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遗传学实验报告题目三点测交班级历生本组员董轲201023130107孙菲201023130110任晴201023130119实验时间2012年11月3日教师签字目录实验目的------------------------------------3实验原理------------------------------------3实验材料及用品------------------------------4实验步骤------------------------------------5注意事项------------------------------------5实验结果------------------------------------6实验分析------------------------------------7实验目的
1.掌握三点测交的原理及方法
2.学习三点测交的数据统计处理及分析方法
3.了解绘制遗传学图的原理和方法实验原理连锁交换定律处在同一染色体上的两个或两个以上基因遗传时,联合在一起的频率大于重新组合的频率重组类型的产生是由于配子形成过程中,同源染色体的非姊妹染色单体间发生了局部交换的结果三点测交三点测交就是通过一次杂交和一次测交,同时确定三对等位基因(即三个基因位点)的排列顺序和它们之间的遗传距离,是基因定位的常用方法主要过程是用三显性纯合体和三隐性纯合个体杂交,获得三基因杂合体(F1),再使F1与三隐性基因纯合体测交,通过对测交后代表现型及其数目的分析,分别计算三个连锁基因之间的交换值,从而确定这三个基因在同一染色体上的顺序和距离现用野生型18号果蝇与突变型6号果蝇杂交,6号作母本,18号作父本由于小翅miniature、白眼white、焦刚毛singed,由位于X染色体上的三个隐性基因m,w和sn3决定故得到的F1代中雌果蝇性状均为长翅、红眼和直刚毛,而雄果蝇性状均为小翅、白眼和焦刚毛F1代中雌果蝇为三杂合体,雄果蝇为隐形纯合体F1代雌雄果蝇自交,在产生配子的过程中,雌果蝇的两条X染色体发生交叉互换,可以产生8种配子,由于各基因间的距离不一样,产生的8中配子数目不等,而雄果蝇只产生2种配子,且无论哪种配子与雌果蝇产生的配子结合,后代的性状均与雌配子的基因型相吻合通过对F3代果蝇性状的观察和计数可以推知三个基因间的距离如果两个基因间的单交换并不影响邻近两个基因的单交换,那么预期的双交换频率应当等于两个单交换频率的乘积,但实际上观察到的双交换值往往低于预期值,因为每发生一次单交换,对它邻近位置也发生交换的机会产生影响,这叫干涉一般用并发率表示干涉的大小实验材料及用品黑腹果蝇品系野生型18号果蝇(+++)突变型6号果蝇(wsn3m仪器恒温培养箱、显微镜、解剖镜、培养瓶、棉花塞、麻醉瓶、毛笔或解剖针、洁净的白瓷板试剂乙醚等实验步骤
1.11月4日21:00将6号种蝇瓶中的成蝇全部杀死
2.11月5日7:00选择处女蝇3只,15:00选择处女蝇2只
3.11月5日15:00交配6号♀×18号♂
4.11月12日放亲本
5.11月15日21:00F1自交(1号瓶),16日19:00F1自交(2号瓶),17日11:00F1自交(3号瓶)
6.11月23日16:301号瓶、2号瓶放亲本24日20:003号瓶放亲本
7.11月26日出现F2代成蝇,观察并计数注意事项
1.亲代杂交时母本要选6号,父本选18号,否则F1代杂交时还需要选择处女蝇,给实验带来不必要的麻烦
2.亲代杂交时要选择处女蝇,F1自交时不需要处女蝇,选择处女蝇时要严格控制时间
3.在培养瓶内出现蛹时(下一代果蝇羽化之前),一定要将亲本除去,否则混入下一代中,影响计数
4.在选择果蝇进行杂交时,要将新培养瓶横放,将果蝇放到瓶壁上,等果蝇苏醒后,再将培养瓶竖立,以防止果蝇粘在培养基上,影响交配
5.在选择杂交果蝇时,要轻度麻醉,以确保果蝇可以苏醒,不影响交配;在观察F2代性状并计数时,要重度麻醉,以免在观察计数过程中果蝇苏醒,影响计数
6.F2代的计数时间不要超过13天,确保所计数的果蝇中没有F3代实验结果F2代性状观察表瓶号1号瓶2号瓶3号瓶日期11/2611/2711/2912/112/312/411/2611/2711/2811/2912/111/2611/2711/2912/112/3 +++♀11861019113131810029281086♂3999123159131451414221313 wsn3m ♀11041018410043112181552♂151215934656661613101++m♀0001210200002211♂0102200241126201 wsn3+ ♀0410101120020302♂0423341112023631 +sn3m ♀0312403001010300♂1010110221031133 w++ ♀2220302022445213♂2011202531300222 +sn3+ ♀0000000000000000♂0000000000000000 w+m ♀0000000000000000♂0001000100000000实验分析
1.F2观察结果记录表测交后代表型观察数表型间是否重组w-sn3w-msn3-m+++366---wsn3m237---++m36-++wsn3+53-+++sn3m38++-w++60++-+sn3+0+-+w+m2+-+合计重组值(%)
79310012.
618723.
59111.4根据表中的重组值可以绘出遗传学图Msn3Wm、sn
3、W在X染色体上的相对位置由图可知m、sn
3、W在X染色体上的相对位置和它们之间的图距
2.计算并发率和干涉如果两个基因间的单交换并不影响邻近两个基因的单交换那么预期的双交换频率应等于两个单交换频率的乘积但实际上观察到的双交换频率往往低于预期值因为每发生一次单交换,它邻近也发生一次交换的机会就减少一些,这叫做干涉一般用并发率来表示干涉的大小并发率=(观察到的双交换率)/(两个单交换的频率的乘积)=
0.174干涉率=1–并发率=
0.
8263.各组之间的实验条件相同,但实验结果差距较大,也能是由于某些性状不易区分,而造成实验结果统计错误
12.
611.424。