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实验四种子生活力的快速测定(TTC法)【实验目的】种了生活力是指种了的发芽潜在能力和种胚所具有的生命力(通常指一批种子中具有生命力种子数占种子总数的百分率)种子贮藏过程中必须维持种子是有活力的,因此定期进行生活力的检测是非常重要的测定种子生活力方法常用发芽率测定法,该法是指在最适宜的条件下,在规定天数内发芽的种子占供试种子的百分数它是决定种子品质和实用价值大小的主要依据,与播种时的用种量直接有关但是常规方法(直接发芽)测定种子发芽率所需的时间较长,对于处于深休眠状态的种子,儿乎难于应用特别是有时为了应急需要,没有足够的时间来测定种子发芽率,所以有必要根据种子的生理特性建立起一套快速测定种了生活力的方法本实验目的掌握植物种子生活力检测的基本原理及快速鉴定植物种子生活力的方法【实验原理】凡有生命活力的种子其胚在呼吸作用过程中都会发生氧化还原反应,而无生命活力的种子胚则无此反应当TTC渗入种胚的活细胞内,并作为氢受体被脱氢辅酶(NADH2或NADPH2)上的氢还原时,便由无色的氯化三苯基四氮哩(TTC,可溶于水)变为红色的三苯基甲簪(TTF,不溶于水)【器材与试剂】
1、仪器设备恒温箱,电子天平,培养皿,烧杯,镣子,刀片,滤纸,琼脂
2、实验试剂
0.5%TTC溶液,配好的溶液需避光保存,若呈红色时,则不能再用
3、实验材料小麦种子、大麦种子、玉米种子、、蚕豆种子、大豆种子【实验步骤】
(1)浸种将待测种子在30-35°C温水中浸种(小麦、大麦种子6-8h;玉米、蚕豆种子5h左右;粳稻种子2h),以增加种胚的呼吸速率,使显色迅速
(2)显色取吸胀种子200粒,用刀片沿种子胚的中心线纵切为两半,将其中一半置于30°C恒温箱中
0.5-1h,另一半在沸水中煮5min杀死种胚,作为对照观察;向上述样品中加入TTC作染色处理,凡被染为红色的种子是活种子【结果与分析】分别计算经不同方法处理的植物种子的生活力用百分率来表示,活种子百分率=数种子总数X100%【注意事项】活种子
1.TTC见光易分解,最好现配现用如需贮藏则应贮于棕色瓶中,并放在阴凉黑暗处,如溶液变红则不可再用,处理时药液以浸没种子为度,温度•般以25-35C为宜。