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护理开题报告3护理开题报告范文
2.不同机械清洗方法对内镜生物膜的去除效果比较 1研究对象
①选择制作内镜材料的特氟龙Teflon管,直径4mm,长度200cm,环氧乙烷灭菌后备用
②分组方法 Ⅰ组灭菌水空白对照; Ⅱ组Olympus可重复使用内镜清洗刷; Ⅲ组Ruhof一次性使用含酶内镜清洗刷; Ⅳ组PullThru一次性使用内镜清洗刷
③Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组分别刷洗1次、2次、3次 2研究因素
①于Olympus公司生产的统一规格、批号、日期的可重复使用内镜清洗刷
②于Ruhof公司生产的统一规格、批号、日期的一次性使用含酶内镜清洗刷
③于PullThru公司生产的统一规格、批号、日期的一次性使用内镜清洗刷 3研究方法
①建立内镜生物膜模型 a培养临床别离的大肠杆菌取少量斜面保种的大肠埃希氏菌菌株接种于无菌Muller-Hinton肉汤培养基获得纯种菌液 b制作大肠杆菌菌悬液用倾注平板法调整细菌浓度为106CFU/ml备用 c制作的细菌浓度为106CFU/ml大肠杆菌菌悬液与大肠杆菌培养基以101比例混合,放入灭菌的500ml的玻璃瓶内,持续37℃恒温灌流Teflon管腔;蠕动泵控制速度在80~100ml∕h,以模拟临床操作中内镜污染的条件,持续灌流10天,每日更换大肠杆菌菌悬液和培养基实验重复5次,每次试验用的Teflon管在恒温箱中以同样方式盘放
②使用不同机械清洗方法对内镜生物膜进行处理 a持续灌流10天后,取出Teflon管,排空管腔内的灌流液,用浸有75%酒精的无菌纱布擦干Teflon管外外表弃去Teflon管的两端各5cm,用无菌手术刀片以Ⅰ组16cm,Ⅱ组16cma、16cmb、16cmc,Ⅲ组16cmd、16cme、16cmf,Ⅳ组16cmg、16cmh、16cmi,分段切开并标记 bⅠ组为空白对照组,放入盛有无菌PBS的容器中进行冲洗,轻轻翻转容器5次,弃去PBS液用吸管吸取剩余的溶液,重复3次后取出,洗掉浮游菌,用无菌干纱布吸净多余液体将准备好的Ultrasnap拭子擦拭Teflon管内管腔,使用ATP生物荧光法检测有机物剩余量用无菌手术刀片将长16cm的管腔分别切为5段3cm和1段1cm长的Teflon管 cⅡ组为Olympus清洗刷组,Teflon管a、Teflon管b、Teflon管c分别浸泡在盛有无菌PBS的容器中各刷洗一次、二次、三次刷完后每段Teflon管分别放入盛有无菌PBS的容器中进行冲洗,轻轻翻转容器5次,弃去PBS液用吸管吸取剩余的溶液,重复3次后取出,洗掉浮游菌,无菌干纱布吸净多余液体将准备好的Ultrasnap拭子擦拭Teflon管内管腔,使用ATP生物荧光法检测有机物剩余量用无菌手术刀片将长16cm的管腔分别切为5段3cm和1段1cm长的Teflon管 d3cm长的Teflon管为收集管腔内的细菌,试验管纵向切开等分为两局部,每段管腔的内外表用一个2mm宽的消毒小木棒进行擦刮,与擦刮棒一起放入盛有5mlPBS的试管中这5个试管先进行超声水浴10min42~47KH、20℃,然后使用漩涡振荡器振荡1min振荡后的悬浮液 e振荡后的液体进行梯度稀释并重复接种3个平板,37℃培养48h后进行细菌菌落学计数 f1cm长的Teflon管行荧光染色后进行CLSM检查 dTeflon管Ⅲ组和Ⅳ组处理方法同Ⅱ组 4评价方法
①细菌菌落计数收集后的菌液进行细菌梯度稀释经震荡混匀器充分震荡均匀后的液体取1ml接种至直径90mm的无菌平皿,每个平皿分别倒入无菌的45℃-48℃营养琼脂15ml-18ml,边倾注边摇匀待琼脂凝固,于37℃培养箱内培养24h后计数培养后观察菌落生长情况记录平板菌落数计算细菌总数菌落数/镜=2个平皿菌落数平均值×2细菌计数的结果用实际菌落数的常用对数logcfu/cm3为标准菌落计数单位来表达菌落计数换算为标准菌落计数单位实际菌落数cfu/cm3=肉眼可计菌落数×稀释倍数/体积,取实际菌落数的常用对数logcfu/cm3为标准菌落计数单位
②ATP生物荧光法检测准备好Ultrasnap拭子并确定其外外表干净且枯燥翻开盖子,将Ultrasnap拭子放入ATP生物荧光法检测仪中后关闭盖子开始检测,15s后观察结果读数结果判断0~45RLU为合格,≥46RLU为不合格
③CLSM检测 5统计学处理应用SPSS
13.0软件进行处理同种处理因素不同水平采用方差分析中的one-wayANOVA进行检验不同处理因素间的两两比较采用LSD-t检验 ××医科大学内科消化学组始建于50年代1955年引进了硬式胃镜,1957年开展了软式胃镜,1973年在国内率先开展了纤维结肠镜检查在70年代初成立了消化专科的同时,成立了生化实验室,1979年组建全军消化医学专科中心后,先后建立了微生态实验室及病理检验室,开展了厌氧菌培养和肠道菌群分析,1990年初增建了相对独立的细胞培养室、分子生物学实验室、胃肠激素室,使消化内科实验室成为初具规模、在国内消化界有较大影响力的临床实验室 现该实验室为全国重点学科的中心实验室,先后完成了国家自然基金课题10项;军队重点攻关和广东省各类基金20余项本实验室现有面积约420平方米,拥有细胞培养及小动物室等多个相对的独立实验室和三个无菌工作间,现已具备紫外-可见分光光度计BIO-RAD、超净工作台、CO2培养箱、空气浴与水浴摇床、生化免疫、病理、分子生物学、胃肠激索、微生态等实验室配有PCR扩增仪,显微图像分析仪、荧光分光光度计、-80℃低温冰箱、荧光显微镜、倒置显微镜、低温超速离心机、Bio-Rad酶标仪、低温高速离心机、微量高速离心机、核酸定量仪、ScanArray5000扫描仪、各种电泳装置、核酸转移装置、等主要试验用仪器,是国内唯一能开展多种需氧及厌氧菌培养的临床实验室,均状态良好,运行正常 ××医院中心实验室、校本部实验室,设备先进、技术力量雄厚,P级实验室、共聚焦显微镜等仪器,在本课题需要时可随时使用 研究根底 前期工作中,我们参考了国内外大量文献,进行了内镜生物膜模型的建立和不同清洗剂去除内镜生物膜的实验研究 其中内镜生物膜模型的建立通过大肠杆菌在内镜Teflon管上生物膜的形成与培养时间、流速、温度的关系,研究形成了成熟稳定的黏附于内镜Teflon管上的生物膜研究发现细菌更容易在Teflon管超微结构上微小的沟纹缝隙中积聚,因此在这些缝隙中更易形成生物膜,提示在内镜的手工清洗中要注意选择适宜的刷子及适当的刷洗方式,以免划伤内镜管腔的内外表,从而降低细菌的黏附 起止日期论文工作进度主要内容、完成要求 20XX.12-20XX.02准备实验用品,进行临床内镜管道的收集及评价 20XX.03-20XX.06进行手工刷洗对内镜生物膜清洗效果的处理并收集数据 20XX.07-20XX.08数据,统计分析 20XX.9-20XX.11完成课题,撰写论文 20XX.06毕业。