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聚酰胺的使用方法聚酰胺溶解度:溶于浓盐酸,甲酸,微溶于醋酸,苯酚等溶剂,不溶于水,甲醇,乙醇,丙酮,乙醛,氯仿和苯等常用有机溶剂,对碱较稳定,对酸的稳定性较差,尤其是无机酸,在温度高时更敏感吸附原理聚酰胺是由酰胺键聚合形成的高分子化合物其酰胺基可与羟基酚类,酸类,醍类,硝基等化合物以氢键形成结合而被吸附,其脂肪长链可作为分配层析的载体聚酰胺在含水系统中层析时,聚酰胺作为非极性固定相,其层析行为反向柱层析;在非水溶剂系统时,聚酰胺作为分配层析的载体,其层析行为为正向柱层析应用范围聚酰胺特别适应于多元酚类化合物的分离,如黄酮、醍类、酚酸、含黑基化合物、竣基化合物等例如葛根素中提取葛根黄酮、茶叶提取茶多酚、人参中提取人参皂甘、银杏叶中提取银杏黄酮、甘草中提取甘草皂甘、甜叶菊中提取甜菊甘、发酵液中提取维生素和抗生素等成份对糅质吸附强,用于将植物粗提物中的糅质除去聚酰胺的前处理新买的聚酰胺取聚酰胺以90-95%乙醇浸泡,不断搅拌,除去气泡后装入柱中用3-4倍体积的90-95%乙醇洗脱,洗至洗脱液透明并在蒸干后无残渣(或极少残渣)再依次用2-
2.5倍体积5%NaOH水溶液、1倍体积的蒸储水、2-
2.5倍体积的10%醋酸水溶液洗脱,最后用蒸储水洗脱至pH中性,备用用过的聚酰胺一般用5%NaOH水溶液洗脱,洗至NaOH水溶液颜色极淡为止有时因某些革柔质与聚酰胺又不可逆吸附,用NaOH水溶液很难洗脱,可用5%NaOH在柱中浸泡,每天将柱中的NaOH水溶液放出一次,并加入新的5%NaOH水溶液,这样浸泡一周后,糅质可基本洗脱完然后用蒸偏水洗脱至pH8-9,再用2倍量的10%醋酸水溶液洗脱,最后蒸储水洗脱至pH中性,重复使用聚酰胺柱色谱的操作
1、装柱一般将颗粒状聚酰胺混悬于水中,使其充分膨胀,然后装柱,让聚酰胺自由沉降;当用非极性溶剂系统时候,则用组分中低级性的溶剂装柱
2、稀释适当浓度上样一般每100ml聚酰胺上样
1.525g,样品先用洗脱溶剂溶解,浓度为20%-30%水溶性化合物直接上样;若提取物水溶性不好,则用挥发性有机溶媒溶解、拌适量聚酰胺、挥干或减压蒸干、干法装入柱顶
3、水洗先用水洗脱
4、醇洗在水中递增乙醇浓度至浓乙醇溶液,或氯仿、氯仿-甲醇,递增甲醇至纯甲醇洗脱若仍有物质未被洗脱,可用稀氨水或稀甲酰胺溶液洗脱,分段收集
5、找到最佳吸附比先小量试验找到最佳吸附比
6、放大根据小试及最佳吸附比进行放大试验
7、聚酰胺的回收使用过的聚酰胺一般用5%氢氧化钠溶液洗涤,然后水洗,再用10%醋酸液洗,然后用蒸储水洗至中性,即可黄酮类化合物的分离规律对于分离黄酮类化合物来说,聚酰胺是较理想的吸附剂其吸附强度主要取决于黄酮类化合物分子中的羟基数目与位置一般有以下规律
1、昔元相同,连接糖越多,吸附力越大,流出越慢
2、母核上增加羟基,洗脱速度相应减缓
3、对位、间位酚羟基使吸附能力〉邻位酚羟基
4、不同类型的黄酮的流出顺序一般是异黄酮〉二氢黄酮醇〉黄酮〉黄酮醇
5、分子中芳香核、共朝双键多者则吸附力强,晚出柱
6、若形成分子内氢键则吸附力减弱聚酰胺柱层析的溶剂洗脱系统含水系统非水溶剂系统甲醇-水
(41)氯仿-甲醇
(946)乙醇-水
(21)甲醇-乙酸-水(905苯-甲醇(31/73)5)含水系统洗脱能力碱液,甲醇〉水溶剂洗脱能力与溶剂极性相关可使化合物得到较好的分离选择系统时,可以将样品加入上述溶剂系统中,观察样品在聚酰胺薄膜的层析行为,然后确定溶剂系统聚酰胺薄膜色谱常用的溶剂系统:黄酮体昔元黄酮体背氯仿-甲醇(94:6/96:4)甲醇-醋酸-水
(9055)氯仿-甲醇-丁酮(12:2:1)苯-甲醇-甲酸-水
(41);乙醇(4:1)丙酮-水丁酮(90:6:4/84:8:8)氯仿-甲醇-甲(1:1);异丙醇-水(3:2)30-60%醋酸;氯仿-甲醇-丁酮(6425;10)乙酸乙酸(60:38:2)氯仿-甲醇邛比咤酯-95%乙醇(70:22:8)(6:4)氯仿-甲醇(7:3);正丁醇-乙醇-水(14:5)氯仿-甲醇-甲酸(60:38:2)酚类丙酮-水
(11)苯-甲醇-醋酸(458:4);环己烷-醋酸
(937);10%醋酸醍类丙酮-水
(11);正己烷-苯-醋酸(45:8:4);石油酸-苯-醋酸
(10105)糖类丙酮-水
(11)苯-甲醇-醋酸(458:4);环己烷-醋酸
(937);10%醋酸氨基酸衍生物苯-乙醇(82/91);50%醋酸;甲酸-水(15100/1:1)乙酸乙酯一甲醇一醋酸
(2011);
0.05mol/L磷酸钠-乙醇
(31)生物碱环己烷-乙酸乙酯-正丙醇-二甲基胺(
302.
50.
90.1);水-乙醇-二甲基胺(
88120.1)船体、菇类己烷-丙酮
(41);氯仿-丙酮
(41)凿体昔甲醇-水-甲酸
(60355);乙酸乙酯-甲醇-水-甲酸(50:20:255)聚酰胺的不足及解决方案:聚酰胺柱层析的不足
1.比如机械强度不大,
2.粒度不均匀,分离时流速较慢
3.一些小分子杂质混入的问题采用的解决方案有
1.装柱前先过筛
2.装柱时用5%甲醇或10%盐酸预先除去小分子杂质
3.与硅藻土混合制粒以增加机械强度。