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实验
二、酶的专一性【实验目的】验证酶的专一性【实验原理】酶具有高度的专一性本实验以唾液淀粉酶对淀粉作用为例,来说明酶的专一性淀粉无还原性,唾液淀粉酶水解淀粉生成有还原性的麦芽糖,能使班氏试剂中的二价铜离子还原成一价亚铜,生成砖红色的氧化亚铜沉淀淀粉酶不能催化蔗糖水解生成具有还原性的糖蔗糖本身无还原性,不与班氏试剂产生颜色反应本尼迪特试剂是斐林试剂的改良试剂,它与醛或醛(酮)糖反应也生成Cu20砖红色沉淀它是由硫酸铜、柠檬酸钠和无水碳酸钠配置成的蓝色溶液,可以存放备用,避免斐林溶液必须现配现用的缺点【实验材料】
(1)恒温水浴
(2)沸水浴
(3)试管试管架【实验试剂】1%淀粉溶液
2.1%蔗糖溶液
3.pH
6.8缓冲液
4.班氏试剂无水硫酸铜
17.4g溶于lOOmL热水中,冷却后稀释到150mL.取柠檬酸钠173g无水碳酸钠100g和600mL水共热,溶解后冷却并加水至850mL.再将冷却的150mL硫酸铜溶液倾入本试剂可长久保存【实验操作】稀释唾液的制备将痰咳尽,用水漱口,再含蒸德水30ml作咀嚼运动,2分钟后吐入烧杯中煮沸唾液的制备取一部份稀唾液于试管中,再放入沸水浴中煮沸5分钟,使唾液淀粉酶变性失活取试管三支,标号后按下表操作(单位滴)【实验思考】本实验结果如何证明酶的专一性pH
6.8缓冲液1%淀粉溶液1%蔗糖溶液稀释唾液煮沸唾液混匀37°C水浴10分钟班氏试剂沸水浴中煮沸5分钟结果120105202201052032010520。