溶于水,加入5ml浓HNO3,于1L容量瓶中定容操作步骤吸取定容、过滤或澄清后的消煮液
10.00mlV2含磷
0.05~
0.75mg放入50ml容量瓶中,加2滴二硝基酚指示剂,滴加6mol/LNaOH中和至刚呈黄色,加入
10.00ml钒钼酸铵试剂,用水定容V315分钟后用1cm光径的比色杯在波长440mm处进行测定,以空白溶液空白试验消煮液按上述步骤显色调节仪器零点标准曲线或直线回归方程准确吸取50mg/LP标准液0,1,
2.5,5,
7.5,10,15ml分别放入50ml容量瓶中,按上述步骤显色,即得0,
1.0,
2.5,
5.0,
7.5,10,15mg/LP的标准系列溶液,与待测液一起测定,读取吸光度,然后绘制标准曲线或求直线回归方程结果计算全P,%=CP×v1/m×v3/v2×10-4式中CP—从校准曲线或回归方程求得的显色液中磷浓度,mg/L;v3—显色液体积,ml;v2—吸取测定的消煮液体积,ml;v1—消煮液定容体积,ml;m—称样量,g;10-4—将mg/L浓度单位换算为百分含量的换算因数注释
①显色液中CP=1~5mg/L时,测定波长用420nm;5—20mg/L,用490nm待测液中Fe3+浓度高的选用450nm,以消除Fe3+干扰校准曲线也应用同样波长测定绘制
②一般室温下,温度对显色影响不大,但室温太低如<15℃=时,需显色30分钟,稳定时间可达24小时;
③如试液为HCl,HClO4介质,显色剂应用HCl配制;试液为H2SO4介质,显色剂也用H2SO4配制显色液酸的适宜浓度范围为
0.2~
1.6mol/L,最好是
0.5~
1.0mol/L,酸度高显色慢且不完全,甚至不显色,低于
0.2mol/L,易产生沉淀物,干扰测定钼酸盐在显色液中的终浓度适宜范围为
1.6×10-3~10-2mol/L,钡酸盐为8×10-5~
2.2×10-3mol/L
④此法干扰离子少,干扰离子是Fe3+,当显色液中Fe3+浓度超过
0.1%时,它的黄色有干扰可用扣除空白法消除3—植物全钾的测定火焰光度法方法原理植物样品经消煮或浸提,并经稀释后,待测液中的K可用火焰光度法测定试剂1K标准溶液CK=100mg/L
0.1907gKCl分析纯,在105~110℃干燥2h,溶于水,于1L容量瓶中定容,存于塑料瓶中操作步骤吸取定容后的消煮液
5.00—
10.00mlv2放入50ml容量瓶中,用水定容v3直接在火焰光度计上测定,读取检流计读数标准曲线或直线回归方程准确吸取100mg/LK标准溶液0,
0.5,
1.0,
2.5,
5.0,10,20ml,分别放入50ml容量瓶中,加入定容后的空白消煮液5或10ml使标准溶液中的离子成分和待测液相近,加水定容即得0,1,2,5,10,20,40mg/LK的标准系列溶液以浓度最高的标准溶液定火焰光度计检流计的满度一般只定到90,然后从稀到浓依次进行测定,记录检流计读数,以检流计读数为纵坐标绘制标准曲线或求直线回归方程结果计算全K,%=CK×v3/m×v1/v2×10-4式中CK—从标准曲线或回归方程求得的测读液中K的浓度,mg/L;v1——消煮液定容体积,ml;v2——消煮液的吸取体积,ml;v3——测读数定容体积,ml;m——称样量,g;10-4——将mg/L浓度单位换算为百分含量的换算因数3—
5.2 植物全钙镁的测定植物全量钙、镁测定的样品分解,可用干灰化法和湿灰化法湿灰化法,如果采用HNO3—HClO4—H2SO4三酸消煮法,并且同时测定磷、钾时,要注意钾和钙转化为难溶的CaSO4,而且SO2-4浓度太高时,对EDTA络合滴定或原子吸收分光光度法测定钙都会带来影响,因此,钙镁的测定以采用干灰化法好溶液中钙镁的测定,目前都用EDTA络合滴定法或原子吸收分光光度法植物样品中含磷量比较高,特别是种子中含磷很高而钙镁较少,因此在测定全钙镁时,必须解决磷的干扰问题,而用原子吸收分光光度法测定钙镁是一个快速而又准确的方法,但仪器比较昂贵,还不普及本书只介绍EDTA络合滴定法方法原理 植物样品经干灰化后,用稀盐酸煮沸,溶解灰分中的钙和镁待测液中的Ca2+和Mg2+用EDTA直接滴定法,方法要点参见土壤Ca2+、Mg2+测定,对于含磷较高的植物样品如种子则,须采用EDTA返滴定法,以免在碱性溶液中生成磷酸钙而造成误差主要仪器 高温电炉;瓷坩锅30ml;半微量滴定管试剂 除需用11氨水、4mol/LNaOH,11三乙醇胺水溶液和
0.1%溴甲酚绿指示剂以外,还须配制下列试剂1K—B指示剂先取50gK2SO4无水研细,再分别取
0.5g酸性铬黑K[2—(2—羟基—5—磺酸钠—偶氮苯)—1,8二羟基—3,6二磺酸钠盐,和1g萘酚绿B研细,将三者混合均匀,贮于棕色瓶或塑料瓶中,不用时放在干燥器中保存
20.01mol/LEDTA标准溶液取
3.720gEDTA二钠盐溶于无CO2的蒸馏水中,微热溶解,冷却定容至1000ml用标准Ca2+溶液标定,方法同滴定Ca2+此液贮于塑料瓶中备用
30.01mol/LCa2+标准液,准确称取在105℃下烘4—6小时的分析纯CaCO30.5004g溶于25ml
0.5mol/LHCl中煮沸除去CO2,用无CO2蒸镏水洗入500ml容量瓶中并稀释到刻度 操作步骤 准确称取烘干、磨细、混匀的植物样品
2.×××g,放在瓷坩埚中,按3—3的操作方法灰化冷却后用少量水湿润灰分,然后滴加
1.2mol/LHCl,慎防灰分飞溅损失作用缓和后添加
1.2mol/LHCl共约20ml加热到沸,溶解残渣趁热用无灰滤纸过滤,滤液盛于100ml容量瓶中;用热水洗涤瓷坩埚和残渣,冷却后用水定容,即得HCl浓度约为
0.24mol/L的待测液1直接滴定法适用于一般茎叶样品Ca的测定即吸取上述待测液10ml取用量视Ca、Mg含量而定,含Ca1-5mg放入150ml三角瓶中,用水稀释至约50ml加入11三乙醇胺2ml,摇匀,再加4mol/LNaOH2ml摇匀放置2分钟MgOH2沉淀后立即加入K—B指示剂
0.1—
0.2g,用
0.01mol/LEDTA标准溶液滴定至紫红色突变为蓝绿色记录所用EDTA的毫升数V1其摩尔浓度为MCa+Mg总量的测定另吸取10ml待测液稀释至约50ml,加11三乙醇胺2ml,摇匀,再加氨缓冲溶液5ml,摇匀,加K—B指示剂
0.1—
0.2g摇匀后用
0.01mol/LEDTA标准溶液滴定记录所用毫升数V2结果计算全Ca%=MV1×
0.04008×分取倍数/样品称重g×100%全Mg%=MV2-V1×
0.02431×分取倍数/样品称重g×100%式中M—EDTA溶液摩尔浓度V1—EDTA溶液滴定Ca时消耗的体积mlV2—EDTA溶液滴定Ca+Mg时消耗体积ml分取倍数—本操作步骤中是100/10=102反滴定法适用于一般种子样品Ca的测定,即吸取待测液
10.00ml含Ca1-5mg于150ml三角瓶中,用水稀释至50ml,加入11三乙醇胺5ml摇匀,放置2—3分钟,然后加入2mol/LNaOH4ml调到pH
11.5摇匀,放置1—2分钟,立即加入K—B指示剂约
0.1g摇匀后加入过量的EDTA标准液10ml,此时溶液应呈蓝绿色,然后用
0.01mol/LCa标准液反滴定过剩的EDTA,终点为由蓝绿色突变为紫红色记录所用Ca标准溶液的毫升数为V1,其摩尔浓度为M同时做Ca的空白测定吸取10ml空白溶液即
0.24mol/LHCl,同上稀释,加三乙醇胺,NaOH指示剂和10mlEDTA溶液,用
0.01mol/LCa标准溶液滴定记录所用Ca标准溶液的毫升数为V0Ca+Mg总量的测定吸取待测液
10.00ml于150ml三角瓶中,用水稀释至约50ml,加入11三乙醇胺溶液5ml,摇匀后放置2—3分钟,加入氨缓冲溶液5ml调至pH10,摇匀加K—B指示剂
0.1g,摇匀后加入过量的
0.01mol/LEDTA标准液10ml,此时溶液应呈蓝绿色,然后用
0.01mol/LCa标准溶液反滴定过剩的EDTA,至由蓝绿色突变为紫红色为终点,记录所用的Ca标准溶液的毫升数V2同时作Ca+Mg的空白标定吸取10ml空白液即
0.24mol/LHCl,同上释稀,加三乙醇胺缓冲溶液、指示剂和10mlEDTA溶液,用Ca标准溶液滴定记录所用Ca标准溶液的毫升数为V’0结果计算全Ca%=MV0-V1×
0.04008×分取倍数/W×100%全Mg%=M[V’0-V2-(V0-V1)]×
0.02431×分取倍数/W×100%式中M-EDTA溶液的摩尔浓度V
0、V’
0、V
1、V2见步骤中说明
0.02431-Mg的摩尔质量g
0.04008-Ca的摩尔质量gW——烘干样品重,分取倍数——为100/10=103—6 植物微量元素分析硼、锰、锌、铜、铁和钼是植物生长的必需的微量元素,它们与常量元素不同,其含量很低,且在植物体内变动较大,因此,微量元素有两方面的问题一是不足的问题,当土壤供应不足时,植物常常发生缺素症,影响植物的生长发育,从而影响农作物的品质;当土壤供应过多时,植物吸收过多而影响植物生长,甚至出现中毒现象,不仅影响作物的产量和品质,而且进一步影响人和动物的健康有些元素如钼、硒等植物吸收过多虽不影响植物生长,却通过食物链进入动物体,常常引起动物中毒,因此微量元素的研究、植物分析是不可缺少的植物微量元素的营养诊断一般包括外形诊断、土壤测试、植物分析和田间试验,特别是土壤测试和植物分析可以相互验证,互相补充,使诊断更为可靠微量元素的分析方法,一般包括样品的化学处理和元素的定量测定两个方面样品的化学处理,通常采用湿灰化法或干灰化法湿灰化法可用不同HNO
3、H2SO4和HClO4配比的几种步骤来完成干灰化法可见灰分测定一节中介绍各个元素的分析方法,早在1942年Peper详细叙述过许多经典的比色方法,近代原子吸收光谱法广泛应用于植物组织灰分的分析3—
6.1 植物硼的测定姜黄素比色法方法原理植物样品用干灰化法,稀盐酸溶解灰分,以姜黄素比色法测定硼,在酸性介质中姜黄素与B结合成玫瑰红色的络合物,即玫瑰花青苷它是两个姜黄素分子和一个硼原子络合而成,检出B的灵敏度是所有比色测定硼的试剂中最高的,最大吸收峰在550nm处,在比色测定B时应严格控制显色条件,以保证玫瑰花青苷的形成玫瑰花青苷溶液在
0.0014—
0.06mg/LB的范围内符合Beer定律溶于酒精后,在室温下1—2小时内稳定一般植物组织中含有足够的盐基可防止B在灰化过程中逸失对于种子,尤其是油料作物的种子,应加分析纯CaOH2饱和溶液润湿样品以后灰化灰分用稀HCl溶解后,如溶液浑浊,可过滤或离心后用清液测定B主要仪器高温电炉;分光光度计,恒温水浴试剂1姜黄素——草酸溶液
0.04g姜黄素和5g草酸H2C2O4·2H2O,二级溶于无水酒精二级中,加入
4.2ml6mol/L盐酸,移入100ml石英容量瓶中,用酒精定容或用普通容量瓶定容后,将溶液移入塑料瓶中保存,贮存在冰箱中,有效期可延长3—5天,姜黄素容易分解,最好当天配制
20.1mol/LHCl3CaOH2饱和溶液4B标准溶液
0.5716gH3BO3一级溶于
0.1mol/LHCl中,在容量瓶中定容成1升用
0.1mol/LHCl定容将溶液移入干燥塑料瓶中保存,此为100mg/LB标准溶液再稀释10倍成为10mg/LB标准贮备液吸取10mg/LB溶液
1.0,
2.0,
3.0,
4.0,
5.0ml,用水定容至50ml,成为
0.2,
0.4,
0.6,
0.8,
1.0mg/LB的标准系列溶液,贮存在塑料瓶中操作步骤称取烘干磨碎
0.5mm的植物样品
0.5××g,盛于石英坩埚中种子样品应加少许CaOH2饱和溶液以防B损失,在电炉上预先炭化,再移入高温电炉中缓缓升温至500℃灰化冷却后用10—20ml
0.1mol/LHCl溶解灰分定容吸取1ml清液含B量不超过1μg,放入瓷蒸发皿中,加入4ml姜黄素——草酸溶液略加摇动均匀,在55±3℃水浴上蒸发至干,并且继续在水浴上烘干15分钟,除去残余的水分在蒸发与烘干过程中显出红色加20ml95%酒精溶解,用干滤纸过滤到1cm光径比色槽中,在550nm波长处比色,用酒精调节比色计的0点,假若吸收值过大,说明B浓度过高,应加95%酒精稀释或改用580或600nm的波长比色工作曲线的绘制分别吸取
0.2,
0.4,
0.6,
0.8,
1.0mg/LB标准系列溶液各1ml,放入瓷蒸发皿中,加4ml姜黄素溶液,同上述步骤显色和比色以B标准系列的浓度mg/L对吸收值绘制工作曲线结果计算全Bmg/kg=C×液样比式中C——由工作曲线查得B的mg/L数;液样比——
0.1mol/LHCl的ml数/样品的克数3—
6.2 植物钼的测定KCNS比色法方法原理植物样品用干法灰化,稀HCl溶解灰分,用KCNS比色法测定钼由于植物含钼量低,称样量要大些,并且应加入适当数量铁溶液主要仪器电热板、高温炉、分光光度计等试剂1浓盐酸优级纯210%氧化亚锡溶解10gSnCl2二级于10ml浓HCl中,需要时加热低沸,溶解后用去离子水稀释至100ml,新鲜配制310%三氯化铁溶液溶解49gFeCl3·6H2O于水中,用去离子水稀释至1升4硝酸钠溶液称取
42.5g硝酸钠,溶于去离子水中稀释到100毫升5乙戊酸A·R;620%KCNS溶液称取硫氰化钾A·R20g于去离子水中定容体积为100ml7标准钼溶液称取优级纯的钼酸铵〔NH46Mo7O24·4H2O〕
0.1840g于1升容量瓶中,加去离子水溶解后,稀释至刻度,此标准钼溶液为100mg/L,吸取
2.5ml用去离子水定容至250ml,此标准溶液为1mg/L操作步骤称
5.00—
10.00g植物样品在瓷蒸发皿中于低温初步灰化,而后转入高温电炉,500℃1小时完成灰化,用5mol/LHCl30ml溶解灰分,过滤,将滤液小心的蒸发至干,灼烧除去有机物,冷却后用5—7ml浓HCl溶解残渣,加蒸馏水定容至100ml假如灰化不完全则将不溶物和滤纸烘干,重新灰化,将所获得溶液合并在一起最后定容到100ml取50ml溶液加入1mlNaNO3摇匀,加三氯化铁溶液1ml,20%KCNS3ml摇匀,再加10%SnCl22ml,混合均匀,由于植物样品中钼的含量较高,也可以不必用有机试剂提取,直接于水溶液中比色测定标准曲线的绘制分别取
1.00mg/L钼标准液1,3,6,10,15ml于100ml容量瓶中,加浓HCl3ml,最后加蒸馏水至50ml,再加入NaNO31ml摇匀,加FeCl31ml20%KCNS3ml,再加10%SnCl22ml混合均匀,470nm波长进行比色,以吸光度为纵标,浓度为横坐标,绘制工作曲线结果计算植物钼M0mg/kg=c×ts/m式中c——从标准曲线查得mg/L数;ts——分取倍数;m——样品质量g3—
6.3 植物铁、锰、铜、锌的测定原子吸收分光光度法方法原理植物样品用干法灰化后,经稀HCl溶解,滤液中的Fe、Mn、Cu、Zn,可直接用原子吸收分光光度法测定之此法非常迅速、准确,干扰离子少,并且可以一次处理样品和使用统一的标准曲线主要仪器原子吸收分光光度计、高温电炉、瓷坩锅、电热板试剂
(1)6mol/L的HCl
(2)铜标准贮备溶液100mg/L称取
0.1000克金属铜,溶解于11的HNO3,转入1000毫升容量瓶中,定容
(3)铁标准贮备溶液1000mg/L称取
1.000g金属铁,溶解于20毫升11HCl加热溶解,转移到1升容量瓶中,定容至刻度
(4)锌标准贮备溶液500mg/L称取
0.5000克金属锌,用20毫升11HCl溶解,移入1升容量瓶中定容
(5)锰标准贮备液1000mg/L,称取
1.000g金属锰,用20ml1:1HNO3溶解,转入1升容量瓶中定容操作步骤称取经105℃烘干的植物样品
1.0000—
2.0000g于瓷坩锅中先进行碳化,再于<500℃的高温炉中灰化,大约
1.5小时,用6mol/LHCl溶解灰分,转入25ml容量瓶中定容备测标准曲线的绘制用标准贮备液稀释为所要求的系列标准液并分别绘制标准曲线铜标准系列含量1—5mg/L锌标准系列含量1—10mg/L铁标准系列含量1—30mg/L锰标准系列含量1—20mg/L用同浓度的盐酸配制标准溶液测定铜时,浸提液可直接喷入乙炔—空气火焰中测定,锌、铁、锰要稀释2—50倍,稀释液中要加入镧溶液以抑制干扰同时进行空白试验结果计算Cu、Zn、Fe、Mn、mg/kg=c×ts/mc—从标准曲线中查得mg/L数ts—稀释倍数m—样品质量g注释待测液还可以测定其它元素,如Ca、Mg、K、Na、Sn、Pb、Ni、等具体参照土壤微量元素测定3—7 植物全碳的测定K2Cr2O7容量法植物全碳系指有机碳而言,它的测定有干烧法和湿烧法两种干烧法需特殊的设备,而且手续繁琐;湿烧法是根据植物有机碳容易被氧化的性质,用K2Cr2O7—H2SO4氧化法测定的,操作简便、快速,有足够的准确度,适宜于大批样品的分析方法原理植物样品中的有机碳在较高的温度下,可用已知量的过量K2Cr2O7—H2SO4溶液使之氧化剩余的K2Cr2O7用FeSO4标准溶液进行回滴由净消耗的K2Cr2O7量,即可计算出碳的含量主要仪器电炉1000w、温度计200℃、硬质试管25×200mm、油浴锅、铁丝笼等试剂同土壤有机质测定操作步骤称取磨碎烘干过
0.25mm筛的植物样品
①
20.0—
30.0mg含C约15mg以内
②于大试管中,准确加入
20.00ml
0.4mol/LK2Cr2O7—H2SO4溶液,轻轻摇匀然后参照土壤有机质测定步骤消煮滴定,滴定时最终溶液的体积不得小于120ml即1/2H2SO4浓度须在2—3mol/L范围内结果计算全C%干基=V0-VeCFe×
0.003/W×100式中V0—空白标定时,所用去的H2SO4标准液体积mlVe—滴定待测液用去的FeSO4标准液体积ml;CFe—FeSO4标准液的浓渡;
0.003—1/4C的摩尔质量kg/mol;W—烘干样品重g注释
①植物样品含C量很高,一般在40%左右,称量较少,植物样品又容易吸水,因此称样前必须先烘干,称样时要快速、准确
②为了保证有机碳氧化完全,如样品测定时滴定所用FeSO4标准溶液体积小于空白标定时所耗FeSO4体积的1/3时,需减少称样量重做 第四篇 农产品分析 4—1 农产品样品的采集与保存 农产品分析工作的可靠性,首先取决于所采样品的代表性,否则分析工作将是徒劳,甚至导致错误的判断,给生产或科研带来损失农产品分析样品的采集包括茎叶等组织样品,籽粒样品、蔬菜瓜果样品及饲料样品等4—
1.1 籽粒样品的采集、制备与贮存1样品的采集从个别植株上采样,谷类或豆类作物从个别植株上采取种子样品时,应考虑栽培条件的一致性种子脱粒后,去杂、混匀、按四分法缩分为平均样品,重量不少于25g从试验小区或大田采样可按照植株组织样品的采样方法,选定样株收获后脱粒,混匀,用四分法缩分,取得约250g样品大粒种子,如花生、大豆、蓖麻、棉籽、向日葵等可取500g左右采样时应选取完全成熟的种子从成批收获物中取样 在保证样品有代表性的原则下,可在散装堆中设点随机取样,或从包装中随机扦取原始样品,再用四分法或分样器缩分至500g左右2样品的制备与贮存将采取的籽粒样品风干,去杂和挑去不完善粒,用磨样机或研钵磨碎,使之全部通过
0.5~1mm筛,贮于广口瓶中,贴好标签备用油料作物中的大粒种子,如花生、向日葵、棉籽等,应去掉厚的果壳或种皮,只分析种仁但棉籽种皮不易剥掉,可先用水浸湿4~6小时,再用锋利的小刀将种子切为两半,取出种仁为了防止油料作物种子在磨碎过程中损失油分,可从采取的样品中用四分法缩分出少量样品,于70~80℃干燥箱内干燥5~15小时,取出,在瓷研钵中用杵击碎,不能研磨大豆和其他含油少的种子则可以直接用磨磨碎;有时要磨2—3次,先粗碎,再细磨4—
1.2 水果蔬菜样品的采集、制备与贮存1样品的采集一般水果、蔬菜生长的成熟期延续时间很长,采样应在其主要成熟期进行,必要时也可在其成熟过程中采2—3次样品采样时应在试验区或地块中不少于10个样株上采集部位相同,成熟度一致的果实或块根茎若干个组成平均样品平均样品的绝对数量较小的果实或块根茎如青椒之类应不少于40个;蕃茄、洋葱、马铃薯应不少于20个;黄瓜、茄子、大蒜、胡萝卜及小萝卜不少于15个;大的瓜果、白菜球、甘蓝球、萝卜不少于10个,数量多时可将每个切取匀致的1/4,总重以1kg左右为宜对果树的果实采样要选品种特征典型的样株,才能比较各品种的品质样株要注意挑选树龄、树型、生长势、载果量等一致的正常株,幼或老和旺长的都缺乏代表性在同一果园同一品种的果树中约选5—10株为代表,从每株的全部收获物中选取大、中、小和向阳或背阴的果实共10~15个组成平均样品,一般总重不少于
1.5kg2样品的制备与贮存采得的样品要及时刷洗、擦干瓜果和蔬菜分析通常都用新鲜样品有的分析全部产品,有的只分析食用部分,随分析目的要求而定,大的瓜果或平均样品数量多时,可匀致地切取其中一部分但要使所取部分中各组织的比例应与全部样品相应,作为分析样品将分析用样品切碎后用高速植物组织粉碎机或研钵打碎成浆状,与汁液一起混匀后称样欲用干样分析时,则必须力求快速风干,以保持样品成分不变加速干燥的主要方法是将样品切成块或片状后高温通风干燥,即先置110~120℃ 的鼓风烘箱中样品温度达100~105℃烘20~30分钟,然后降温,在60~70℃烘至变脆易压成粉末为止烘的时间不宜太长,一般短则4~5小时,长则8—10小时如无鼓风烘箱,可用普通烘箱代替,初期把门打开,以利水分逸出如有真空干燥箱则更好也可先用蒸气沸水蒸锅杀酶15~20分钟,再在60~70℃或30~50℃烘箱中烘干,最后将干样品粉碎过筛,装入广口瓶中保存备用对测定糖或淀粉的样品,最好用新鲜样测,因在高温烘干时糖分易被焦化,部分淀粉也易被酸性汁液水解而变化也可用酒精保存新鲜样品 4—2 农产品水分测定105℃常压烘干法适用范围适用于风干植物或种子样品的水分测定不适用于幼嫩植物组织及含糖、干性油或挥发性油等样品测定步骤样品制备取混均的代表性样约30~40g,可按表中要求细度磨碎,混匀装瓶备用各种植物样品测定水分含量时粉碎程度植物名称样品重量g制备方法水稻、麦、玉米高梁、谷子、大豆约30粉碎度通过
0.5mm孔筛的至少不小于90%花生、蓖麻约40逐粒剥壳,分别称重,计算壳仁百分率,仁切成薄片厚约1mm,测定时按比例称样向日葵、棉籽约30切成薄片每粒约切成8—12片或剪碎油菜、芝麻、大蒜等小粒种子约30取整粒种子抄自《农业化学分析》赵铁男主编,1980年测定称取经制备的风干样品
5.00g,放入已称至恒重的铝盒内,摊平盖好待烘箱预热至115℃时,将铝盒盖揭开放于盒底下,打开烘箱门,将铝盒放入烘箱内关门,调节温度,当温度稳定于100~105℃时开始计时,烘烤4—5小时,打开烘箱门,盖好铝盒盖,移入干燥器中,冷却后立即称重再用同法烘烤2小时,称重直到前后两次重量之差不超过2mg为止如果后一次重量大于前次,则以前一次重量为准结果计算水分%风干基=样品烘烤前后重量之差/风干样品重量×100注释
①农业部曾为种子水分测定规范化,提出一个标准方法,即要求样品种子细度应90%样本通过
1.00mm筛孔20目,50%样本应通过
0.5mm筛孔40目铝盒直径
4.6cm高
2.0cm称样5g烘烤时间105℃±2℃烘8小时,或130℃±2℃烘40—60min该法适用于谷物类种子
②对向日葵种子而言,仍以烘烤3小时为宜对一些易分解或焦化的样品还可适当缩短时间或降低温度
③水%的计算中植物和肥料分析一样,都习惯以风干样品重为基础130℃快速烘干法适用范围 只适用于谷类样品的水分测定测定步骤 同105℃烘干法一样用铝盒称取样品,待烘箱温度预热至140℃左右,将铝盒盖打开,放入烘箱内待温度调节稳定于130℃±2℃时计时不同植物种子的烘烤时间可参考表植物向日葵灿、粳稻、玉米高梁小麦谷子油菜大豆烘烤时间min20605040705060但本法只适合于谷类作物的种子水分测定,大豆、花生、油菜等种子仍以用105℃烘干法为宜向日葵种子也以105℃下烘3小时为适烘干法测水分,实验室内相对湿度不应高于70%,否则会影响结果蒸馏法适用范围 本法利用双液体系原理,而使待测样品中水分的沸点下降由此在较低温度下样品中水分即能迅速被蒸馏出来故适用于水分高的新鲜植株样品,或含挥发性油和干性油等易氧化的油质样品试剂及仪器装置甲苯或二甲苯水分测定蒸馏器测定步骤 将水分测定蒸馏器各部分,用铬酸—硫酸溶液仔细洗涤,再用水充分冲洗,移入烘箱中烘干,以防止测定时带入水分及测定时样品中水滴沾附于蒸馏器内壁准确称取剪碎的均匀样品称样以样本内水分含量不超过承受器上的体积刻度为度体积刻度为10ml者,可称样8—9g,体积小者可相应减少将样品置于洁净且经烘干的蒸馏烧瓶内加甲苯或二甲苯约75ml,使样品全部淹没按图4—1把仪器各部分连接好严防各磨口接头漏气、着火,接通冷凝管,打开加热电源,以文火徐徐加热蒸馏烧瓶此时甲苯和样品中水分共同被馏出,然后被冷凝管冷却后皆成液滴回滴于承受管中水比重大于甲苯,故可在承受管底部累积待大部分水分被馏出后,再增大火力,直至承受管中水分体积不再增加,且水液上层甲苯液已澄清透明,不因再含微水粒而浑浊为止关闭加热电源如冷凝器及承受管上部内壁有水滴沾附,可用饱醮甲苯的小长柄毛刷将冷凝管壁上的水滴推刷下去,或从冷凝管顶注入少量甲苯以冲洗水滴承受器内壁上水滴,可用干燥玻璃棒推至水液内待承受器内溶液冷却至室温时,读取水分体积毫升数结果计算水%=V×D/W×100式中V—承受管中水层的体积ml; D—水的比重;W—样品重g注释
①本法是根据双液系共馏原理,当二种互不相溶的液体共馏时,此混合物的蒸气压等于其各组份蒸气压之和,而混合物的沸点则小于各组份各自原有沸点甲苯和样品中水分互不相溶,在蒸馏瓶内构成双液体系,形成恒沸混合物,此混合物沸点即低于甲苯
110.8℃ 和水100℃ 的沸点所以可以在较低的温度下,馏出样品中水分,而达测定目的与水组成恒沸物的物质称载体,载体中二甲苯比甲苯好,所需蒸馏时间短,水的回收率也较高,但二甲苯价格较高,而甲苯价格要便宜得多,故目前以用甲苯为多无论是甲苯或二甲苯,都是易燃物质,应注意防火开始蒸馏测定时需文火,因水和甲苯所组成的恒沸混合物沸点低84℃,当大部分水分被馏出后,恒沸混合物的沸点,随水分的比例减少而上升当蒸馏烧瓶中仅剩有甲苯溶液时,沸点即上升为甲苯的沸点
110.8℃为赶尽蒸馏烧瓶内样品中的残余水分,故要最后加大火力附图 4—3蛋白质的测定4—
3.1开氏法测定粗蛋白质适用范围本法适于谷物及油料作物种子中粗蛋白质测定,是农牧渔业部部颁标准法,即用开氏法测总氮量,再乘以蛋白质换算因数,而得粗蛋白质含量试剂配制11/2
0.2mol/L硫酸标准液此浓度适用于谷类作物种子或1/
20.05mol/L硫酸标准液此浓度适用于大豆种子2浓硫酸3混合催化剂称取硫酸钾或硫酸钠100g,硫酸铜10g,均匀混合后研细通过0177mm孔径,贮于瓶中4蔗糖分析纯测定步骤 将选有代表性种子,按四分法取样后,置60℃烘箱中干燥,用粉碎机磨碎,通过
0.05mm孔径,置磨口广口瓶中保存称样
0.5000—
0.1000g,放入100ml开氏瓶中,放入2—4g混合催化剂和5—8ml浓硫酸,混匀放置过夜将开氏瓶倾斜置于电炉上,开始用小火加热,待泡沫停止后加大火力,保持开氏瓶中液体连续沸腾,沸腾的酸应在开氏瓶颈中部冷凝回流,待消煮液无微小碳粒并呈透明的浅绿色时,继续消煮30min含蛋白质高的样品,如豆类,需煮60min待消煮液稍冷却后,无损地移入100ml容量瓶中,多次用水洗涤,冷却后定容放置澄清用移液管吸取待测液
5.00或
10.00ml含NH4+—N约1mg,放入半微量定氮蒸馏装置中,加入约5ml40%的氢氧化钠进行蒸馏按同样条件,称
0.1g蔗糖代替样品做空白试验结果计算粗蛋白质%=[SXV-V0×
0.014×分取倍数〖〗W1-水分率〖SX〗]×K×100 式中V—滴定样品时所用标准酸的毫升数;V0—空白测定所用酸的毫升数;M—标准酸的摩尔浓度;0.014—氮的毫摩尔质量g/mmol;取用量倍数—本操作步骤中为100/5或100/10,即为20或10;W—称样重g;K—蛋白质的换算因数一般情况下为
6.25,这是由蛋白质平均含氮量为16%计算而得,即100/16=
6.25但由于各种作物蛋白质中含氮量不同,其换算因数也各不相同各类作物蛋白质换算因数,可见表各类作物的蛋白质换算因数作物(种子)蛋白质换算因数麦类、杂豆类水稻高粱玉米、大豆及其他谷类作物
5.
705.
955.
836.254—
3.2铜盐沉淀法测纯蛋白质 本法测定的含氮物质不包括非蛋白质物质因此通过蛋白质换算因数而得到的是纯蛋白质%试剂配制1 6%硫酸铜60gCuSO4·5H2O溶于1L水中2
1.25%氢氧化钠
12.5gNaOH溶于1L水中3 浓硫酸4 混合催化剂 称取硫酸钾或硫酸钠100g硫酸铜10g,均匀混合后研细通过
0.177mm孔径,贮于瓶中5
0.025—
0.05mol/L硫酸标准液6
0.005—
0.01mol/L硫酸标准液测定步骤称取
1.000—
2.000g经过
0.42mm孔径的风干样品,于150ml烧杯中加约50ml热水,放入40—50℃的水浴上加热10min烧杯内物质还未冷时,随即加25ml16%硫酸铜溶液,然后一边搅拌,一边缓缓注入25ml
1.25%氢氧化钠溶液如此形成的碱式硫酸铜[CuSO4·CuOH2]将使样品中的蛋白质沉淀可用石蕊试纸在烧杯中检查,溶液不应是碱性反应因为碱性反应会引起凝结的蛋白质溶解放置
0.5—1h也可放置过夜,用倾泻法过滤,即将沉淀上部液体沿玻棒倒到漏斗中,沉淀留在烧杯中用热水洗几次,而后将沉淀不损失地移至漏斗上,并继续用热水洗至滤液遇5%氯化钡不再产生硫酸钡白色沉淀为止此时间接指示非蛋白质含氮物已被洗净将带有沉淀的漏斗在50—60℃烘干,直到失去大部分水,将滤纸及内容物从漏斗上取下,并卷成筒状,毫无损失地移入250ml开氏瓶中,用量筒加入浓硫酸20—30ml,放置2h或过夜加入110硫酸铜—硫酸钾5g,倾斜置于电炉上先用小火加热,逐渐升温避免黑色物升于瓶外,直至出现白色蒸气后才可加大火力使沸腾,消煮至溶液呈透明的淡绿色,再消煮30min取下凯氏瓶,冷却,用蒸馏水将消煮液一起洗入250ml容量瓶中,冷却至室温后,用水定容、摇匀吸取5—10ml待测液用半微量法测氮含氮约
0.5—1mg用普通定氮装置时,可吸取25—50ml含氮约10—20mg测定同时作空白试验注释 所获蛋白质沉淀不必烘至过干,以免沉淀发脆,塞入开氏瓶时容易损失只须烘至将滤纸卷成筒状而无水分渗出即可表 各种作物收获物中蛋白质的含量范围千重%作物名称蛋白质%干基作物名称蛋白质%鲜基菜豆洋扁豆豌豆蚕豆大豆亚麻向日葵种仁棉花种仁花生种仁小麦黑麦大麦燕麦稻种仁玉米小米种仁高梁荞麦种仁
15.0—
30.
524.6—
34.
124.0—
34.
027.0—
35.
029.4—
50.
42.00—
30.
821.1—
30.
228.6—
42.
019.3—
30.
014.4—
24.
18.3—
19.
410.6—
20.
48.0—
17.
37.8—
14.
59.0—
13.
210.2—
21.
59.5—
15.
312.8—
19.0马铃薯冬油菜甜菜萝卜胡萝卜洋葱大蒜菠菜芹菜蕃茄茄子辣椒南瓜黄瓜甘蓝花椰菜浆果核桃高梁叶高梁茎
0.7—
2.7
1.0—
1.5
0.7—
1.4
0.6—
1.2
0.6—
1.9
1.9—
2.8
0.7
2.3
1.3—
3.6
0.3—
0.8
0.6—
1.2
0.7—
1.1
0.4—
1.0
0.5—
0.9
1.2—
2.6
2.4
0.3—
1.9
16.1—
28.9
12.4—
17.
54.0—
7.54—4 农产品中碳水化合物的分析农产品中的碳水化合物通常包括糖分、淀粉、纤维素、半纤维素以及果胶等它们都是农产品常规分析的重要项目4—
4.1糖分的分析农产品中的主要糖分有单糖葡萄糖和果糖及双糖蔗糖它们都溶于水也溶于酒精,统称水溶性糖单糖具有还原的特性,称还原糖;蔗糖不具还原性,称非还原糖但蔗糖经水解为单糖后就又具有还原性糖的还原性与测定方法有密切关系,大多数的测定方法是依据这一还原性质来定量测定它的含量的 糖分分析从分析意义来看,可分为三种
①植株中少量可溶性糖的测定,以研究植物不同生育时期体内碳、氮代谢;
②农产品水果、蔬菜中糖分含量测定,以评价其品质;
③糖用作物如甘蔗、甜菜中的糖分测定,为加工提供参考数据因此,糖分的分析,对于鉴定农产品果蔬品质,以及对于改进栽培技术和选择合适的加工、贮存条件都很必要植物组织中的水溶性糖包括葡萄糖、果糖还原糖和蔗糖非还原糖它们的测定首先须用水在80℃浸提出来,也可以用酒精浸提后者是在样品中含淀粉和蔗糖高时采用双糖须经水解转化为还原糖后再测定还原糖的测定方法很多,有重量法、容量法、比色法及旋光法等本节介绍
①容量法铜还原直接滴定法,以适用于瓜果、蔬菜等含糖量高的样品的测定铜还原直接滴定法是以标准糖滴定试剂为基准与绘制标准曲线类似,准确性较高
②蒽酮比色法,以适于植株及谷物籽粒含糖量较低的样品的测定;此法还可用于样品未经水解转化测定可溶性总糖量此法操作简便、快速、灵敏度高,因不同糖类皆可与蒽酮反应产生有色溶液,不同糖的反应产物颜色有差异以及显色强度随时间而变化,故此法准确度稍差,可作为快速测定法4— 果蔬含糖量的测定铜还原直接滴定法斐林试剂直接滴定法目的及原理测定果蔬及其加工品中糖分含量的基本原理,是根据还原糖果糖和葡萄糖可以还原斐林试剂而生成氧化铜这一特性斐林试剂由甲乙二种溶液混合而成,试剂甲为硫酸铜溶液,试剂乙为氢氧化钠与酒石酸钾钠的混合液,甲乙二液混合后,硫酸铜与氢氧化钠生成氢氧化铜沉淀CuSO4+2NaOH Na2SO4+CuOH2氢氧化铜在酒石酸钾钠存在时呈溶液状态 HO—CH—CK O—CH—COOK CaCuOH2+HO—CH—COONa O—CH—COONa+2H2O此溶液与还原糖作用,在加热滴定时即产生红色的氧化亚铜沉淀 O∥ O—CH—COOKCH2OHCHOH4C﹨H+2Cu O—CH—COONa+2H2O→CH2OHCHOH4COOH+Cu2O HOCHCOONa+O HOCHOOK滴定终点可以借有机染料次甲基蓝作指示剂来决定,次甲基蓝在碱性溶液中被过量的还原糖还原成“无色染基”,溶液的蓝色即行消失,但无色染基在常温下极易被大气中氧所氧化变成原来的蓝色,故滴定时瓶中溶液须保持沸腾状态,以免影响滴定结果蔗糖转化后,所得转化糖的重量增加,计算时应将转化糖量减去水解前还原糖量再乘以
0.95,才是实际的蔗糖量主要仪器恒温水浴锅、分析天平、酒精灯等试剂配制1斐林试剂甲溶解硫酸铜
34.639克于500ml容量瓶中,加水稀释至刻度 2斐林试剂乙溶解酒石酸钠173克或用25克甘油代替及氢氧化钠50克于500 毫升容量瓶中,加水稀释至刻度静置1—2日,用石棉过滤后备用3标准转化糖及斐林试剂的标定称取纯蔗糖
9.5克溶于50ml水中,加6mol/L盐酸5ml,在20—25℃室温下静置五天或者煮沸15分钟,使蔗糖转化,冷却后移入1000ml容量瓶中,加水稀释至刻度,再由稀释了的糖液中吸取100ml放入500ml的容量瓶中,加1%酚酞2—3滴,以6mol/L氢氧化钠溶液中和后加水稀释至刻度,即为转化糖溶液此液1ml含转化糖2毫克吸取配制的斐林试剂甲乙各5ml,混合于250ml三角瓶中,由滴定管中滴入标准转化糖液10ml,在酒精灯上加热至沸,加次甲基蓝指示剂2—3滴,再由滴定管中徐徐滴入糖液,至蓝色完全褪尽,溶液呈清亮为止,根据滴定所用转化糖毫升数,校正斐林试剂10毫升相当的转化糖克数注意全部滴定过程在沸腾状态下进行46mol/L氢氧化钠56mol/L盐酸61%次甲基蓝指示剂7中性醋酸铅8无水硫酸钠少量操作步骤样品中含糖量的测定1 样品液的配制称取切碎后的果蔬样品20克或果脯5克置研钵中磨碎,倒入250ml容量瓶中,加水稀释至刻度如果表面有气泡可以加酒精数滴以除气泡,经10—15分钟浸渍,将样品液过滤于干燥的三角瓶中备用如蛋白质含量多的样品,在定容以前加2—5ml中性醋酸铅以除蛋白质,摇动混合10分钟后加水稀释至刻度,过滤,并以无水硫酸钠1—2克以除去过量的铅盐2 还原糖的测定吸取配好的样品液50ml放于100ml容量瓶中要求每ml稀释后的样品液约含4mg的还原糖,加水稀释至刻度,混合均匀后移入滴定管中备用吸取斐林试剂甲乙各5ml,混合于三角瓶中先由滴定管中滴入样品液5—6ml,在酒精灯上加热至沸,加次甲基蓝指示剂2—3滴,继续由滴定管中徐徐滴入样品液,至蓝色褪尽,溶液呈清亮时为止,记下消耗的样品液亳升数,重复滴定三次每次相差应不超过用量的3%取其平均值用下列公式计算W=A/B×b/a×100W—100克样品中含还原糖的克数A—斐林试剂10毫升相当的还原糖克数B— 滴定时所用样品液的毫升数a— 样品的克数b— 样品稀释的总毫升数3 蔗糖的测定吸取上述配好的样品液50ml,移入100ml容量瓶中,加6mol/L的盐酸5ml置于水浴锅中煮沸10分钟,冷却后加入酚酞指示剂2—3滴,以6mol/L氢氧化钠中和,加水稀释至刻度,混合均匀倾入滴定管中,用已知斐林试剂如上法测定,并算出蔗糖含量计算公式W=S2-S1×
0.95W—100克样品含蔗糖的克数S1—水解前100克样品中含的还原糖克数S2—水解后100克样品中含的转化糖克数4 总糖含量%=蔗糖%+还原糖%4— 作物可溶性糖的测定蒽酮比色法测定意义可溶性糖主要是单糖,即葡萄糖和果糖也称还原糖和双糖即蔗糖也称非还原糖组成,它是植物体内一种重要的碳水化合物,在一般植物及植物产品中,测定其含量多少,不仅能反映作物的生长状况,而且还能反映其品质因此在植物分析中进行可溶性糖的测定颇为重要测定原理糖类遇硫酸即脱水成为羟醛类 H HHOC COH CH—CH 脱水 H2C CH—CH HC C—CHO+3H2O O OH OH 然后,蒽酮与糖醛脱水、缩合,形成糖醛衍生物,呈蓝色,蓝色的深浅,可做为定量的标准 H H O C—C O +HC C—CHO O CH— CH2OH O试剂配制1准确称取
1.000g葡萄糖溶于1升容量瓶中,此清液为1000mg/L,从此液中吸取
0、
1、
2、
4、
6、
8、10毫升注入100毫升容量瓶中,用蒸馏水稀释至刻度,摇匀,此溶液即
0、
10、
20、
40、
60、
80、100mg/L糖溶液,分别吸取系列标准糖液各2ml分别注入7个比色管中,按照试样测定的方法进行处理并比色,以横坐标表示不同的糖浓度,纵坐标表示光度计的相应光密度绘出葡萄糖的标准曲线2蒽酮溶液称取01克蒽酮溶于100毫升72%的硫酸中,每100毫升01%蒽酮溶液硫酸含量为比重184的浓硫酸74毫升此试剂需新鲜配制,若在100毫升蒽酮试剂中加1克硫脲,则可以延长保存时间至一个月测定步骤1提取精确称取经磨细的干样品100毫克,置于一个15毫升的离心管中,加入10毫升80%酒精,在管口上盖一个塞子,保持在80~85℃热水浴内,30分钟,取出离心,把上层清液轻轻移至一个50毫升烧杯中,照此法对残渣重复提取2次,以使可溶性糖提取完全 把上述酒精提取液置于80~85℃水浴上,使酒精蒸发,直到剩下3毫升液体为止而后用蒸馏水定容至25毫升作为可溶性糖的提取液2测定吸取5毫升的糖提取液至一个25毫升容量瓶中,用蒸馏水定容,取2毫升此稀释的糖提取液至一个具有塞的比色管中,然后,沿管壁缓缓注入蒽酮试剂10毫升,加完后立即摇动半分钟,放入沸水浴中加热10分钟,取出后放入冷水中迅速冷却,待10分钟后,使之显色稳定,于620nm波长光源下进行比色,测得光密度结果计算根据光密度读数,自标准曲线上查出含糖量mg/L,然后,代入下列公式中计算可溶性糖%克/100克干样=mg/L×25×25/5×10-6/样品重×100注意1不经分离而分别测定葡萄糖、果糖和蔗糖的蒽酮比色法基于以下两点
1.在50℃下葡萄糖与蒽酮不显色,在此温度下果糖显色3分钟的消光度与果糖在100℃显色35分钟的消光度几乎相等;
2.稀碱与糖溶液共热时,可破坏葡萄糖和果糖,蔗糖不被破坏,因此,在不同温度不同条件下不同糖标准工作液的操作下,可以分别测出水溶性总糖、蔗糖、果糖和葡萄糖的含量2反应温度、显色时间、试剂和溶液初始温度均影响其显色状况,操作欠慎易引起误差4—
4.2淀粉的测定淀粉是由葡萄糖聚合成的高分子化合物淀粉在酶或酸的作用下又水解成葡萄糖,这是淀粉经酶或酸水解后测定还原糖计算淀粉含量的理论基础另外淀粉经分散和酸解后具有一定的旋光性,则是旋光法测定淀粉含量的基础另外测定薯类淀粉可用比重法本节介绍经典的酸水解与酶水解后测总还原糖的方法4—谷物中淀粉的测定含多量淀粉样品的测定HCl水解一铜还原直接滴定法原理淀粉在稀酸1%HCl的作用下,水解为糊精和麦芽糖,最后都转化成葡萄糖C6H10O5n+nH2O→nC6H12O6淀粉 葡萄糖然后用测定还原糖法测定葡萄糖,再乘上换算系数09即为淀粉含量根据反应式淀粉与葡萄糖之比为
162.
1180.12=
0.91即为
0.9克淀粉水解后可得1克葡萄糖此法优点是分析步骤简单,沸水浴中水解时间约3—4小时完成,所以采用较普遍但其缺点是在酸水解淀粉的同时,谷物中的半纤维素和多缩戊糖也随之水解,这使测定结果产生正误差主要仪器恒温水浴锅、电热烘箱试剂11%HCl:23ml浓HCl二级加水至1L210%NaOH310%中性醋酸铅称取100gPbOAC2溶于1L水中,过滤4甲基红指示剂5I2—KI溶液称取2gKI溶于5ml水中,加入1gI2加水至1L保存于棕色瓶中其余同4—操作步骤称取风干磨细通过60目筛的样品,
1.××××—
2.××××g如系含脂肪高的样品须先脱脂,放入250ml三角瓶中,加入1%HCl150ml,用具有长玻璃管的塞子塞紧注1,在沸水浴中加热也可放入105℃烘箱中代替,加热过程中须常常摇动,并注意三角瓶的液面浸入沸水中,同时切勿使三角瓶直接接触水浴锅底,以免跳动或样品焦化经3—4小时后,取出试样少许,检查是否水解完毕具体作法如下用玻璃棒或皮头吸管吸少许带固体颗粒的悬液,放在白瓷板上,加1滴I2—KI溶液,如固体不显蓝色、红色或紫色说明水解已完毕所取溶液须无损地倒回三角瓶中,并用少量水冲洗,洗液全部收集在三角瓶中也可于玻片上在低倍显微镜下观察颜色如水解不完全,应继续加热半小时后再进行检查,直到水解完全为止水解结束后,冷至室温,加入甲基红3—4滴,用10%NaOH中和至微黄色为度注2然后逐滴加入10%中性PbOAC2约5—10ml,以沉淀蛋白质静置片刻,待上部溶液澄清后,再加入几滴PbOAC2溶液,检查蛋白质是否沉淀完全继续滴加PbOAC2溶液直至无白色絮状沉淀产生为止注3将水解液过滤入250ml容量瓶中,用水洗涤三角瓶和沉淀数次,滤液全部收集于容量瓶中,加水定容用吸管吸取50ml清液于100ml容量瓶中,逐滴加入5—7ml饱和Na2SO4溶液以除去过量的醋酸铅注4,至不再产生白色PbSO4沉淀为止,加水定容后过滤此即由淀粉水解而得到的葡萄糖溶液然后将此淀粉水解完毕的葡萄糖待测液装入50ml滴定管中,按4—操作步骤测定还原糖的含量结果计算淀粉,%=测得葡萄糖mg×分取倍数/样品重mg×
0.9×100式中
0.9—淀粉单元的式量为
162.1,葡萄糖的分子量为
180.1,两者之比为
0.9,分取倍数一此操作中为250/50×100=500注释[注1]在沸水浴上加热时用具有长约50—60mm玻管的塞子塞三角瓶,为使溶液浓度在加热程中不致改变,加热蒸发的水,可由空气冷凝后滴回瓶中[注2]此处注意勿加入过量的碱,因单糖在碱性溶液中易分解且在加入PbOAC2沉淀蛋白质时会形成糖的铅盐沉淀[注3]注意在近中性溶液中,也可能产生氢氧化铅的白色沉淀,必须与微带黄色或白色的絮状、较轻,悬浮在溶液中的蛋白质沉淀区分开PbOAC2沉淀较细、较重,能迅速地沉淀下来[注4]过量的PbOAC2对下步测定有碍,必须除去但如不立即测定还原糖,则可暂不除去铅,因为铅离子可以防腐4—酶水解法一适用范围 适于样品中含半纤维素及一些五碳聚糖高的样品,如草本植物牧草等的茎、叶中有较多的半纤维素;种子的淀粉含量虽高,但也有些五碳聚糖可被酸水解若须取得精确结果,最好采用酶水解法淀粉酶有严格的选择性,它只水解淀粉而不水解其它成分酶将淀粉先水解为麦芽糖及糊精,最后也都水解成葡萄糖测定所得葡萄糖量,就可计算淀粉含量试剂配制120%NaOH2甲苯3淀粉酶420~25%HCl浓HCl696ml加水至1L5磷酸盐缓冲溶液
11.876gNa2HPO4溶液300ml与KH2PO4700ml混合即可测定步骤称取风干磨细并通过60目筛的样品
1.000—
2.000g于250ml三角瓶中加少量冷水使样品湿润,迅速加入约100ml热水,并置于沸水浴中加热1h,使淀粉完全胶化,胶化时淀粉的外膜破裂,水能透入淀粉粒的内部,这时淀糖溶解,淀胶膨胀,形成浆状溶液 1h后取出三角瓶,冷却至约50~55℃加入
0.03—
0.05g淀粉酶此淀粉酶须事先加3—5ml水用玻棒研磨然后再加入,使它容易与溶液混合;否则淀粉酶干粉可能粘于三角瓶的内壁,或在液面上形成小块,从而减弱了淀粉酶的作用加入淀粉酶后,立即加入磷酸盐缓冲液10ml,甲苯5滴,用软木塞紧,然后将三角瓶放置于45~55℃
①恒温箱中保温2昼夜或更长
②保温2昼夜后,将溶液冷却,洗入250ml容量瓶中,加水至刻度,混匀后过滤取滤液100ml至250ml三角瓶中,加入20%HCl
③10ml放入沸水浴中3小时,塞以带有空气冷凝管的塞子,使淀粉水解生成的糊精和麦芽糖再经酶水解为葡萄糖3小时后将内容物放冷,用20%NaOH约需10ml中和至红色石蕊试纸变蓝色为止若工作需延至次日测糖,则溶液暂勿中和,以防止微生物作用将已中和的糖液洗入250ml容量瓶中,用水定容,过滤得清液,即可测定其中还原糖量测定步骤按4—进行 结果计算淀粉%=还原糖mg×取用量倍数/样品重mg、×
0.9×100注释
①加入淀粉酶时,若三角瓶内溶液温度高于55℃,若到70—75℃,酶活性将大大降低,或将完全失去作用因此保温温度必须严格控制于45—55℃
②酶水解保温时间因样品种类而异有的样品如马铃薯淀粉的酶水解可延至5昼夜
③糖化后的滤液100ml加入20%HCl10ml,为使溶液最后达2%HCl酸度,也可用其它浓度如25%HCl调节 4—
4.3植物中粗纤维的测定酸碱洗涤重量法纤维是植物细胞壁的主要成分,常与木质素、半纤维素、果胶物质等伴生同淀粉一样,纤维也是由葡萄糖聚合而成,但纤维素中的葡萄糖由β—1,4糖苷键连接,纤维素分子内和分子间都可形成氢键,因此它的理化性质较稳定测定纤维素的洗涤法就是根据其化学性质稳定而用酸碱或洗涤剂将样品中的其他成分如淀粉、蛋白质等除去后而用重量法测定的酸碱洗涤法测定纤维时,尚有部分木质素、半纤维素等留在纤维素中,另外纤维素本身也受到一定损失,因此将测定值称为“粗纤维含量”用酸性洗涤剂的重量法测定时,所得的“酸性洗涤纤维”ADF包括了全部纤维素和木质素,因此通常测定结果比酸碱洗涤重量法高对食品和饲料而言,粗纤维是泛指食物中不被消化、分解和吸收的部分因此酸性洗涤剂法的测定结果更有意义本实验介绍酸碱洗涤重量法,该法系谷物籽粒
1986、饲料1987和水果、蔬菜1989粗纤维测定的国家标准方法原理样品相继与一定浓度的酸碱共煮一定时间,并分别经过滤分离,洗涤残留物等操作酸可将糖、淀粉、果胶物质和部分半纤维素水解而除去碱能溶解蛋白质、部分半纤维素、木质素和皂化脂肪酸而将其除去残渣再经乙醚、乙醇处理后,所得残渣干燥后减去灰分质量即为粗纤维含量试剂
11.25%硫酸溶液[C1/2H2SO4=
0.255±
0.005mol/L]溶液浓度须经标定
21.25%氢氧化钠溶液[CNaOH=
0.313±
0.005mol/L]溶液浓度须经标定395%乙醇化学纯4无水乙醚化学纯5石棉 将中等长度的酸洗石棉铺于蒸发器皿中,放在600℃马福炉中灼烧16h后,加入
1.25%H2SO4沸煮30min,过滤,洗净酸,同样加
1.25%NaOH煮沸30min,过滤,用
1.25%H2SO4洗一次,再用水洗净,烘干后于600℃马福炉中灼烧2h石棉用后可回收再用 操作步骤称取2—3g风干样[称准至
0.0002g、
0.84mm20目]于500ml带有冷凝器的高形杯或三角瓶中
①若样品水分含量高,将称样于80℃烘箱中干燥蒸发掉大部分水分,若脂肪>1%时,用乙醚多次浸泡,最后除去乙醚加入沸腾的
1.25%H2SO4溶液200ml
②装上冷凝器,立即加热,使其在1—2min内微沸,准确微沸30±1min后停止加热,将扎有200目尼龙筛绢的抽滤管插入试样液中,在10min内抽尽酸液,再用热水洗涤残渣至溶液呈中性蓝石蕊不变色后抽净洗液用沸腾的
1.25%NaOH溶液将抽滤管尼龙筛绢上的残渣冲洗入烧杯,加入
1.25%NaOH溶液200ml,装上冷凝器立即加热,使其在1—2min内微沸,微沸30min,停止加热,同上法在10min内抽去碱液并用热水洗涤残渣至溶液呈中性红色石蕊不变色后抽净洗液残渣用水冲洗到烧杯内,并转移到铺有石棉的古氏坩埚中,在抽滤瓶上抽尽水分,用95%乙醇洗三次,每次约20ml,再用乙醚洗三次,每次20ml脱脂样品不用乙醚再洗将装有纤维的古氏坩埚于130℃下干燥2h,在干燥器中冷却约30min至室温后称量m1,将坩埚在600℃马福炉内灼烧30min,同上冷却后称量m2结果计算粗纤维%=m1-m2100/m0式中m1—古氏坩埚+粗纤维+残渣中灰分gm2—古氏坩埚+残渣中灰分gm0—干样质量扣除水分后的样重量g注释1为了保持酸、碱浓度加热过程不致因水分蒸发而增加,应用带有冷凝球的烧杯或冷凝管的三角瓶来加热2如果溶液微沸时起泡较多,可预先加入几滴消泡剂如正辛醇等4—5 植物中粗脂肪的测定 脂肪是各种脂肪酸的甘油三酸脂,植物中脂肪是各种甘油三酸脂的混合物虽然各种脂肪酸的不饱和性,碳链长短以及结构等不相同,但其共同点是不溶于水而易溶于许多有机溶剂中因此可用有机溶剂乙醚沸点
34.5℃或石油醚沸程为30—60℃等用试样的失重残余法来测定脂肪含量浸提时除脂肪外还包括一些类脂如脂肪酸、磷脂,糖脂以及脂溶性色素和维生素等,故称为“粗脂肪”本实验除了介绍谷物、油料作物种子1983和饲料1987中粗脂肪测定的国家标准油重法使用索氏浸提器外,还介绍了适用于大批样同时测定的残余法4—
5.1油重法索氏提取法原理油重法的原理是将样品置索氏脂肪抽提器中,反复经乙醚或其他脂溶剂抽提,使脂肪完全溶解于溶剂中,然后加热除去溶剂,称重,即可算出样品中粗脂肪百分含量由于样品中类脂物质亦溶解于此溶剂中,故称粗脂肪含量,也是国际标准推荐法,仲裁时以此油重法为准本法所得结果准确、稳定,其缺点是费时,一般须10小时以上,而且一套仪器只能测定一个样品,不适于大批样品的分析最近瑞典Tecator公司设计的密闭式抽提器,已可大大提高效率,但仪器较昂贵主要仪器1分析天平感量
0.0001g2粉碎机、研钵、切片机3电热式恒温水浴6或8孔式4烘箱5滤纸筒直径22mm长100mm6装有变色硅胶的干燥器索氏脂肪抽提器或Tecator公司产脂肪抽提器试剂无水乙醚化学纯操作步骤1样品的选取和制备选取有代表性的油料种子,拣出杂质,按四分法缩减取样小粒种子,如芝麻、油菜等,取样量不得少于25g;大粒种子如大豆、花生仁等,取样量不得少于30g大豆经105±2℃烘干1小时后取出,放入干燥器内冷却至室温粉碎,并通过40目筛;花生仁切碎带壳油料种子,如花生果,蓖麻籽,向日葵籽等,需将壳与籽粒分开,分别称量,计算出仁率然后测定籽粒的油分制备完毕,立即混合均匀,装入磨口瓶中备用2研磨与称样称取备用样品2—4g两份,含油
0.7—
1.0g,准确至
0.001g置105±2℃烘箱中干燥1小时,取出,放入干燥器内冷却至室温同时测试样的水分将试样在研钵内研细,必要时加适量纯石英砂研磨,用牛角勺将研细的试样移入已干燥的滤纸筒,取少量脱脂棉蘸乙醚擦净研钵、研杆和牛角勺上的样品和油迹,一并投入滤纸筒内大豆已预先烘干粉碎可直接称样装筒,在试样面层塞以脱脂棉,以防样品损失,将滤纸筒投入抽提管内每个抽提器只放一个单样3在装有2—3粒浮石并已烘至恒重的洁净的抽提瓶内,加入约瓶体积1/2的无水乙醚,把抽提器各部分连接起来,连接好冷凝水流,调节水浴温度,使冷凝下滴的乙醚速度180滴/分水浴温度约在55℃以下注谷物、大豆样品抽提8小时,一般油料抽提10小时,有些含油量很高的油料种子,应延长抽提时间,直到抽提管内的乙醚用滤纸试验无油迹时为止4抽提完毕后,从抽提管中取出滤纸筒,再连接好抽提器,在水浴上蒸馏回收抽取瓶中的乙醚然后取出抽提瓶,在沸水浴上蒸去残余的乙醚5将盛有粗脂肪的抽提瓶放入105±2℃烘箱中烘干1小时,放入干燥器中冷却至室温约45—60分钟后称重,准确至
0.0001g,再烘30分钟,冷却、称重,直至恒重抽提瓶增加的重量即为粗脂肪的重量抽出的油应是清亮的,否则应重做结果计算粗脂肪%干基=粗脂肪重g/试样重g×100带壳的油料种子粗脂肪%=子仁粗脂肪×出仁率%平行测定的结果用算术平均值表示,保留小数点后两位平行测定结果的相对误差大豆不得大于2%,油料作物种子不得大于1%注释注一般条件下只用45—50℃,120滴/分比较安全4—
5.2残余法原理 残余法是基于样品经溶剂反复抽提后,使全部脂肪除去,再从样品剩余的残渣量计算出粗脂肪含量主要仪器1索氏型脂肪抽提器2样品筛20目、40目各一个3称样瓶直径
3.5cm,高7cm4培养皿直径11—13cm5滤纸中速或慢速6乳胶手套或白纱手套其他仪器与试剂同上节4—
5.1操作步骤1样品的选取和制备选取具有代表性的谷物或油料种子,拣出杂质,按四分法缩减取样小粒种子如油菜、芝麻等取样量不得少于10g;大粒种子,如大豆、花生仁等取样量不得少于15g;谷物种子取样量不少于5g将样品预先在80℃烘箱中干燥约2小时,以便制备样品谷类、大豆、油沙豆经粉碎后,95%通过40目筛;油菜籽、胡麻籽、红花种子经粉碎后,95%通过20目筛;花生仁、蓖麻仁等用切片或小刀切成
0.5mm以下薄片芝麻用碾磨机或研钵细心磨碎,注意不要留有整粒,向日葵种子经剥壳后,子仁粉碎至均匀粉状样品处理完毕,立即混合均匀,装入磨口瓶中备用2将滤纸裁成7×7cm大小谷类可增大些,并叠成一端不封口的纸包如图,用铅笔编号码,顺序排列在培养皿中,每皿10—20包,然后将放好滤纸包的培养皿放入105℃±2℃烘箱中干燥2小时,取出放入干燥器中冷却至室温,分别将各包放入同一个称量瓶中称重a注13用牛角勺将已制备好的样品小心地装入滤纸包中注2,谷物3—5g,油料1g左右,封上包口,并按原顺序号排列在培养皿中,放入105±2℃烘箱中,干燥3小时,然后放入干燥器中冷却至室温,分别将各包在原称量瓶中称量b,两次称重之差即为试样残渣重注34抽提将样品包有顺序地装入抽提筒中,抽筒内最多放40包倒入无水之醚注4,使超过样品高度,连接好抽提器各部分,先浸泡一夜次日,将浸泡后的乙醚放入抽提瓶中,并在提提瓶中放入几粒玻璃或浮石,然后重新倒入无水乙醚入抽提筒,使其完全浸泡样品,连接好抽提器的各部分,接通冷凝水,水浴锅加温进行抽提,调节水浴温度使其冷凝下滴至乙醚呈连珠状乙醚回流量可为每分钟20ml,水浴温度可在55℃以下一般如此须抽提6—8小时,抽提时的室温以15—25℃为宜,不同油料种子抽提时间见附表抽提完毕,放出抽提筒中的乙醚,取出样包,放在毒气厨内通风凉干,使乙醚挥发附表不同油料种子的提提时间油 料 名 称 提提时间小时浸泡过夜未浸泡过夜谷物、大豆、油沙豆蓖麻、油菜、红花、芝麻、花生、向日葵、胡麻 68810注〖WB〗平行测定的结果用算术平均值表示,保留小数点后二位数字平等测定结果的相对相差,谷物不得高于5%,大豆不得高于2%,油料不得高于
1.5%5将样品按原顺序排列在培养皿中,放入105℃±2°烘箱中干燥3小时,取出放入干燥器冷却至室温,再将各包在原称量瓶中称重C,这次称重与第二次称重之差即为粗脂肪重结果计算粗脂肪干基=b-c[]b-a[SX]]×100a— 为称量瓶+滤纸重g;b— 为称量瓶+滤纸重+烘干样重g;c— 为称量瓶+滤纸重+抽提后残渣重g;注释注1全部操作过程须戴乳胶手套或白纱手套,称量瓶要用纱或绸布擦净内外的灰尘及纤维等,并须经常校正重量,使其重量误差限制在0001g之内注2油重法也可用滤纸包代替滤纸筒3称量时,室内相对湿度应在70%以下,每个干燥器内只装一盘样品注4乙醚在空气中易吸氧并形成过氧化物,它很不稳定,可因受热如乙醚蒸馏或蒸发时震动而发生爆炸,故使用乙醚须十分小心注意
①切不可明火加热,不得接近任何火源,实验室保持良好通风
②使用之前,应检查乙醚中过氧化物是否存在,若有应除去
③乙醚应装在棕色瓶中,尽量装满附关于使用乙醚的注意事项
1.乙醚中过氧化物的检查用碘化钾法试验乙醚中过氧化物,可将10ml乙醚装入具塞的无色玻璃量筒中,加1ml新配制的10%KI溶液,在没有直射阳光下,对着白色背景从横断方向观察,两层均应无色另取9ml乙醚加入1ml饱和KI溶液,振摇,如醚层出现黄色,则其中含有00005%的过氧化物,则应经处理才能使用2乙醚中过氧化物阻化、抑制与除去贮存乙醚时,可加入阻化剂以阻止其氧化,如使乙醚与活性碳或活性氧化铝保持接触,可以防止贮存中的乙醚发生爆炸;或在100ml乙醚中加
0.0001g苯三酚,可阻止过氧化物的形成达两年之久除去过氧化物可将500ml乙醚放入1L分液漏斗中,加入15ml20%硫酸亚铁铵溶液,5ml1:1硫酸,8ml蒸馏水,振动数分钟,分层后弃去水,相同法再洗1—2次,直至过氧化物除尽为止,最后用蒸馏水每次100ml洗涤两次,将洗好的乙醚放至带磨口塞的棕色瓶中,加无水氯化钙过夜,次日蒸馏收集馏出液除去乙醚中过氧化物试剂,常用的还有硫酸亚铁、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、氯化亚锡、锌与酸、钠与醇、铜与锌,高锰酸钾,氢氧化银和二氧化铅等 附加装置图,滤纸折叠方法 索氏脂肪抽提器 残余法滤纸包折叠方法 a.烧瓶b.浸提器c.冷凝器 4—6 植物中维生素C的测定2%草酸浸提—2,6二氯靛酚滴定法 维生素C又称抗坏血酸,天然抗坏血酸有还原型和脱氢型两种,它们都具有生物活性,同属于有效维生素C脱氢型抗坏血酸容易发生内脂环水解而生成没有生物活性的二酮基古罗糖酸还原型和脱氢型抗坏血酸以及二酮基古罗糖的合计称为总维生素C
①维生素C的测定方法很多,常用的化学方法有测定还原型抗坏血酸“2,6—二氯靛酚滴定法”以及测定总维生素C的“2,4—二硝基苯肼吸光光度法”、“荧光光度法”等本实验介绍2%草酸浸提—2,6—二氯靛酚滴定法方法原理样品中的维生素C虽易溶于水,但需用酸性浸提剂2%草酸或偏磷酸来浸提,以防还原型抗坏血酸被空气中的氧所氧化
②浸出液中的还原型抗坏血酸可用2,6—二氯靛酚滴定法测定2,6—二氯靛酚是一种染料,其颜色随氧化还原状态和介质的酸碱度而异氧化态在碱性介质中呈蓝色,在酸性介质中呈浅红色;而还原态在酸或碱性介质中均无色还原型抗坏血酸分子结构中有稀醇结构—CO—CO—,因此,具有还原性,能将2,6—二氯靛酚氧化态还原成无色化合物,而还原型抗坏血酸则被氧化成脱氢型抗坏血酸
③ 根据上述性质,可用2,6—二氯靛酚氧化态的碱性溶液蓝色标准溶液滴定酸性浸出液中的还原型抗坏血酸,至溶液刚变成浅红色刚过量的未被还原的2,6—二氯靛酚在酸性介质中颜色本法操作手续简便,快速,适用于果品,蔬菜及其加工制品中还原型抗坏血酸的测定,不包括脱氢抗坏血酸样品中如含有Fe2+Sn2+Cu2+SO2-3,S2O2-3等还原性杂质,则对测定有干扰本法的目测滴定法只适用于浅色待测液本实验介绍目测滴定法试剂12%草酸溶液
④20g草酸H2C2O4·2H2O,化学纯溶于1L水中,贮存于避光处
⑤; 22,6—二氯靛酚溶液
⑥称取NaHCO3分析纯
0.052g溶解在200ml水中,然后称取2,6—二氯靛酚2,6—二氯酚—吲哚酚钠盐,NaOC6H4NC6H2OCl
20.050g溶解于温热<40℃=的上述NaHCO3溶液中冷却后定容至250ml,过滤至棕色瓶内,保存在冰箱中,每次使用前,用抗坏血酸标定其滴定度;3抗坏血酸标准溶液[CC6H8O6=
0.05mg/ml]
0.0250g抗坏血酸
⑦溶于2%草酸中,用2%草酸定容500ml应现配现用;4白陶土高岭土操作步骤
1.2,6—二氯靛酚溶液的标定吸取含抗坏血酸
0.05mg/ml的标准溶液
2.00mlV于50ml三角瓶中,加入8ml2%草酸溶液用2,6—二氯靛酚溶液滴定,直至溶液呈粉红色15秒不褪色为止V1同时做空白实验,即用2,6—二氯靛酚溶液滴定10ml2%草酸溶液V0,以检查草酸中的还原性杂质量一般V0<
0.08~
0.1ml=
2.样品的测定
⑧称取具有代表性的样品1000g放入组织捣碎机中,加入100ml2%草酸溶液迅速捣成匀浆
⑨在小烧杯中称取
10.0—
40.0g浆状样品,用2%草酸溶液将样品移入100ml容量瓶中,并用草酸定容如有泡沫可加入1—2滴正辛醇,摇匀过滤若滤液有色,可按每克样品加
0.4g白陶土脱色,再次过滤吸取滤液
10.00mlVc含量高的样品应相应减少吸样量于50ml三角瓶,用已标定过的2,6—二氯靛酚溶液滴定,直至溶液呈粉红色15秒不褪色为止⑩结果计算T=c×V/V1-V0维生素C mg/100g=[V2-V0×T/m]×100式中T—2,6—二氯靛酚滴定剂的滴定度,mg/ml;c—抗坏血酸标准溶液浓度,mg/ml; V—吸取抗坏血酸标准液体积,ml;V1—滴定抗坏血酸标准液所消耗的滴定体积,ml;V0—滴定空白液所消耗的滴定剂体积,ml;V2—滴定试样液所消耗的滴定剂体积,ml;m—滴定时所吸取的滤液相当于样品的质量,g注释
①有些资料中的总维生素C或维生素C总量是指有效维生素C;
②还原型抗坏血酸易受氧化酶作用而被空气中的氧所氧化,很不稳定酸性浸提剂能抑制酶的活性,减少还原型抗坏血酸的氧化;
③反应式如下反应式区域 反应式区域
④也可用2%m/v偏磷酸为浸提剂偏磷酸不稳定,切勿加热;
⑤草酸溶液不应曝置于日光下,以免产生过氧化物当有催化剂如Cu2+存在时,过氧化物能破坏抗坏血酸;
⑥干燥的2,6—二氯靛酚试剂或其溶液长久贮存,有时含有分解产物,已不适用于维生素C的测定因此,使用前应进行检查检查方法取15ml2,6—二氯靛酚溶液加入过量坏血酸溶液溶于2%草酸溶液中,若还原后的溶液有颜色,表示此试剂已不能使用;
⑦抗坏血酸的纯度为
99.5%以上,如试剂发黄则弃去不用;
⑧还原型抗坏血酸容易氧化,在制备浸出液和测定时应尽量缩短操作时间,避免和铁、铜等金属接触,因为微量的铁,特别是铜,会促使抗坏血酸的破坏
⑨样品含水量少时可增加样液比为12或13,无组织捣碎机时可将样品
5.××~
20.××g放于瓷研钵中,加入适量纯石英砂和2%草酸溶液在研钵中研磨至浆状,全部移入100ml容量瓶中定容石英砂须先用1:1HCl浸泡2小时,然后用水洗至无Cl-后使用⑩样品中可能有其它还原性杂质也能使2,6—二氯靛酚还原,但一般杂质还原的速度较慢,故滴定维生素C的终点定为浅红色在15秒钟内不褪色为准附表水果和蔬菜中维生素C的含量(每100克样品所含毫克数)水果维生素C蔬菜维生素C苹果5—50马铃薯6—17梨3—17萝 卜20甜橙40—66四季豆10—29杏3—10胡椒成熟的117—275李0—7南瓜
2.5—15樱桃13—20黄瓜5—18葡萄
0.4—12西红柿20—40西瓜5—10菠菜16—50 4—7 农产品酸度的测定测定酸度的意义农产品中的有机酸影响产品的香味、颜色,稳定性和质量的好坏,有机酸是果蔬所固有的,有的是外加的,有的是发酵或其他加工操作不正常造成的有机酸在果蔬中的相对含量,因其成熟度和生长条件不同而异如葡萄在未成熟期所含的酸主要是苹果酸,随着果实的成熟,苹果酸的含量减少,而酒石酸含量增加,最后酒石酸变成酒石酸钾,测定果蔬的酸度和糖的相对含量的比值,能判断果蔬的成熟度如柑桔类水果的糖酸比,已用于判断柑桔的成熟度酸味强度随着氢离子浓度不同而转移,阴离子及未离解的分子对于酸味的形成亦有影响,果实的口味品质决定于糖、酸和单宁之间的不同配比因此,所造成的味感是复合的但是,食品中的酸量减少就能增加其甜度pH值和总酸一样可以影响水果产品的质量指标,对于果冻和另外一些别的制品,pH值可以影响沉降速率或糖—酸—果胶制品的胶凝度,调节牛奶的pH值,可把酪蛋白从牛乳中分离出来,酸不仅能改进许多水果制品的味感,而且影响它们的营养价值这是由于酸在维持人体的酸碱平衡方面起显著作用水果发酵制品酒的挥发酸含量是质量好坏的一个重要指标,含有
0.1%以上的醋酸则说明制品腐败,牛乳及其制品、番茄制品、啤酒等含乳酸高时,说明这些制品已由乳酸菌而产生腐败,水果制品中有游离的半乳糖醛酸时,说明受到霉烂水果的污染从成熟的种子和果实制得的油脂,或从新鲜的动物脂肪制得的油脂,常是中性的,不含游离脂肪酸但是,在各种植物和动物组织中都含有酶,其中主要是脂肪酶,这种脂酶会使油脂水解而产生游离脂肪酸如供制备的油脂种子和果实不成熟或已开始发芽霉烂动物脂肪不新鲜,则所得油脂中常会含有游离脂肪酸油脂的游离脂肪酸含量的多少,是品质好坏和精炼程度的重要指标之一,食用和工业用油脂一般都要求游离脂肪酸含量要低,常以酸价来表示游离脂肪酸的含量果蔬及某些食品中常见的是有机酸有机酸是蔬菜和果实的特有成份,它的存在增加果蔬酸味,果蔬中含有的酸种类很多—有机酸、无机酸、酸式盐以及某些酸性有机化合物如单宁、蛋白质水解产物和果胶质分解产物等通常无机酸呈中性盐化合物态存在于果实蔬菜中,而有机酸部分呈游离态,部分呈酸式盐状态存在于果实蔬菜中果实蔬菜中含有有机酸主要是苹果酸、柠檬酸和酒石酸,通常称为果酸此外,还含有少量的草酸、鞣酸、苯甲酸、醋酸和蚁酸等果蔬中有机酸含量,变化幅度很大这些变动决定于品种、成熟度、气候条件及其它因素其它食品的含酸量决定于原料种类,质量配方如对醋渍制品及工艺过程酸性腌制品等 果蔬含酸量通常以主要的酸量表示4—
7.1 总酸度测定滴定法果汁具有酸性反应,这些反应决定于游离状态的酸以及酸式盐存在的数量酸度可分为1酸度或称有效酸度是指溶液中氢离子浓度,正确地说是指氢离子的浓度,常用pH值表示,可用酸度计测量出来2总酸度,包括未离解的酸的浓度和已离解的酸的浓度酸的浓度以当量浓度表示时,称为总浓度其大小可借滴定法来确定用滴定法测定总酸度,可以归纳为将样品直接滴定,或是将样品用水浸渍后,在不断的摇动下滴定其滤液对于样品与浸出用水之间的数量比例及浸出方法和滴定法,均应加以审慎的选择,为使误差不超过允许范围,滴定时用去的
0.1mol/L碱液就不得小于3ml,在选取滴定所需要滤液的体积时,这一因素也应加以考虑测定总酸度时如是水溶液则用酚酞为指示剂,需将CO2除去,较好的方法是向10ml样品试液中加200—300ml中性刚煮沸的蒸馏水具体测定方法如下一试剂1氢氧化钠标准溶液
0.1mol/L 2酚酞指示剂1%乙醇溶液测定步骤在小烧杯内取粉碎并混合均匀的试样约25克准确至
0.01g用150ml蒸馏水将样品移至250ml量瓶中,在75~80℃的水浴上加热半小时,冷却,加水至刻度,以干燥滤纸及漏斗过滤,用移液管吸取滤液50ml,注入锥形瓶中,加入酚酞3~5滴,用
0.1mol/L氢氧化钠标准溶液滴定至刚到浅红色为止三计算x%=M×V×K×5/W×100式中,x—总酸度百分含量V—滴定时消耗NaOH亳升数M—NaOH溶液的摩尔浓度W—样品重量K—换算为适当酸之系数苹果酸…………
0.06醋 酸…………
0.060酒石酸…………
0.075柠檬酸一分子水…………
0.070乳 酸…………
0.090分析葡萄时用酒石酸表示,分析柑桔类果实和越桔科浆果时按柠檬酸计算,分析仁果、核果类及大部分浆果类时按苹果酸计算用碱液直接滴定混浊溶液及深色溶液的总酸度,将产生很大的误差,可用电位法测定全部过程中所用蒸馏水均需新煮沸后并冷却之水附表新鲜果蔬中可溶性酸的含量以苹果酸计名称总酸量(温基%名称总酸量(温基%名称总酸量(温基%苹果
0.19—
1.64樱桃
1.46—
2.16葱
0.05—
0.1梨
0.10—
0.79葡萄
0.31—
1.36蕃茄
0.28—
0.49山楂
0.61—
0.63草莓
1.15—
1.57西瓜
0.038—
0.067李子
0.39—
1.73橙子
0.42—
2.55南瓜
0.03—
0.10梅
0.49—
1.36桔子
0.44—
0.74甜瓜
0.05—
0.09桃子
0.28—
1.51柠檬
5.74—
8.33 杏子
0.75—
2.50白菜
0.09—
0.33 4—8 氨基酸总量测定蛋白质经水解或酶解可由大分子变成小的蛋白质成分,如水解后的产物经月示、胨、肽等最后变成为氨基酸,氨基酸是构成蛋白质最基本的物质水解后的蛋白质和水解前的蛋白质在物理特性、化学结构以及被吸收消化的程度上是很不相同的,其差别与水解的程度有密切关系,分析氨基酸的含量就可以知道水解的程度,也就可以评价食品的营养价值氨基酸不是单纯的一种物质,用氨基酸分析仪可直接测定出17种氨基酸仪器价格昂贵,不能普便使用,很多氨基酸可以同时存在于一种食品中,所以需要测定总的氨基酸量它们不能以氨基酸的百分率来表示,只能以氨基酸中所含的氨氨基酸态氮的百分率来表示当然,如果食品中只含有一种氨基酸,如味精中的谷氨酸,就可以从氮量计算出氨基酸的含量在评价蛋白质的营养价值时,除了测定蛋白质的含量,氨基酸氮量,还需要对各种氨基酸进行分离、鉴定,尤其对8种人体必需氨基酸进行定性定量分析4—
8.1 单指示剂甲醛滴定法原理 氨基酸具有酸、碱两重性质,因为氨基酸含有—COOH基显示酸性,又含有—NH2基显示碱性由于这两个基的相互作用,使氨基酸成为中性的内盐当加入甲醛溶液时,—NH2与甲醛结合,其碱性消失,破坏内盐的存在,就用碱来滴定—COOH基,以间接方法测定氨基酸的量反应式以下面三种形式存在 试剂40%中性甲醛溶液,以麝香草酚酞为指示剂,以mol/LNaOH溶液中和
0.1%麝香草酚酞乙醇溶液;
0.100mol/L氢氧化钠标准溶液操作步骤称取一定量样品约含20毫克左右的氨基酸于烧杯中如为固体加水50毫升,加2~3滴指示剂,用
0.100mol/LNaOH液滴定至淡蓝色加入中性甲醛20毫升,摇匀,静置1分钟,此时蓝色应消失再用
0.100mol/LNaOH溶液滴定至淡蓝色,记录两次滴定所消耗的碱液毫升数,用下述公式计算氨基酸氮的含量计算氨基酸态氮%=MV×
0.014×100/W式中M—氢氧化钠标准溶液摩尔浓度V—氢氧化内标准溶液消耗的总量毫升W—样品溶液相当样品重量克
0.014—氮的毫摩尔质量g/mmol4—
8.2 双指示剂甲醛滴定法原理 与单色法相同,只是在此法中使用两种指示剂从分析结果看,双指示剂甲醛滴定法与亚硝酸氮气容量法此法操作复杂,但准确,不作介绍相近单色滴定法稍偏低,主要因为单指剂甲醛滴定法以氨基酸pH值作为麝香酚酞的终点,pH值在
9.3而双指示剂法是以氨基酸溶液的pH值作为中性红的终点,pH值为
7.0从理论计算看,双色滴定法较为准确试剂三种试剂同单指示剂法
0.1%中性红50%乙醇溶液操作步骤取相同的两份样品,分别注入100毫升三角瓶当中,一份加入中性红指示剂2~3滴,用
0.100mol/LNaOH溶液滴定终点由红变琥珀色,记录用量,另一份加麝香草酚酞3滴和中性甲醛20毫升,摇匀,以
0.100mol/LNaOH标准溶液滴定至淡蓝色按下述公式计算计算氨基态氮%=MV2-V1×
0.014/W×100式中V2—用麝香草酚酞为指示剂时消耗标准碱液量毫升 V1—用中性红作指示剂时碱液的消耗量毫升M—标准碱摩尔浓度W—样品的重量克
0.014—氮的量毫摩尔质量g/mmol注意事项单色指示剂甲醛滴定法,用碱完全中和—COOH基时pH为
8.5~
9.5测定时样品的颜色较深,应加活性炭脱色之后再滴定4—
8.3 茚三酮比色法原理氨基酸在一定pH范围内,能与茚三酮生成蓝紫色化合物,可以比色定量反应式如下 这种反应不是特异反应,主要根据氨基酸的性质而定根据目前的报道,认为在一些事例中,都能观察到形成紫色的双一1,3一二酮茚 试剂磷酸缓冲液pH
8.04制备方法如下先配M/15磷酸二氢钾液取磷酸二氢钾
4.5350克溶于水中,定容至500毫升M/15磷酸氢二钠液称取Na2HPO4·12H2O
11.9380克,溶于水中,定容至500毫升取M/15磷酸二氢钾10毫升与M/15磷酸氢二钠190毫升混合即为pH
8.04的磷酸缓冲液2%茚三酮液称取茚三酮1克,溶于35ml热水中,加入40毫克氯化亚锡SnCl2·H2O,搅拌过滤作防腐剂置冷暗处过夜,定容至50毫升氨基酸标准液称取试剂纯干燥氨基酸如异亮氨酸
0.2000克,先用少许水溶解并定容至100毫升,摇匀从容量瓶中取出10毫升于100毫升容量瓶中,加水至刻度每毫升含氨基酸为200微克/毫升操作步骤标准曲线制备精确吸取氨基酸标准液200微克/毫升0,
0.5,
1.0,
1.5,
2.0,
2.5,
3.0……毫升相当于0,100,200,300,400,500,600……微克氨基酸,分别注入几个25毫升容量瓶中,加水补足为4毫升,再加入茚三酮和磷酸盐缓冲液各1毫升,混合均匀于水浴上加热15分钟,取出迅速冷至室温,加水至刻度,摇匀静置15分钟,在570纳米波长下测定消光值并绘制标准曲线样品的处理同单指示剂法,取澄清的样品溶液2~4毫升,以下同标准曲线操作以水代替样液同时作一空白,在570纳米波长下,测定消光值从标准曲线上查得氨基酸微克量,按下列公式计算出样品中氨基酸含量氨基酸总量毫克%=C/(W×1000)×100式中C—从标准曲线上查得氨基酸数量微克W—测定的样品溶液相当于样品的重量克1000—把微克换算成毫克注意事项茚三酮受阳光、温度、湿度、空气等影响易被氧化呈显淡红或深红色,使用前要进行纯化,方法如下取10克茚三酮溶于40毫升热水中,加入
1.0克活性炭,摇动1分钟,静置30分钟,过滤将滤液放置冰箱中过夜,即出现蓝色结晶,过滤,用2毫升冷水洗涤结晶,置于干燥器中干燥,装瓶备用 4—9果品硬度测定 目的及原理果实的硬度是果实成熟度重要的指标之一测定果实的硬度,可预知果实在成熟,采收、运输、贮藏及加工期间的生理生化变化的结果材料及用具苹果 梨 果实硬度计操作方法取苹果10个,在对应两面薄薄地削去一小块果皮,用果实压力硬度计,测定果肉的硬度,以每平方厘米面积上承受压力的公斤数表示在采用Magness—Tylor型硬度计时,注明测头直径英寸数,压力以磅数表示例如测头为7/16英寸,压力为16磅压力愈强即果实硬度愈大,也愈耐贮藏 4—10 果品中可溶性固形物测定 本标准参照采用国际标准ISO2173—1978《水果、蔬菜制品—可溶性固形物含量的测定—折射仪法》主题内容本标准可用于测定果制品及新鲜果可溶性固形物的含量测定结果以蔗糖质量百分浓度表示,若果品中含有非蔗糖物质,其测定结果为近似值原理在20℃用折射仪测定试样溶液的折射率,从仪器的刻度尺上直接读出可溶性固形物的含量仪器设备折射仪刻度尺上的最小分度值,折射率n
00.001,读数可估计至
0.0003;糖量浓度最小分度值为
0.5%,读数可估计至
0.25%恒温水浴高速捣碎机
10.00~
12.00r/min架盘天平感量
0.01g烧杯250ml测定步骤样液制备注需加入稀释的试样,应适当减少加水量,以避免扩大测定误差1新鲜果品取试样的可食部分切碎、混匀,称取250g,准确至
0.1g,放入高速捣碎机捣碎,用两层擦境纸或纱布挤出匀浆汁液测定2干制品把试样可食部分切碎,混匀,称取10~20g,准确至
0.01g,放入称量过的烧杯,加入5—10倍蒸馏水,置沸水浴上浸提30min,不时用玻璃棒搅动取下烧杯,待冷却至室温,称量,准确到
0.01g过滤3酱体制品如果酱、果冻等,称取25~20g准确到
0.01g,放入预先称量的烧杯中,加入100~150ml蒸馏水,用玻璃棒搅均匀,在电热板上加热到沸腾,轻沸2—3min,放置冷却至室温,再次称量,准确至
0.01g,然后通过滤纸或布氏漏斗过滤,滤液供测定用4液体制品如澄清果汁、糖液等,试样混匀后直接用于测定,混浊制品用双层擦镜纸或纱布挤出汁液测定测定调节恒温水浴循环水温度在20±
0.5℃,使水流通过折射仪的恒温器循环水也可在15~20℃范围内调节,温度恒定不超过±
0.5℃用蒸馏水校准折射仪读数,在20℃时将可溶性固形物调整至0%;温度不在20℃时,按表1的校正值进行校准将棱镜表面擦干后,滴加2—3滴待测样液于棱境中央,立即闭合上下两块棱镜,对准光源,转动消色调节旋钮,使视野分成明暗两部分,再转动棱镜旋钮使明暗分界线处在物镜的十字交叉点上,读取刻度尺上所示百分数,并记录测定时的温度测定结果计算温度校正测定温度不在20℃时,查表1将检测读数校正为20℃标准温度下的可溶性固形物含量计算公式未经稀释的试样,温度校正后的读数即为试样的可溶性固形物含量,稀释过的试样,可溶性固形物的含量按下式计算可溶性固形物%=P×m1/m0式中P为测定液可溶性固形物含量,%m/m;m0为稀释前试样质量,g;m1为稀释后试样质量,g结果表示同一试样取两个平行样测定,以其算术平均值作为测定结果,保留一位小数允许差两个平行样的测定结果最大允许对差,未经稀释的试样为
0.5%,稀释过的试样为
0.5%乘以稀释倍数即稀释后试样克数与稀释前试样克数的比值表1 折射仪测定可溶性固形物温度校正温度可 溶 性 固 形 物 读 数,%℃05101520253040506070应 减 去的 校 正 值
150.
270.
290.
310.
330.
340.
340.
350.
370.
380.
390.
40160.
220.
240.
250.
260.
270.
280.
280.
300.
300.
310.
32170.
170.
180.
190.
200.
210.
210.
210.
220.
220.
230.
24180.
120.
130.
130.
140.
140.
140.
140.
150.
150.
160.
16190.
060.
060.
060.
070.
070.
070.
070.
080.
080.
080.08应 加 上 的 校 正 值
210.
060.
070.
070.
070.
070.
080.
080.
080.
080.
080.
08220.
130.
130.
140.
140.
150.
150.
150.
150.
160.
160.
16230.
190.
200.
210.
220.
220.
230.
230.
230.
240.
240.
24240.
260.
270.
280.
290.
300.
300.
310.
310.
310.
320.
32250.
330.
350.
360.
370.
380.
380.
390.
400.
400.
400.40 附 录 A折射率的温度校正及换算为可溶性固形物含量补充件如采用的折射仪不带有可溶性固形物百分数刻度,仪器校准和样液测定时,折射率的温度校正及换算为可溶性固形物含量的方法如下A1 用蒸馏水校准折射仪读数,在20℃时,折射率调至
1.3330温度在15—25℃时,按表A1中的折射率校准A2 根据在20℃时,按检测的样液折射率读数,由表A2查得可溶性固形物百分数测定时温度不在20℃,需按下式先校正为20℃时的折射率 N20D=ntD+0.00013t-20式中t为测定时的摄氏度 表A1 纯水的折射率温度℃折射率温度℃折射率
151.
33339211.
33290161.
33332221.
33281171.
33334231.
33272181.
33316241.
33263191.
33307251.
33253201.33299 表A2 20℃ 时折射率与可溶性固形物换算表折射率可溶性固形物%折射率可溶性固形物%折射率可溶性固形物%折射率可溶性固形物%折射率可溶性固形物%折射率可溶性固形物%
1.
33300.
01.
354914.
51.
379329.
01.
406643.
51.
437358.
01.
471372.
51.
33370.
51.
355715.
01.
380229.
51.
407644.
01.
438558.
51.
472573.
01.
33441.
01.
356515.
51.
381130.
01.
408644.
51.
439659.
01.
473743.
51.
33511.
51.
357316.
01.
382030.
51.
409645.
01.
440759.
51.
474974.
01.
33592.
01.
358216.
51.
382931.
01.
410745.
51.
441860.
01.
476274.
51.
33672.
51.
359017.
01.
383831.
51.
411746.
01.
442960.
51.
477475.
01.
33733.
01.
359817.
51.
384732.
01.
412746.
51.
444161.
01.
478775.
51.
33813.
51.
360618.
01.
385632.
51.
413741.
01.
445361.
51.
479976.
01.
33884.0/
1.
361418.
51.
386533.
01.
414747.
51.
446462.
01.
481276.
51.
33954.
51.
362219.
01.
387433.
51.
415848.
01.
447562.
51.
482577.
01.
34035.
01.
363119.
51.
388334.
01.
416948.
51.
448663.
01.
483877.
51.
34115.
51.
363920.
01.
389334.
51.
417949.
01.
449763.
51.
485078.
01.
34186.
01.
364720.
51.
390235.
01.
418949.
51.
450964.
01.
486378.
51.
34256.
51.
365521.
01.
391135.
51.
420050.
01.
452164.
51.
487670.
91.
34337.
01.
366321.
51.
392036.
01.
421150.
51.
453265.
01.
488879.
51.
34417.
51.
367222.
01.
392936.
51.
422151.
01.
454465.
51.
490180.
01.
34488.
01.
368122.
51.
393937.
01.
423151.
51.
455566.
01.
491480.
51.
34568.
51.
368923.
11.
394937.
51.
424252.
01.
457065.
51.
492781.
01.
34649.
01.
369823.
51.
395838.
01.
425352.
51.
458167.
51.
494181.
51.
34719.
51.
370624.
01.
396838.
51.
426453.
01.
459367.
51.
495482.
01.
347910.
01.
371524.
51.
39739.
01.
427553.
51.
460568.
01.
496782.
51.
348710.
51.
372325.
01.
398739.
51.
428554.
01.
461668.
51.
498083.
01.
349411.
01.
373125.
51.
399740.
51.
429654.
41.
462869.
01.
499383.
51.
350211.
51.
374026.
01.
400740.
51.
430755.
01.
463969.
51.
500784.
01.
351012.
01.
374926.
51.
401641.
01.
431855.
51.
465170.
01.
502084.
51.
351812.
51.
375827.
01.
402641.
51.
432956.
01.
466370.
51.
503385.
01.
352613.
01.
376727.
51.
403642.
01.
434056.
51.
467671.0
1.
353313.
51.
377528.
01.
404642.
51.
435157.
01.
468871.5
1.
354114.
01.
378428.
51.
405643.
01.
436257.
51.
470072.0 。