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文本内容:
实验一生物组中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定
一、教材分析1.该实验是高中阶段生物课程的第一个实验从此以后生物化学方面的内容增加本实验的操作技能的学习为以后该类型实验打好基础,一定要强调规范化操作方法2.低高倍镜的使用、徒手切片、临时装片等技能,实验时教师可考虑予复习,或通过演示提醒学生,注意规范操作要领3.本实验难度并不大,但由于内容较多、实验时间长,必须作周密安排才能完成如实验中教师应做好学生的分工合作可缩短实验时间同时又能培养学生的合作精神
二、教学目标知识目标阐明实验原理—颜色反应,识记和区分用于可溶性还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的试剂及产生的特定颜色,初步掌握鉴定上述化合物的基本方法,学会描述实验现象,掌握NaOH溶液和CuSO4溶液的使用方法能力目标培养学生主动获取知识,应用知识分析现象,归纳总结的能力,培养学生实际操作的能力及从现象出发探求事物本质的能力情感与价值目标通过亲手实验体验科学家严谨治学的科学态度,培养实事求是的世界观
三、教学重点掌握鉴定生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法
四、教学难点实验内容较多,实验时间长,必须周密安排,才能按时完成学生要分工合作、教师指导演示
五、材料用具实验材料蔗糖溶液、淀粉溶液,浸泡过的花生种子或新鲜的花生种子,鸡蛋蛋白稀释液仪器徒手切片刀,试管架,试管夹,大小烧杯,小量筒,滴管,酒精灯,三脚架,石棉网,火柴,载玻片,盖玻片,毛笔,吸水纸,显微镜试剂斐林试剂,苏丹Ⅲ染液或苏丹Ⅳ染液,双缩脲试剂A、双缩脲试剂B,体积分数为50%的酒精溶液,蒸馏水
六、教学过程
(1)实验原理讲解
1.鉴定实验设计的理念某些化学试剂+生物组织中有关有机化合物产生特定的颜色反应
2.具体原理
①可溶性还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀
②脂肪小颗粒+苏丹Ⅲ染液→橘黄色小颗粒
③蛋白质+双缩脲试剂→紫色反应
(2)、方法步骤
1、可溶性还原糖的鉴定
(1)制备组织样液(教师制备)
(2)鉴定样液分别取蔗糖溶液和溶液淀粉各3ml注入C、D两支试管中,再各滴加1ml清水,向试管滴加3ml淀粉溶液,再滴入1ml稀释的唾液将三只试管隔水加热,煮沸2min观察结果
2、脂肪的鉴定取材花生种子(浸泡3-4h),去皮,将子叶削成薄片选取最薄的薄片移至载玻片中央染色滴加苏丹Ⅲ(苏丹Ⅳ)染液2—3滴制片洗去浮色用吸水纸吸去花生子叶薄片周围的染液,滴加体积分数为50%的酒精溶液1—2滴(溶解有机物)用吸水纸吸去余液,滴1-2滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片显微镜观察先在低倍显微镜下找到花生子叶的最薄处,移至视野中央,再用高倍镜观察,可看到已着色的圆形小颗粒注意指导学生使用高倍显微镜的方法观察结果
3、蛋白质的鉴定制备组织样液鸡蛋清稀释液取组织样液2ml加入试管显色反应加入双缩尿试剂A[
0.1g/mLNaOH]2ml[创设碱性条件]摇荡均匀再加入双缩尿试剂B[
0.1g/mLCuSO4]3—4滴[提供Cu2+]摇荡均匀观察结果
(3)、操作指导
1.实验成功的关键在于实验材料的选择“生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定”实验,实际上是三个独立的实验在实验中,如注意以下问题,则效果会很好⑴.在做可溶性还原糖的鉴定实验中,最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织或器官,而且组织的颜色较浅,最好是白色或近于白色的植物组织,这样可以避免材料自身颜色对实验变化颜色的掩盖经实验比较,颜色反应的明显程度依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜⑵.在做脂肪的鉴定实验中,实验材料最好选用富含脂肪的种子,且徒手切片要成功,要求实验技能较高,不妨改成刮取花生子叶泥制作临时装片,易做,效果又好⑶.在做糖和蛋白质的实验时,最好选用富含蛋白质的生物组织,植物材料常用的是大豆,动物材料常用的是鸡蛋,鉴定之前需要留出一部分样液,以便与鉴定后的样液的颜色做比较,这样可增强说服力
2.注意事项1斐林试剂很不稳定,故应将组成斐林试剂的甲液
0.1g/mL的NaOH溶液和乙液
0.05g/mL的CuSO4溶液分别配制、储存,使用时,再临时配制,将4~5滴乙液滴入2mL甲液中,配完后立即使用切勿将甲液和乙液分别加入组织样液中2鉴定可溶性还原糖,加热试管时,应该用试管夹夹住试管上部,放入盛开水的大烧杯加热;注意试管底部不接触烧杯底部,同时试管口不要朝向实验者,以免试管内溶液沸腾时冲出试管,造成烫伤如果试管内溶液过于沸腾,可以提起试管夹,使试管与沸水接触面减少,以免溶液溢出3在鉴定脂肪的实验中,若用花生种子作实验材料,必须提前浸泡3~4小时,浸泡时间短了,不容易切片,浸泡时间过长,则组织太软,切下的薄片不易成形,切片要尽可能的薄4染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色,染色和洗浮色时间不宜过长(否则酒精将脂肪溶解影响实验效果),观察时找最薄处最好只有1—2层细胞5在蛋白质的鉴定实验中,若用蛋白质作实验材料,必须稀释,如果稀释不够,与双缩脲试剂发生反应后会粘固在试管内壁上,使反应不彻底,且试管不易洗刷干净 ⑹双缩脲试剂的使用,应先加试剂A
0.1g/mL的NaOH溶液,造成碱性的反应环境,再加试剂B
0.01g/mL的CuSO4溶液。