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目录TOC\o1-3\u第1章概述31.1宗旨31.2公司简介31.3背景介绍31.4市场分析51.5营销策略61.6财务与__71.7风险分析71.8创业团队7第2章公司介绍82.1公司宗旨与理念82.2公司名称、组织形式与地址82.3公司____82.4人力资源管理102.5公司战略规划11第3章产品分析133.1产品概述133.2药用机理133.3产品特性143.4产品拓展153.5专利权归属163.6产品生产173.7产品成本估算17第4章市场分析194.1市场规模194.2目标市场分析194.3交立克的市场特征分析204.4__决策机制21第5章竞争分析225.1脑部肿瘤主要的治疗手段对比225.2行业概况235.3产业机会245.4产业竞争力分析(波特理论)255.4公司的SWOT分析27第6章营销战略286.1营销目标286.2营销策略286.3销售渠道296.4关系营销296.5售后服务306.6__策略30第7章投资分析317.1股本结构与规模317.2资金来源与运用317.3未来十年费用列支预算327.4投资收益与风险分析327.5风险投资的撤出33第8章财务分析348.1主要财务假设348.2损益表348.3现金流量表348.4资产负债表35附录37附录一目前脑胶质瘤的各种治疗手段及作用对比37附录二“交立克”前期市场调查报告37附录三“交立克”核心技术资料40附录四团对人员简介51第1章概述1.1宗旨我们的宗旨是“做基因纳米技术____的先行者”我们计划创建的赛恩基因纳米医药有限责任公司是一家以基因治疗产品的研发和生产为主的新型医药企业,本公司紧扣时代的脉搏,致力于基因治疗药物的__,努力寻求纳米技术与基因治疗的结合点,将现代高新技术应用于疾病的治疗我们将以不断的研发创新为公司的推动力,以肿瘤治疗为我们的专业方向,以新搏胜,以专搏恒我们将致力于让国人能够以最低廉的__享受到高新技术带给我们的生命福音,以人为本,撒播爱心1.2公司简介目前公司处于创建阶段,公司名称为赛恩基因纳米医药科技有限责任公司,经营形式为有限责任公司,经营地址将选在郑州市高新技术__区1.3背景介绍新剂型的__和利用在医药工业和医疗卫生实践中发挥着越来越重要的作用,尤其是近30年来__的新剂型新药,应用现代科学理论和新材料、新技术进行系统设计,科学研制,规范审批,为高效、安全、合理用药提供了可靠的依据,受到社会重视中国国家自然科学基金委员会将剂型研究置于优先资助领域,国家科技部,国家新药基金委员会已把发展药物制剂研究作为新药__的和重点攻关的重要组成部分目前,由于研发条件,研发队伍素质和研发资金等方面的差距,我国在新药合成方面还没有与欧美、__等国一争高下的实力这就促使我们药物研究的重点应该放在药物剂型的系列化创新上靶向药物是目前药剂学界研究的重点,国家自然科学基金委员会2004年资助的药剂学项目中,靶向制剂研究项目达25项,为数最多,占
48.1%,充分反映了靶向制剂研究在现代药剂学中的重要地位靶向制剂最突出的特点是能将治疗药物最大限度的运送到靶部位,使药物在靶部位浓集,药物浓度超出传统制剂的数倍乃至数百倍,治疗效果明显提高;同时减少药物在非靶部位的分布,降低了药物的用量,不良反应少;而且便于控制给药的速度和方式,达到高效低毒的治疗效果由于基因药物的生理和生物学特性,导致一般剂型无法有效的将其运送至病变部位,靶向制剂则能出色的完成这一任务脑胶质瘤是起源于神经上皮组织的一类最常见的恶性肿瘤,胶质瘤,顾名思义,肿瘤质地如胶,象螃蟹一样,向四周生长,与正常脑组织犬牙交错,缺乏明确界限其全球发病率为3/10万~10/10万,占全部颅内肿瘤发病率的46%,且发病率有逐年上升的趋势,发病的高危人群为30~45岁的中青年人以及15岁以下孩童脑胶质瘤造成的高致残率、短生存期和低生活质量,严重威胁着患者的生命在全球,脑胶质瘤每年夺去18万~60万中青年的宝贵生命目前治疗方法以外科治疗、放射治疗、化学治疗为主,然而近__年使用这些治疗方疗效并没有产生明显改善良性胶质瘤(I、II级)患者,约25%的病人不能得到治愈,而对于恶性胶质瘤(III,Ⅳ期)患者,这一数字竟高达75%在该治疗领域出现的药物,其药效不可控,不明显,有严重的毒副作用,不能满足患者的要求赛恩将纳米技术与基因工程技术巧妙结合,在推动医药新技术方面不遗余力,在众多专家学者的努力下终于推出了新型胶质瘤治疗药物交立克由于该制剂的作用方式不同于传统的化学药物,在延长病人生命的同时病人的生命和生活质量在治疗过程中得到了保证交立克正是应大众的强烈需求而生,我们将新的药物理念注入到了该产品之中,那就是靶向性基因治疗,它更富有针对性,在杀死和抑制病变细胞的同时,尽量的减少对正常细胞的损伤,毒副作用小其卓越的品质将给生活在癌症折磨中的患者带来真正的福音1.4产品与市场我公司现正在__的产品为“交立克”此药品是由郑州大学药学院和美国加利福尼亚大学医学院合作__项目,用于脑部肿瘤手术病人辅助治疗交立克的目标群体定位于家庭收入较高和医疗保障条件较好的胶质瘤患者,交立克采用静脉注射的给药方式,生物利用度高,毒副作用小,病人顺应性强,在治疗疾病的同时生命生活质量也得到了保证单独使用交立克可使肿瘤细胞数减少,病灶软化、缩小,大大延长了病人的生命,同时为手术治疗和其他综合疗法提供了机会其良好的靶向性、低毒性和高效性较好的迎合了肿瘤病人术后治疗的需要目前该项技术在美国已经通过专利申请,在中国仍在专利申请中新药上市大约需要5年的准备阶段,其中包括临床前试验阶段,临床阶段两部分在此期间,我们将采取理念营销为主,__基因纳米技术在医药领域的应用在临床试验的同时,架构起我们的初步销售网络初期公司不具备生产能力,拟采取委托__生产方式,由于在生物制品生产方面国内已经有了较长的生产历史,因此我们将通过议价的方式寻找到能生产出质量最好,安全性最高的生物制品生产企业,作为我们的委托对象因为我们相信,质量就是企业的生命,我们将在GMP(药品生产质量管理规范)的指导下建立全面质量管理体系1.5营销策略“交立克”是一种全新治疗理念下的产品,前期需要大量的时间投入临床试验在此期间,我们主要是对该理念以及我们的品牌做营销,侧重于在专业__上发布__并组织肿瘤专向研讨会在保持一定的媒体和大众__度的同时,建立并保持与郑州各三级以上医院的良好伙伴关系,初步建立在郑州的销售渠道新产品上市后,我们将以显著的疗效和完善的售后服务体系保持我们的品牌形象,注重并保持与医院的互动与伙伴关系1.6财务与__公司创建初期共需要风险投资900万元主要用于新药的临床前及临床试验在产品上市后,根据国家对新药监测期的规定,在5年的监测期内不得批准其它企业生产和进口,因此预计新药上市后第一年的销售额会在1300万元左右,毛利润为500万元左右随着产品在全国各大城市进行全面__,以及公司的改善,每年利润会以成倍的速度增长,从而预计产品上市后的
1.5年内即可收回风险投资届时我们将根据公司发展情况,采取上市、出售或者回购方式保证风险资金的退出1.7风险分析该项目主要的风险来自于新药上市前研究阶段可能出现未知毒性导致新药申请的失败1.8创业团队目前,团队共有7名成员,由郑州大学研究生组成我们将发挥各自的特点和优势,从技术、营销、市场等层面去和我们的对手竞争对技术的准确把握,对市场的深刻理解,合理有效的创新思维,良好的心态,团结合作的精神,这些使我们组成了一个具有强大战斗力的创业团队同时,抱着开放兼容的态度,我们也随时欢迎一切才俊之士加入我们的团队,和我们一起共创美好的未来第2章公司介绍2.1公司宗旨与理念我们的宗旨是“做基因纳米技术____的先行者”我们的理念就是将基因技术和纳米技术融合在一起,__靶向__物,使药物的针对性强,疗效确切,毒副作用小我们强调技术的新与质量的硬,同时要以爱心服务于患者我们坚信,只有从患者的需求出发才能研制出更好的药物以解除其痛苦,也只有坚持把疗效最好的药物投放市场才能保持我们的品牌长盛不衰,才能在更高的起点上开始我们新的征程作为一家医药公司,我们强调公司与员工的共同发展,以人为本,我们将给员工提供良好的学习和锻炼机会2.2公司名称、组织形式与地址目前公司处于创建阶段公司名称为赛恩基因纳米医药科技有限责任公司,经营形式为有限责任公司,经营地址将选在郑州市高新技术__区2.3公司____2.3.1公司创立期原则上,在公司创立初期,人力资源及创业经费都还不充裕,在人员配置上将偏重药品的研发部门及行销部门,至于财务、行政等相关人员将以“多面手”的方式配置基本上药品研发部门配置2-3名人员(技术团队),营销部门配置2名人员(产品团队),生产部门配置2名(产品团队),财务及行政部门配置2-3名人员(管理团队)同时,我们将聘请郑州大学药学院和商学院的专家顾问们(OutsideDirectors)来指导项目的运作公司是有限责任公司制,实行总经理负责制,公司基本框架如下各团队将积极发挥协同作用,因为初期很长时间用来进行临床实验和进行品牌创建与单城市范围的销售网络铺设,因此,主要以技术部门和营销部门的配合为主,同时管理团队要尽量降低公司的运营成本,组织各项交流工作2.3.2公司成熟期公司的成熟期采取矩阵式管理,在原有职能部门的基础上,仍采取项目经理制每一个新药品种立项之后,都建立专门的项目小组,负责从研发,生产到__的整个过程为的是更有针对性,更有利于信息的反馈和产品的__进度公司强调____的扁平化,强调明确的职能划分和充分的灵活性药品生产采取委托生产采购运输部主要负责与药品委托生产企业的协调及监督2.4人力资源管理公司强调以人为本,重视对员工的培训和管理员工是一个公司的文化传承,我们将帮助员工设计长久的发展规划,减少员工流失率,强调团体协作与共同发展,我们将采取每月一次的培训,每周一次的聚餐等等方式加强各部门内部的协调和团结同时采取工作展示的方法,让各部门间增进了解在薪金制度方面,我们考虑结构工资制和提成工资制相结合的工资制度结构工资制能够反映劳动差别的各种要素,可以从劳动的不同侧面反映劳动者的贡献大小,发挥工资的各种职能作用,适合企业内部大多数人员,而提成工资制比较适合营销人员由于药品营销更注重于专业性,因此我们将尽量通过各种奖励制度减少销售人员的流失率,培养人员的认同感,增加企业的凝聚力拟奖励制度如下经济奖励,方式发放奖金、福利和业务提成等非经济奖励,方式“最佳员工”评选,员工参与管理,工作环境的改善,员工参与外部培训给予支持等2.5公司战略规划2.5.1整体战略目标我们公司的宗旨是“做基因纳米技术____的先行者”我们要在基因纳米技术____方面成为中国的先锋军,做该项技术的领头羊从现在公司掌握的技术优势分析,我们的战略定位为做基因纳米医药市场的开拓者并独享新药带来的垄断优势2.5.2阶段战略目标初期战略(1~6年)“交立克”的临床试验与基因纳米技术在医药中应用的理念__,初步建立自己在郑州市的销售网络中期战略(7~10年)将销售网络铺设到北京、__、广州、武汉等大城市,并根据其医院的辐射能力考虑中小城市医院的____战略(10年以上)随着公司的发展,我们将推出针对其它实体肿瘤的基因药品,在新的药品推出的过程中我们继续巩固已有网络适时选取合适品种在欧美及东南亚等地区上市,拓展国际市场,扩大销售网络第3章产品分析3.1产品概述“交立克”是由载体和编码反义mRNA的质粒构成其载体即是本公司研制成功的一种新型的药物传送系统(drugdeliverysystemDDS)——脑靶向脂质体按照药剂学界的分类方法,脑靶向脂质体属于靶向剂型(___),即能够将药物特定释放于靶部位的DDS“交立克”为注射剂,以水为分散介质,为稍显浑浊的胶体分散体系,白光透过时从侧面观察有淡蓝色乳光拟采用安瓿瓶包装,每1ml药液含脂质体药物2mg该制剂保质期约为一年左右,保质期内药品的渗漏率不超过5%,脂质体的聚沉率不超过3%目前“交立克”名称正在进行商标注册推出的产品根据患者病症轻重,采用了3种剂量规格,分别为20mg/支、12mg/支、6mg/支其售价分别为260元/支、160元/支、90元/支产品外观如图(20mg/支、12mg/支)3.2药用机理“交立克”是基因纳米制剂,其基因载体是一种以脂质体为基本骨架,偶联了单克隆抗体和聚乙二醇,具有“拟病毒”特性,包埋药物后粒度为60~150__的复合纳米脂质体交立克通过静脉注射的方式给药,它能够逃避体内免疫系统(RES)的摄取而长时间维持较高的血药浓度;能够顺利地穿过血脑屏障(BBB),到达脑内;能够特异性的粘附于病变细胞并诱发细胞内吞作用,而进入细胞内;能够顺利地穿过核膜到达细胞核释放反义基因药物这是一种能够“欺骗”人体,具有生物逃逸性,并利用人体本身的生理作用转运药物的制剂我们称用这种制剂进行肿瘤的基因治疗的方法为“特洛伊木马TROJANHORSE”治疗策略交立克所携带的质粒,进入肿瘤细胞核以后表达700bp长度的反义核苷酸可与表皮生长因子受体mRNA的2317~3006区段互补结合,使其表皮生长因子受体基因的表达受到抑制(转录后沉默),从而抑制脑胶质瘤以及其他脑瘤的恶性增殖,起到抗肿瘤的作用3.3产品特性我们研制成功的脑靶向脂质体不同于以往脂质体和其他纳米载体的设计第一,脑靶向脂质体的是以中性磷脂和少量负电性磷脂为原料,最终的成品带有少量的负电荷,体内应用时可免受负电物质的影响而避免聚沉的发生第二,脑靶向脂质体能够逃避RES的摄取,具有“隐形”的特性,使药物能够长时间的维持较高的雪要浓度第三,脑靶向脂质体可以顺利通过BBB和微血管壁,能够在全脑分布第四,脑靶向脂质体能够顺利穿透细胞膜和核膜而到达细胞核,最终将反义基因药物即编码反义寡核苷酸的质粒释放于细胞核脑靶向脂质体就像定位导弹一样将反义基因药物释放于脑部肿瘤的细胞核内,可用于多种反义基因药物的脑部传输,是一种应用前景十分广阔的基因载体3.4产品拓展短期目标4~5年内完成“交立克”的新药申请工作(非临床试验约1年,新药审批8个月,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期临床试验2~3年),并在此之前筹备委托生产事宜,争取在第5年完成新药的上市同时__具有多重基因治疗作用的第二代脑胶质瘤脑靶向脂质体,适时进行新药申请中__目标赛恩创业初期是以基因和纳米技术为依托的一家以新药的研发为主的研究型公司,主要以新药技术转让和新药委托生产为主当药品上市公司赢利,资金充裕后,我们将会引进大量的药学和医学高素质人才,在我们已有的技术上进行更为深入的研究,研制__可以治疗更多脑部肿瘤和其他实体肿瘤以及其他基因型疾病的新药当资金进一步充裕,本公司将建立厂房购置设备,__生产自己的产品,完成公司的转型,即由研发型向综合型的转变根据我们的发展设想,在未来的产品生产中,我们将逐步由点带面地推出以下相关产品新交立克和“交立克”一样,“新交立克”是以脑靶向脂质体为载体的一种反义基因药物,但是对于“新交立克”,我们的载体修饰将更为细致和精确,其靶向性和安全性会进一步提高而且其内核即质粒DNA也会进一步改进,由其产生的反义寡核苷酸具有多个作用位点,对肿瘤的生长产生多重复合作用帕立克治疗帕金森病的脑靶向脂质体制剂,基本构思与“交立克”一样,但是其质粒的构建要复杂的多,以目前的试验数据来看,“帕立克”的上市至少需要6~8年的时间由于世界药品消费能力较强的欧美日韩等地人口老龄化日趋严重,中国的发达城市如__,也表现出相当的趋势,所以说,“帕立克”市场潜力更为巨大治疗其他脑部肿瘤及其他实体肿瘤的产品3.5专利权归属该项目属于郑州大学药学院与美国加利福尼亚大学医学院合作项目,由张云__与张振中__共同主持课题研究现今美国专利权归属加利福尼亚大学所有,而中国的专利权由郑州大学药学院申请申请下来后由郑州大学享有完全专利权本公司享有本专利的终身使用权3.6产品生产药品不同于一般商品,《药品管理法》对药品的审批,生产和销售都做了严格的规定建立一个药品生产工厂,需要大量的人员和资金投入,投资规模和风险都会大大增加药品委托生产是国际通行的办法,可以在不丧失对药品品种所有权的前提下,减少了自身投入,缩短了投资回报期,所以在药品申请成功后我们将采用委托生产的方式进行前期的生产在药品申请的同时我们会对一些国内生产生物制品和脂质体药物的知名企业进行考察,并最终确定委托对象,制订详细的委托生产计划一旦药品获得SFDA批准,即进行具体事宜的磋商,签订5年的委托生产计划,按照国家相关规定进行委托生产3.7产品成本估算1000支12mg规格的“交立克”注射液的估计生产成本列表如下成本来源原料委托生产费用管理税金其他合计费用/元6980045008000150076600主要原料__Pla__id(基因工程制备)350元/mgHIR__b(靶向人胰岛素的单克隆抗体抗,基因工程制备)15元/mgPOPC(1-棕榈酰-2-油酰-磷脂酰胆碱)500元/gDDAB(双十二烷基二甲基溴化铵)380元/gDSPE-PEG2000(2-硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇,ShearwaterPolymers)600元/gDSPE-PEG2000-__lemide(2-硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-顺丁烯二酰亚胺)800元/g原料成本的估算每制备1mg脂质体药物消耗POPCSPE-PEG2000DSPE-PEG2000-__lemideDDABPla__id
11.34ug*
0.35=
3.969元HIR__b
1.___元合计
5.8139元第4章市场分析4.1市场规模国际流行病学统计资料显示,脑胶质瘤的发病率居各种肿瘤的第9位,死亡率居第2位在我国,尚无全国的相关流行病学统计资料从1970年到2000年__的一个统计数据来看,非神经系统肿瘤的发病率在逐年下降,而神经系统肿瘤的发病率却在上升如在__华山医院的患者中,脑胶质瘤的发病人数每年都在增加,2000年已经达到700多例而根据我们对郑州五家三级医院的调查了解,就诊的脑胶质瘤患者人数也在逐年上升,目前五家医院每年共约有1500~2000名患者就诊欧美的临床统计表明,颅内原发恶性肿瘤的发病率为21/10万,胶质瘤约占60%,其中高度恶性的胶质瘤占70%-80%世界卫生组织2001年报道,世界癌症发病率和死亡率比1990年上升了22%,今后20年还将上升大约50%而我国调查显示,近年来我国每年新增肿瘤患者160-170万人,总数估计在450万人左右恶性脑肿瘤占人类所有癌症患者的2%,占儿童全身肿瘤发病率的20%-50%在我国脑胶质瘤发病率在8-10/10万人,潜在市场规模大概在12万人左右4.2目标市场分析人对于医疗的的需求和对生命生活质量的要求与其占有的社会资源密不可分,考虑到__因素以及中国社会保障体系的特点,我们将目标市场定位于家庭收入中等以上的胶质瘤患者,并且在公司成立初期主要针对全国各中心城市进行临床__对其年龄分布分析来看,高危人群主要是以30-45岁及15岁以下儿童为高发病期由于考虑到30-45岁患者处于事业高峰期,15岁以下儿童属于社会高__群体,因此我们认为患者都有较强的治疗欲望,并且目标患者家庭收入相对稳定,具有消费支付能力且随着社会医疗保障体系的不断完善,有数据显示,人们的医疗保健费用支出有不断上升趋势保守估计,应该有30%以上的患者会选用本药物,人数大概在36000人4.3交立克的市场特征分析
①无需求弹性交立克属于处方药,缺乏__弹性,但是受医师处方考虑__问题的影响,交立克并非完全没有__弹性
②满足了患者的首要需求交立克是全新的脑胶质瘤治疗药物,无论从剂型上讲,还是药物本身都代表最新的治疗理念,极大地满足了患者对新型药品的需求心理
③指导需求防治疾病服用药品是专业性很强的活动过程病人熟悉药品,接触药品主要通过医师,患者对某种药品的信任也是由医师建立起来的,因此医师在交立克市场__的环节中是极为重要的一环
④第四集团的影响在国内由国家7个部委组成的决定可报销药品目录的评审__小组(即第四集团,负责《基本医疗保险药品目录》的制定)对药品的市场需求影响大但是在交立克新药监测期内(上市5年之内),第四集团的应影响较小新药监测期过后交立克如果疗效确切,副作用少,就应努力进入《基本医疗保险药品目录》,此时第四集团的影响将对交立克的市场产生很大的影响4.4__决策机制药品的实际消费者是病人,使用者是医师,__决策者是医院药事管理委员会及医院药房,实际__者是医院药房市场特征呈现为使用者、__决策者与__者分离的特殊性__过程属集团__行为,在整个__过程中评审委员会,医院药房和医师起决定性作用,病人即消费者在__过程中则基本不起作用新药上市初期高水平医药代表的推销是最有效的销售方式第5章竞争分析5.1脑部肿瘤主要的治疗手段对比目前对肿瘤治疗的趋势朝着综合治疗(包括手术、放射、免疫和化学药物治疗)的方向发展,由于采用单一的治疗方法效果并不理想,因此需要合理的、有针对性的联合应用,以取长补短或优势互补抗肿瘤药物为一类对肿瘤细胞有杀灭作用或干扰其生长和代谢的药物具体作用见附表,下边我们的分析侧重于治疗中的优劣势比较治疗手段适用阶段优势劣势手术治疗治疗良性可治愈,是主要的治疗手段可能复发放疗辅助治疗适用广,主要的辅助手段;配有药物副作用大;生活生命质量差;治疗费用高化疗术后治疗防止复发;配有药物副作用大生活生命质量差对脑胶质瘤基本无效放射外科手术治疗特殊病例————不适用脑胶质瘤交立克(基因治疗)辅助治疗,防止复发副作用小;病人痛苦小;效果好治疗费用稍高由上表可以看出,目前的治疗手段对脑部肿瘤的治疗作用有限,手术后容易复发,放疗和化疗毒副作用大我们的目标群体是收入较高和医疗保障条件好的胶质瘤患者,基于对高质量生活的追求,我们认为基因靶向治疗有较强的优势5.2行业概况目前抗肿瘤药物占世界药品市场总销售额的
4.2%左右,畅销品种除紫杉醇目前销售额为10亿美元左右外,还有吉西他滨gemcitabine、托泊替康topotecan、多西他赛do__taxel和泰索帝taxotere后3种抗肿瘤药物的世界销售额合计超过4亿美元,3年后有望超过10亿美元这3种药物对发病率较高的肺癌、乳癌、卵巢癌、结肠癌、直肠癌和前列腺癌的治疗均有出色表现,但对于脑肿瘤由于血脑屏障的作用,脑内药物浓度低,无论是普通的注射剂,还是目前市售的脂质体注射剂治疗效均远不及前者2005年世界抗肿瘤药物预测2000年2005年2000-2005年平均增长率(%)老产品
132.
10181.
606.6创新治疗药物
15.
8085.
540.2合计
147.
90267.
1012.5近年随着纳米分子医学和分子生物学技术的突飞猛进,使肿瘤发生机制的阐明、抗肿瘤靶点的寻找、新型抗肿瘤药物的__以及治疗手段的创新和综合运用有了长足的进步在2000-2005年期间,国际上整个市场的规模将增长近1倍,预计将上市134种治疗癌症的新药包括创新产品以及药物的新配方或新适应症,但是在国内方面这种新型药物还相对匮乏近几年来,粉针剂、大输液和乳剂共占据了抗肿瘤用药3/4以上的市场份额随着新产品和新剂型药物的出现,抗肿瘤药物中其他剂型的市场份额正在逐年扩大对于肿瘤治疗用药的五个亚类而言,其相对市场占有率也基本稳定,但以紫杉醇为代表的天然抗肿瘤药物的相对市场占有率在不断扩大,现已接近市场份额的一半;而抗肿瘤抗生素类药物的相对市场份额正在不断萎缩国内的新药研究与__水平相对于欧美,__等医药强国__很多,至今尚未有____的基因类药物上市5.3产业机会由于基因治疗药物特别是反义核苷酸类药物具有高度选择性和低毒性的特点,医药界已经越来越重视基因类药物1991年我国科学家进行了世界上首例血友病B的基因治疗临床试验,目前已有4名血友病患者接受了基因治疗,治疗后体内IX因子浓度上升出血症状减轻取得了安全有效的治疗效果1998年由ISIS公司__的反义核苷酸药物“福米韦森”由美国FDA批准上市,用于治疗艾滋病所致的巨细胞病毒视网膜炎,取得很好的效果此外,采用血管内皮生长因子基因治疗外周梗塞性下肢血管病基因治疗方案也已获准进入临床试验总的来看,我国基因治疗产业比美国__了约4年,正处于成长阶段,绝大部分还处于实验室研究阶段,仅有大约5个项目通过审批进入特批临床前试验或Ⅰ、Ⅱ期临床试验因此对我们来讲,目前是行业进入初期发展的时机,抓住此次机会将有利于我们占据较大的市场分额5.4产业竞争力分析(波特理论)供方自2004年以来,我国药品委托__生产(OEM)以前所未有的速度发展,出内人士将其称为“后GMP时代”在2004年7月1日前我国完成了对所有原料药和药品制剂生产企业的《药品生产质量管理规范》(GMP)认证之后,医药企业产能过剩已成为一个突出问题据北京康派特医药经济技术研究中心的统计数据显示,约65%的企业处于生产线开工不足、设备闲置的状态,营运成本大幅增加的状态因此我们有较强的侃价能力,并且在条件适合时,我们将通过和厂商进行战略合作或者纵向整合,进一步降低我们的运营成本买方由于脑胶质瘤病症死亡率很高,且从发病到死亡时间很短,因此病人大都选择入院治疗,医生给药几乎是唯一的用药渠道因此医院有着较强的侃价能力针对于此,我们强调和医院的__合作,战略伙伴关系潜在进入者进入脑胶质瘤的潜在进入者,一是新型药物的__及进入;二是在原有肿瘤药品上经过改进,更适用于此细分市场近年来,由于传统的肿瘤药物对脑胶质瘤的效果并不明显,并且其药用机理分析,认为并不存在很大改进程度,而新型药物的__,思路一般是和我们相同的,目前国内此类产品进入临床期的并不多,并且由于政策的保护,我们可以认为将会受到较弱的进入者威胁替代品及现有市场竞争者由于目前治疗一般提倡放疗、化疗和各种类药品的协同使用,因此我们认为不会受到市场上原有其他药品和其他治疗手段的威胁并且由于我们的药品更加有效,以及低毒,认为不会受到替代品和现有市场竞争者的阻击5.4公司的SWOT分析类别名称分析结果S优势1.产品填补了基因药物靶向治疗脑部肿瘤的空白2.技术领先,有强大的技术支持3.高素质的管理团体与灵活的反应机制4.能迅速的对医师和患者的信息反馈做出回应5.新药上市后国家有为期五年的新药监测期,监测期内不再受理同类药品的申请W劣势1.缺乏充足的产品研发和市场开拓资金2.基因治疗是全新治疗理念,认同度不高3.项目初创,没有足够强的品牌优势4.新药的研发周期较长,带来的风险比较大5.资金回收期长缺乏现金流上足够的抗风险能力6.部分原料国内无供应O机会1.目标市场空间较大2.同类产品未在国内外上市3.社会医疗保障体系的完善增加了患者的消费支付能力4.全球肿瘤的发病率有增高趋势T威胁1.因研制周期长,可能有潜在竞争对手的兴起2.由于资金受限新药品的研发进程可能会受到限制3.专业要求较高,人才的培养和保持不易新药研发具有高投入,高风险,高回报的特点,主要的风险来自于新药上市前研究阶段可能出现未知毒性导致新药申请的失败针对于此,我们的应对办法是根据研究资料,找到未知毒性产生的原因并寻找替代毒性物质的新成分第6章营销战略6.1营销目标根据我们对自己的定位以及公司发展战略的要求,我们制定了如下营销目标
一、__基因药物治疗理念
二、打入市场及占有一定的市场份额(30%以上)
三、创立良好的公司品牌形象,稳定客户群6.2营销策略营销策略表时间期限营销目标营销手段短期1-5年(药物上市前)
1、宣传新的治疗理念
2、初步建立在郑州三级医院的销售网络
1、邀请肿瘤医师召开学术会议
2、在药品试验进入临床阶段的同时邀请媒体__,报道新的治疗理念
3、新药推介会包括
①现场展示——介绍产品特点,包括临床实验资料、数据、药效、作用机制、不良反应、药物的相互作用、产品的主要优势、注意事项
②提问__
4、高水平医药代表的推销中期6-10年(药物上市__期)
1、将市场扩大到全国各大中城市
2、树立自身的品牌;
1、组成专门的营销小组,以北京、__、广州,武汉等大城市的中心医院为主要营销对象
2、提供专家__,提供良好的售后服务及专业指导
3、定时到各大医院做回访__10年以上(巩固品牌以及新药的__)巩固品牌;以大城市做辐射圈,在中等消费力城市做__
1、创办自己的宣传资料,将该领域最新的信息和科研成果提供给医师;
2、定期组织肿瘤方面学术会议;
3、建立肿瘤____,提供业界最新信息
4、在医学院创立奖学金,鼓励学生更多的了解该病症方面的情况(发展未来客户)本药品的主要特色如下处方药,生物制品,一类新药其优势主要是疗效好,副作用小主要劣势是有较高风险、__较高脑部肿瘤治疗药物市场潜力很大我们的处于产品生命周期里的萌芽期如何在最短时间内让医院接受我们的药品,让医师了解并使用我们的产品,是我们这个时期营销的重点所在6.3销售渠道“交立克”的分销模式如果采取营销外包(即实行总代理模式),由于代理商的专业知识背景所限,对产品的__有一定的难度,而且代理商的代理品牌繁多,真正的__力度有很大弹性我们将吸收并培养高水平的药品__和营销人员组成自己的营销团队,重视对团队人员的专业知识以及素养培训,强调以人为本,树立良好的企业形象首先选择几个较大城市中口碑好的医院做先期市场__,再利用辐射效应__到其他医院6.4关系营销由于药品销售(特别是处方药)受__管制,企业必须做好__公共关系公司将设立药品__事务专员职位与公共关系职位负责与食品药品监督管理局、社会劳动与保障部门、物价部门、___门、医院的管理层进行沟通与协调负责与媒体、公众等保持良好的交流、沟通6.5售后服务在新药上市后的任何时间里(无论是否在监测期),药品的售后服务比任何产品的售后服务都更为重要售后服务部的作用主要有三其一,与医师的交流,及时掌握药品的疗效和不良反应情况,做好药品不良反应监测工作;其二,药品__,负责对产品的疑问回答;其三,与医院药房及医师的交流,主要掌握药品的__,以及其他各方面的信息6.6__策略从产品的生命周期看来,在产品的引进阶段(投放期),考虑到产品的成本问题以及资金的回收,故采取高价高促销的双高策略定价的主要依据是我们针对郑州5所三级以上医院的调研数据,以及我们对药品的成本估算“交立克”的定价清单产品规格成本/元销售__/元生产成本销售成本(主要是__费用)20mg
127.
625255.212mg
76.
615153.26mg
38.
3876.6当新药成功地闯过引进阶段进入成长阶段,可以预料更多的医师“赶这种新药的浪头”,药品的销量上升,生产及销售成本下降,利润上升快市场上同类产品可能出现的时候,采取适当降价以及加强原渠道营销的方法应对第7章投资分析7.1股本结构与规模公司注册资本1100万,股本结构如下股本结构中,赛恩公司技术入股占总股本的
18.18%,其余900万的注册资本,我们希望能引进一家或几家风险投资公司参股因为投资期较长,风险资金可分期投入,为了达到比较合理的资产负债比率,我们会在产品打入市场的第二年增加100万元银行贷款,以后会逐步增加7.2资金来源与运用公司成立初期共筹集资金900万,主要来源于风险投资,主要用于新药的非临床试验、临床试验以及生产及__费用合计共865万,明细如下表风险投资用途需用资金(万元)经历时间新药的非临床试验2001年新药的中试生产研究100新药的注册费用58个月临床试验3年Ⅰ期临床试验100Ⅱ期临床试验60Ⅲ期临床试验200药品的生产及__200合计865约5年7.3未来十年费用列支预算人员工资主要为销售及管理人员每年增长10%,第5年年初期市场调研和市场开拓费用50万左右;从第6年起,每年的销售费用为销售额的10%,研发费用为每年销售额的10%,管理费用为每年销售额的5%为保证合理的资产负债比率从第七年起逐步增加短期银行贷款.每年的财务费用依次如下:列个表把财务费用那一行填进去短期银行贷款财务费用年份第六年第七年第八年第九年第十年财务费用(万元)
0.
05.
616.
816.
816.87.4投资收益与风险分析7.4.1投资净现值考虑到风险投资在前5年没有收益,风险较大,i取15%,NPV=
24020.6,远大于零,投资方案可行7.4.1内含报酬率根据现金流量表计算内含报酬率如下内涵报酬率达到
135.5%,主要因为本产品属高新技术产品,前期利润空间相对较大7.5风险投资的撤出风险投资的退出方式有许多种,如上市、收购、清算和注销等形式首先,在公司得到了迅速发展壮大,产品占领了相当的市场份额时,我们将争取上市虽然上市是一种收益可观的退出方式,考虑到目前国内只有业绩较好的公司才有条件上市,而且还将受到金融市场兴衰的影响,本着让投资者有较好的收益为目的,我们在上市条件不允许的情况下,将考虑收购的方式退出风险资本这样最大的好处在于,风险相对比较稳定,对公司的发展也有利预计公司从第六年开始盈利,根据每年利润差异进行利润分配其中风险投资部分可分得的利润如下表第一年至第五年第六年第七年第八年第九年第十年
0.
063.
5760.
8861.
31077.
01292.8单位万元第8章财务分析8.1主要财务假设公司设在郑州市高新技术__区,经有关部门认定为高新技术企业,享受“两年免征所得税”的税收__政策即在公司成立自盈利起两年免征所得税,正常税率为15%公司自第六年起以净利润的15%分红8.2损益表公司自成立起第六年起开始有产品打入市场其损益情况如下损益表第六年第七年第八年第九年第十年
一、产品销售收入
1378.
816545.
622060.
827576.
033091.2减销售成本6__.
48272.
811030.
413788.
016545.6
二、产品销售利润6__.
48272.
811030.
413788.
016545.6减销售费用
137.
91654.
62206.
12757.
63309.1管理费用
34.
5413.
6551.56__.
4827.3财务费用
0.
05.
616.
816.
816.8三.利润总额
517.
16199.
08256.
010324.
212392.4减:所得税
0.
00.
01238.
41548.
61858.9四.净利润
517.
16199.
07017.
68775.
610533.5单位:万元注销售费用和管理费用分别按产品销售收入的10%和
2.5%计算第七年借入短期贷款100万,以后保证300万的短期贷款,以优化公司资本结构在委托生产阶段,将委托生产费用一并记入产品销售成本8.3现金流量表在公司成立初期吸收900万的风险投资,完成临床试验及新药申请成功上市以后,公司于第6年开始有产品投入市场在此以后的5年里,其现金流入流出情况如下现金流量表第六年第七年第八年第九年第十年
一、经营活动产生的现金流量会计利润
517.
16199.
07017.
68775.
610533.5加应付帐款增加额
68.
9827.
31103.
01378.
81654.6折旧摊销
20.
020.
020.
020.
020.0财务费用
0.
05.
616.
816.
816.8减应收帐款增加额
68.
9827.
31103.
01378.
81654.6经营活动产生的现金流量净额
537.
16224.
67054.
48812.
410570.3
二、投资活动产生的现金流量购建固定资产所支付的现金投资活动产生的现金流量净额
三、筹资活动产生的现金流量吸收权益性投资所收到的现金借款所收到的现金
100.
0300.
0300.
0300.0现金流入小计
100.
0300.
0300.
0300.0偿还借款所支付的现金
100.
0300.
0300.0偿还利息所支付的现金
0.
05.
616.
816.
816.8偿付股利所支付的现金
77.
6929.
91052.
61316.
31580.0现金流出小计
77.
6935.
51169.
41633.11__
6.8筹资活动产生的现金流量净额
77.
6835.
5869.
41333.
11596.8
四、现金及现金等价物增加额
459.553__.
26185.
07479.2__
73.5单位:万元8.4资产负债表资产负债表单位万元第六年第七年第八年第九年第十年资产流动资产:货币资金
459.553__.
26185.
07479.2__
73.5应收帐款
68.
9827.
31103.
01378.
81654.6存货流动资产合计
528.
46216.
47288.
08858.
010628.1固定资产原值固定资产原值减:累计折旧固定资产净值无形资产:
200.
0200.
0200.
0200.
0200.0减:累计摊销
120.
0140.
0160.
0180.
0200.0无形资产净值
80.
060.
040.
020.
00.0资产合计
608.
46276.
47328.
08878.
010628.1负债及权益流动负债:应付帐款
68.
9827.
31103.
01378.
81654.6短期借款
100.
0300.
0300.
0300.0负债合计
68.
9927.
31403.
01678.
81954.6所有者权益实收资本
80.
080.
080.
080.
080.0盈余公积
51.
7619.
9701.
8877.
61053.4未分配利润
407.
84649.
35143.
26241.
77540.2所有者权益合计
539.
55349.
25925.
07199.
28673.5负债及所有者权益合计
608.
46276.
47328.
08878.
010628.1附录附录一目前脑胶质瘤的各种治疗手段及作用对比治疗手段在目前治疗手段中的地位治疗作用手术治疗主要治疗手段,
(1)治愈;
(2)减压;
(3)减少肿瘤细胞;
(4)明确病理诊断;
(5)为其他治疗方法提供途径由于胶质瘤组织与正常组织的界限很难分清,导致切除不彻底,复发性高放射治疗主要的辅助治疗
(1)恶性脑胶质瘤术后的辅助治疗;
(2)无法手术或对放疗特别敏感的肿瘤;
(3)部分切除的良性或恶性胶质瘤术后其疗效主要受到放射强度和肿瘤细胞的抗拒性影响化学药物治疗防止肿瘤复发化疗对进一步杀灭残留肿瘤细胞起到很重要的作用与放疗相比,因为BBB和肿瘤细胞的耐药性等因素,化疗对脑胶质瘤的治疗效果还不理想放射外科手术治疗特殊病例的治疗主要应用于手术无法切除的良性肿瘤和边界清晰小的恶性肿瘤不常用于胶质瘤的治疗新的辅助疗法多数处于试验阶段目前多数还在动物试验和临床试验阶段,尚无大量应用于临床的疗效确切的药物附录二“交立克”的前期市场调查报告
1、调研目的医护人员对现有的脑胶质瘤药物治疗的评价以及对脑靶向基因药物的了解程度;目前的药物治疗手段对胶质瘤的治疗效果;医师对交立克的__和心理可接受程度;交立克的市场容量
2、调研方式以调查问卷和访谈相结合的方式进行调研
3、调研对象相关科室的医师,病房护士,药房药师
4、调研时间2006年03月20日到4月7日
5、样本分布药品首先在郑州做临床__,首选郑州市5家三级以上医院,根据药品治疗特点在放疗科、肿瘤科、脑外科等科室以及药房和病房(护士)进行调研具体样本分布如下调查地点有效样本数合计脑外科放疗科肿瘤科药房病房护士郑州大学第一附属医院4221211河南省肿瘤医院2232312河南省人民医院3332415郑州大学第五附属医院221128河南省中医学院一附院222129合计
131111713556、调研结果
6.1背景资料分析处方药品的营销不同于一般商品,其使用的决策者为位医师,__决策者为医院及药房,回访对象为医师和护士,拟定调查对象为医师、药房药师和病房护士脑胶质瘤的诊断和治疗行为主要集中于脑外科、放疗科、肿瘤科,所以医师调研样本在此三个科室选择鉴于肿瘤诊断和治疗过程中病情的发展对患者保密,不便对其进行访谈,因此本调研未采集患者样本本次调查的样本的分布广泛合理,代表性强,能在一定程度上反映出交立克的市场前景
6.2交立克的市场分析对靶向基因治疗的了解此问题主要针对相关科室的医师进行调查,以访谈和问卷结合的方式进行,调查表明大部分主治医师对医药科学的前沿问题比较__,对靶向和基因治疗的了解程度比较高,问卷调查结果如右图对交立克的接受程度赛恩以全新的医药理念来设计药物,交立克是基因纳米制剂在脑肿瘤疾病治疗领域的一项重大突破,医护人员对其未来的治疗效果表现出了极大兴趣经过调查人员对交立克的药理学和药动学特点的详细介绍和解释后,多数被访者表现出对交立克的期待具体的问卷调查结果如右图对交立克__期望被访对象均表示如果交立克的疗效确切,即使交立克的定价较高也能被多数医师和患者接受问卷调查显示被访对象对交立克__的期望值集中于200~400元/支(规格6ml),具体结果如下治疗过程中病人的生活生命质量根据与医师和病房护士的访谈,了解到由于手术创伤和放射治疗严重副作用(主要为对神经细胞的损伤),脑胶质瘤患者的尤其是恶性患者生活生命质量很差市场容量的估计根据调查结果,所调查5家三级以上医院每年住院治疗的脑胶质瘤患者共计约有1500例,就当前医疗手段每例患者每年平均花费约1万~5万元,费用主要产生于手术治疗和化学药物治疗附录三“交立克”核心技术资料
1、技术背景1.1反义基因治疗(Antisensegenetherapy)与肿瘤随着分子生物技术的发展“反义基因疗法”越来越受到人们的重视,反义基因疗法对最终攻克肿瘤治疗难题有重大的意义,脑靶向质粒脂质体为反义基因药物治疗脑部肿瘤提供了一个崭新的策略,是当今新型脑部肿瘤药物的发展方向反义寡核苷酸AntisenseOligonucleotide技术是近十几年迅速发展起来的旨在利用碱基互补配对原则而选择性抑制特定基因的__、转录或翻译的一种新的生物工程技术AS-ODN主要以两种方式在核内发挥作用,一是和RNA或DNA特异结合形成空间位阻效应,二是和RNA结合后激活RNaseH酶特异地降解靶RNA,通过这两种方式在__,转录,剪接,mRNA转运及翻译等水平上抑制基因的表达,它这一特点对肿瘤治疗意义重大肿瘤的发生与基因的突变密不可分,异常蛋白的表达是肿瘤发生发展前提根据特定基因模板设计的反义寡核苷酸可以特异性抑制该基因编码蛋白的表达,与普通的肿瘤治疗药物相比反义寡核苷酸药物有无可比拟的优势反义寡核苷酸治疗多是针对人基因的某个异常片段进行治疗,对正常基因没有影响或影响作用很小,使得反义寡核苷酸类药物的特异性很高,副作用小,使接受治疗的患者免受严重副作用的折磨,大大提高了病人的生活和生命质量1.2基因药物的脑内传输反义基因药物应用于脑部肿瘤治疗的最大障碍在于其很难传输到病变部位反义基因药物需要传输到脑部病变细胞的细胞核内才能发挥最大的作用,要使药物到达该部位需要穿透多重生物膜屏障游离的反义基因药物,无论是可以表达反义寡核苷酸的质粒还是反义寡核苷酸本身,在体内都很容易被广泛分布于全身的核酸酶DNase或RNase所降解,所以使用游离的反义寡核苷酸基因药物治疗疾病时多采用将药物直接注射到病变部位的显微注射法这种方法的缺点是注射的药物的分布仅局限于注射部位附近,对于实体肿瘤来说,要想药物在整个肿瘤分布需要多次注射;此外显微注射法给药量小,为了维持一定的药物浓度,必须连续重复给药,给病人造成了极大的不便在大多数的情况下,反以基因药物在体内的应用是采用病毒载体和纳米载体来传输的,由于病毒载体的潜在的危险性,纳米载体介导的体内转运成为基因药物的最佳途径1.3脂质体(Liposome)脂质体是由脂质双分子层组成,内部为水相的闭合囊泡脂质体的结构类似于生物膜,故又称人工生物膜(ArtificalBiologicalMembrane).脂质体是目前获得美国FDA批准也是市场上销售的唯一一种纳米制剂,制备脂质体所使用的材料为磷脂和胆固醇,在体内可以顺利降解,相对于病毒载体的和其他阳离子载体,其毒性小,载药量高,是在当前基因载体领域里最具有实用价值的一种纳米载体
2、技术创新点2.1TROJANHORSE治疗策略以脂质体为基本骨架,制备一种具有“拟病毒”特性的复合纳米载体,通过静脉注射的方式给药,使其能够逃避RES的摄取而长时间维持较高的血药浓度;能够顺利地穿过BBB,到达脑内;能够特异性的粘附于病变细胞并诱发细胞的内吞进入细胞内;能够顺利地穿过核膜到达细胞核并释放反义基因药物这种复合载体具有生物逃逸的特性和穿膜作用,它可以内源性物质一样在血液中__存在,能透过BBB,又可以像病毒一样能顺利地穿透细胞膜及核膜将反义基因药物释放于细胞核这种制剂能够“欺骗”人体,并利用人体自身的作用转运药物,我们称之为“TROJANHORSE”治疗策略2.
2、技术创新靶向药物要想达到靶向治疗的目的,首先要满足两个条件,首先药物载体必须能够到达靶细胞然后被靶细胞识别或者能够识别靶细胞;其次药物在释放位点能达到所需要的药物浓度并且不产生不能允许的毒性病毒在体内传染效率高,可达到80%以上,但是病毒基因载体有潜在的危险性,最近研究表明病毒载体可以诱发严重的免疫反应,同时也无法通过BBB(BBB),所以病毒载体不适合用于脑部肿瘤的治疗纳米载体包括阳离子脂质体,阳离子纳米粒,阳离子蛋白质和一些阳离子高聚物,这些载体与反义基因药物形成的复合物在体液环境下受到负电蛋白和高分子以及离子的影响多数发生聚沉;经静脉注射以后,可迅速被细胞和巨噬细胞从循环中清除,导致药物主要分布于RES器官(主要分布于肝,脾,其次为肺,淋巴结和骨髓)对于靶向脑部肿瘤的药物来说,被RES所清除就意味着药物完全无法发挥作用此外这些载体和病毒载体同样也面临无法穿过BBB的难题我们研制成功的脑靶向脂质体不同于以往脂质体和其他纳米载体的设计第一,脑靶向脂质体的是以中性磷脂和少量负电性磷脂为原料,最终的成品带有少量的负电荷,体内应用时可免受负电物质的影响而避免聚沉的发生第二,脑靶向脂质体能够逃避RES的摄取,具有“隐形”的特性,使药物能够长时间的维持较高的血药浓度第三,脑靶向脂质体可以顺利通过BBB和微血管壁,能够在全脑分布第四,脑靶向脂质体能够顺利穿透细胞膜和核膜而到达细胞核,最终将反义基因药物即编码反义寡核苷酸的质粒释放于细胞核脑靶向脂质体就像定位导弹一样将反义基因药物释放于脑部肿瘤细胞的细胞核内,可用于多种反义基因药物的脑部传输,是一种应用前景十分广阔的基因载体
3、技术可行性论述3.1纳米脂质体在医药领域的应用上世纪70年代初期,Gregoriadis首先提出应用脂质体作为β-半乳糖苷酶载体治疗糖原累积疾病后,人们开始应用脂质体作为药物的载体系统控制药物的释放,提高药物的靶向性,以减少药物的毒性和副作用,提高药物的疗效脂质体作为一种可生物降解,__性和无免疫原性的药物载体,一经发现,就引起了生物学家和药学家的兴趣来世界各国的研究者深入研究了脂质体的组成,粒子大小,稳定性,药物代谢动力学,药效学等各方面的特性,并在均一,稳定,粒径较小的脂质体制备;药物荷载量增加;脂质体体内循环时间的延长等方面取得了长足的进展当前,在医药领域脂质体主要用于可控释放和体内靶向给药,近__年,用脂质体包裹的药物,疫苗产品不断问世,证明了脂质体作为新型药物载体的强大生命力1988年第一个脂质体制剂,即含益康唑的脂质体凝胶“PevaryLipogel”在瑞士注册临床试验证明每天使用一次的效果相当于硝酸益康唑霜剂每天两次的效果,现已在瑞士,意大利,比利时和挪威等国销售随着脂质体技术的不断发展,1990年第一个注射型脂质体给药系统AmBisome问世,该制剂有效降低了两性霉素B在治疗过程中引起的急性肾毒性而在1995年世界第一个抗癌药物脂质体——阿柔比星脂质体Doxil(美国SEQUUS制药公司)在美国获得FDA批准用于治疗人体免疫缺陷病毒(HIV)引起的难以医治的卡巴瘤(KS),意味着脂质体开始真正应用于肿瘤的治疗临床试验证明Doxil降低了心脏毒性,可以将高于正常皮肤5~10倍的阿柔比星脂质体输送到KS部位,总体反应率高于80%脂质体技术已经广泛应用于各种药物的传输,事实证明脂质体载药量高,毒性小,大大提高了药物的生物利用度,降低副作用,同时也是基因药物的优良载体随着脂质体技术和基因技术的进一步发展脂质体必将成为医药领域的新宠3.2质粒在基因治疗中的应用基因治疗是指以改变人的遗传物质为基础的生物医学治疗基因治疗通过一定方式将人的正常基因或有治疗作用的DNA顺序导入人体的靶细胞,去纠正基因的缺陷或者发挥治疗作用自从1995年5月美国国立卫生研究院(NIH)批准了美国第一例临床基因治疗腺苷脱氨基酶缺乏——一种严重免疫缺乏综合症儿童的临床试验以来,基因治疗已从单基因遗传病扩展到多个病种,至今世界上以有近600个基因治疗方案用于临床试验,治疗病例超过6000例,其中用于癌症的占
65.6﹪在肿瘤基因治疗临床试验方面,我国目前以有重组腺病毒P53抗癌注射液、TK基因治疗恶性脑胶质瘤、树突状细胞为基础的肿瘤体细胞治疗与基因治疗、白细胞介素-2基因工程胃癌细胞瘤苗、Hsv-TK基因治疗肝癌,而且几个基因治疗方案已进入了临床试验阶段另外,深圳市赛百诺基因技术有限公司研究__的重组腺病毒P53抗癌注射液__N-1作为世界上第一个基因治疗药品于2003年10月经国家SFDA批准进入了试生产阶段,产生了巨大的社会效应用于基因治疗的载体主要有质粒和病毒病毒载体曾经被用作抗原基因载体,现在主要用质粒构建载体由于细菌质粒本身没有很强的免疫原性,这对保证质粒在体内__稳定地表达有重要意义质粒载体必须是能在大肠杆菌中高拷贝地扩增,而在动物细胞内则能高效表达,但不__,也不含有向宿主细胞基因组内整合的序列载体一般以PBR322或PUC质粒为基本骨架,它们能在大肠杆菌内扩增,但不能在哺乳动物细胞内__通常使用的质粒载体有PBR
322、PUC
18、PUC
19、PUC
118、PUC119等常用的质粒载体启动子多为来源于病毒基因组的巨细胞病毒CMV早期启动子,具有很强的转录激活作用,带有细菌__子ORI,真核生物的启动子和PolyA加尾__启动子大多来源于病毒基因组,如CMV、PSV、LTR等,其中以CMV的转录活性最高,PolyA序列具有保证mRNA在体内的稳定性的作用,这种稳定性因PolyA来源不同而异,目前认为较好的PolyA来自于牛生长激素基因或兔B球蛋白基因另外,还可包含一些合适的增强子、终止子、内含子、免疫激活序列及多聚腺苷酸__等筛选载体可以选用卡那霉素、氨霉素或新霉素等抗性基因这些都为我们的研究提供了坚实的理论和技术基础我们在研究中构建了一个编码人表皮生长因子受体反义mRNA的表达质粒载体,通过将表达载体用脂质体导入靶细胞,该DNA转录反义RNA,反义RNA即与相应的mRNA特异性结合,从而阻断mRNA的翻译反义RNA用于基因治疗具有特异性强,只阻断靶基因的翻译表达,反义RNA只与特定mRNA结合,不改变基因结构,最终会被RNase降解,不残留,适应于多种疾病,亦可同时用多个反义RNA封闭多个基因,有可能应用于多基因病这套技术在体外试验以及动物实验中经过了反复的验证论证,已经非常成熟,有非常好的临床应用前景
4、治疗胶质瘤的脑靶向脂质体4.1载体PEGYLATEDIMMUNOLIPOSOMES的构建如左图所示,以一脂质体为基本框架,偶联不同的物质使载体获得不同的特性
①偶联PEG聚乙二醇(PEG)是一种的药用辅料,毒性小,常用作润湿剂和助悬剂该制剂将PEG偶联到部分参与脂质体制备的十八烷基磷脂酰乙醇胺上,使脂质体表面覆盖一层PEG,从而逃避RES的摄取,达到长循环的目的
②偶联__b(targetingantibody)__b是单克隆抗体的简称,该抗体用于特异性识别细胞表面的受体,从而介导生物膜(BBB,MB)穿透,细胞粘附和细胞吞噬,是载体构建的核心部分4.
2、试剂及材料HIR__b(靶向人胰岛素的单克隆抗体抗,基因工程制备)POPC(1-棕榈酰-2-油酰-磷脂酰胆碱,Lipoid)DDAB(双十二烷基二甲基溴化铵,Lipoid)DSPE-PEG2000(2-硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇,ShearwaterPolymers)DSPE-PEG2000-__lemide(2-硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇-顺丁烯二酰亚胺ShearwaterPolymers)2-iminothiolane(2-亚氨氢氯化硫醇,Sig__)4.
3、PILPEGYLATEDIMMUNOLIPOSOMES的制备及质粒的荷载
①取POPC,DDAB,DSPE-PEG2000-__lemide,DSPE-PEG2000,置于圆底烧瓶中,加入于氯仿/乙醇混合液适量,振摇使脂质完全溶解,置于旋转蒸发器上,常温下真空旋转蒸发溶剂得均匀干膜加入Tris·HCl缓冲溶液,超声分散
②加入超螺旋的质粒DNA适量,涡旋振荡2min旋转蒸发除去部分水分,将圆底烧瓶放入干冰冷冻5min,取出放入水浴锅,40℃水浴2min,重复本步操作10次加入超纯水适量稀释,涡旋混匀依次用400__,200__,100__和50__的聚碳酸酯膜加压过滤
③加入胰腺内切酶Ⅰ和外切酶Ⅲ,37℃孵育1h,加入EDTA溶液
④加入HIR__b和2-iminothiolane适量,室温下反应24h
⑤用琼脂糖凝胶柱,以PH=
7.0的HEPES缓冲溶液为洗脱剂进行洗脱,除去未反应的质粒及多余HIR__b4.
4、PIL的质量控制及动物实验结果
①粒径分布激光纳米粒度仪(Leeds-NorthrupSt.peter__urgFL)测量PIL的粒径,如左图所示,PIL的平均粒径为86__,大小和普通的病毒相当
②质粒的包埋与抗体偶联分别用32P和3H标记的质粒DNA和__B,PIL植制备结束后用经琼脂糖凝胶柱洗脱纯化,监测放射强度如右图所示收集洗脱液至10ml时,PIL浓度最大,DNA和__B的放射峰重叠收集洗脱液到18ml时,PIL基本收集完毕后面的__B和DNA放射峰,表明未反应的__B和DNA被洗脱出来
③PIL在脑内及体内主要器官的分布如图所示,A、C、D、E、F、G分别为注射了载有半乳糖苷酶基因脑靶向脂质体的恒河猴的脑、肝脏、脾脏、心脏、骨骼肌及脂肪组织的冰冻切片图中蓝色的深浅表示脂质体在该脏器分布的多少B表示没有注射脂质体的恒河猴的脑组织冰冻切片由图可以看出,以HIR__b修饰的脂质体主要分布于脑部和肝脏,其次为脾脏,而在其他组织和脏器内的分布却很少表明该脂质体有良好的脑靶向性
④对植入小鼠脑内的胶质瘤的治疗效果将人类的U87神经胶质瘤细胞植入小鼠的脑内,分别于第
5、
12、
19、26天静脉注射生理盐水、荧光酶素基因和EGFR反义基因脂质体如左图所示,注射生理盐水和荧光酶素脂质体的小鼠ED50为18天,而注射EGFR反义基因脂质体的小鼠ED50则为36天,且该组小鼠的生存期均超过了30天,有效率为100%表明EGFR反义基因治疗对胶质瘤细胞的生长有很强的抑制作用,适合作为脑胶质瘤的治疗药物附录四团队人员简介部门人员配置管理团队周天洋,刘贝贝卫华玲技术团队绍彦江,王蕾,王谨产品团队绍彦江,周建超,刘贝贝,王谨周天洋郑州大学药学院2004级硕士研究生,药物分析专业,研究方向为以反义核酸-多聚阳离子超分子纳米组装体为体内传输系统的肿瘤靶向基因治疗本团队的负责人,负责整个计划的构思和团队人员的组织及任务分配公司成立后主要负责管理工作和公司战略计划的制定及实施刘贝贝郑州大学商学院2005级硕士研究生,金融专业,熟悉商品的市场运作,负责交立克的市场分析,营销策略的制定及辅助行政管理工作周建超郑州大学药学院2005级硕士研究生,药物分析专业,研究方向为以反义核酸-聚氰基丙烯酸正丁酯为体内传输系统的肿瘤靶向基因治疗主要负责产品委托生产事宜,并负责协同进行市场调查及市场分析位华玲郑州大学商学院2005级硕士研究生,金融专业,本科修习会计专业,业务能力强,专业基础知识扎实,主要负责本公司的财务工作绍彦江郑州大学药学院2005级硕士研究生,药物分析专业,研究方向为以脂质体为体内传输系统的反义核酸肿瘤靶向基因治疗主要负责产品的生产,质量监督和生产工艺的改进,并负责组织新产品的研究与__王蕾郑州大学基础医学院2004级硕士研究生,病理与生理专业,研究方向为高纯度质粒DNA的制备主要负责质粒DNA研究与改进并协同完成质粒DNA的委托生产事宜王谨郑州大学基础医学院2004级硕士研究生,病理与生理专业,研究方向为胃癌反义基因治疗主要负责研究癌症的发生机制及协同完成质粒DNA的构建,并负责医院__人员的专业培训工作董事会总经理技术团队产品团队管理团队董事会总经理项目一采购运输部研发部人力资源部财务部售后服务部营销部A1B2C2D2E2F2F1E1D1B1C1A2项目二一理念__;立足郑州__上市推向全国中心城市;获得利润拓展产品树立品牌占据领先良性发展获得利润新药上市上市后医院__相关科室填进药申购单药事管理委员会药房发药给患者医师开具处方药品进入门诊或病房药房上市前医院__药品__决策过程示意图产业竞争对手弱由于治疗方式为多药联合,因此不构成威胁供方弱生物制剂类厂商众多,侃价能力弱买方强医生决策,较强的侃价能力替代品弱放疗化疗配合使用,不冲突,无替代威胁潜在进入者弱进入壁垒高,技术壁垒高。