5.病原体特异性M型免疫球蛋白定性检测试剂注册技术审查指导原则

1病原体特异性M型免疫球蛋白定性检测试剂2注册技术审查指导原则34

一、前言5本指导原则旨在指导注册申请人对病原体特异性M型免疫球蛋白6Immunoglobulin M,IgM定性检测试剂注册申报资料的准备及撰写，同时也为技7术审评部门对注册申报资料的技术审评提供参考8本指导原则是对病原体特异性IgM抗体定性检测试剂的一般要求，申请人应依9据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学10依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化11本指导原则是对申请人和审查人员的指导性文件，但不包括注册审批所涉及的12行政事项，亦不作为法规强制执行，如果有能够满足相关法规要求的其他方法，也可13以采用，但需要提供详细的研究资料和验证资料，相关人员应在遵循相关法规的前提14下使用本指导原则15本指导原则是在现行法规和标准体系以及当前认知水平下制定的，随着法规和16标准的不断完善，以及科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将适时进行调整17

二、适用范围18病原体特异性IgM抗体定性检测试剂是指利用酶联免疫吸附法、化学发光法或19磁微粒酶免疫技术等基于抗原抗体反应原理，以特定病原体的特异性IgM抗体为检20测目标，对人血清或血浆样本中病原体特异性IgM抗体进行体外定性检测的试剂本21指导原则适用于进行首次注册申报和相关许可事项变更的产品22232425218体外处理、重组连接、导入宿主细胞、宿主细胞繁殖以及重组子表达等实验过程2192企业外购抗原，则应详述抗原的名称及生物学来源，外购方名称，提交外220购方出具的抗原性能指标及检验证书，详述申请人对该抗原技术指标的要求以及申221请人确定该抗原作为主要原材料的依据供货商应相对固定，不得随意更换

2222.试剂盒所用抗体如抗IgM-□链抗体的制备、筛选、纯化以及鉴定等详细试223验资料，主要包括以下两方面2241企业自制抗体225如使用天然抗原作为免疫原则应明确该天然抗原的来源；如使用重组抗原或其226他人工合成抗原作为免疫原，应提供相应的核酸组分及重组抗原的序列信息申请人227对所选抗体的技术指标要求如外观、纯度、蛋白浓度、效价等，确定该抗体作为主228要原材料的依据2292企业外购抗体，应详述抗体的名称及生物学来源，外购方名称,提交外购方230出具的抗体性能指标及检验证书，详述申请人对该抗抗体技术指标的要求以及申请231人确定该抗体作为主要原材料的依据供货商应相对固定，不得随意更换232申请人应对主要生物原料质控标准的技术要求如外观、纯度、蛋白浓度、效价233等进行确认，并对制备完成的抗原成品进行质量检验以确认其符合标准要求，整个生234产工艺稳定可靠

2353.其他主要原辅料的选择及验证资料，如固相载体、硝酸纤维素膜、反应缓冲236液等，该类原辅料一般均为外购，应详述每一原辅料的外购方名称，提交外购方出具237的每一原辅料性能指标及检验证书，详述申请人对每一原辅料技术指标的要求以及238申请人确定该原辅料作为主要原辅料239240241242的依据

2434.企业内部参考品的原料选择、制备、定值、统计学分析及相关的实验验证244资料应提供对参考品性质确认的其他方法或试剂（建议采用国内已上市的、临床上245普遍认为质量较好的同类试剂）的相关信息246

（六）主要生产工艺及反应体系的研究资料

2471.主要生产工艺介绍，可用流程图方式表示，并简要说明主要生产工艺的确248定依据

2492.产品基本反应原理介绍

2503.包被工艺研究，申请人应考虑如包被液量、浓度、时间等指标对产品性能251的影响，通过试验确定上述指标的最佳组合

2524.显色（发光）系统、酶作用底物等的介绍

2535.实验体系反应条件确定申请人应考虑反应时间、反应温度、洗涤次数等254条件对产品性能的影响，通过试验确定上述条件的最佳组合

2556.酶催化底物（发光或变色）的最适条件研究

2567.体系中样品加样方式及加样量确定申请人应考虑样品加样方式、加样量257对产品检测结果的影响，通过实验确定最佳的加样方式及加样量如样本需采取稀258释或其他必要的方法进行处理后方可用于最终检测，申请人还应对可用于样本稀释259的基质或处理方法进行研究，通过试验确定最终选择的用于样本稀释的基质或处理260方法261

（七）分析性能评估资料262企业应提交原厂在产品研制或成品验证阶段对试剂盒进行的所有性能验证的研263究资料，包括具体研究方法、内控标准、试验数据、统计分析等详细资料对于病原264体特异性IgM抗体检测试剂，建议着重对以下分析性能进行研究

2652661.最低检测限（分析灵敏度）267选取特定滴度的病原体特异性IgM抗体样本，做系列倍比稀释，将检测结果的268阳性率在90%〜95%（n20）的最大稀释倍数作为试剂盒的最低检测限

2692.分析特异性270

（1）交叉反应271用于病原体特异性IgM抗体检测试剂交叉反应验证主要考虑以下几方面可能性272

①对抗原结构相近或临床症状相似的其他病原体高水平IgM抗体血清进行交叉273反应研究，如乙型肝炎病毒核心抗体（HBc）IgM.甲型肝炎病毒（HAV）IgM、弓274形虫、风疹病毒、单纯疱疹病毒以及巨细胞病毒IgM抗体等275

②高浓度病原体特异性IgG抗体与特异性IgM抗体的交叉反应验证276申请人应提交所有用于交叉反应验证的病原体来源、浓度或滴度确认等信息277建议申请人将有关交叉反应验证的信息以列表的方式在产品说明书的【产品性能指278标】项中列出279

（2）干扰物质280

①内源性干扰281对样本中常见的内源性干扰物质进行检测，如溶血、高脂、黄疸、类风湿因子282（RF）、抗核抗体（ANA）、抗线粒体抗体（AMA）、高浓度非特异性IgG和IgM抗283体（血清总IgG和IgM）等方法为对病原体特异性IgM抗体阴性、弱阳性（临界浓284度）的临床或模拟添加样本分别进行验证，样本量选择应体现一定的统计学意义，说285明样本的制备方法及干扰286287288289290实验的评价标准，确定可接受的干扰物质极限浓度291

②抗凝剂的干扰292如果试剂盒适用样本类型包括血浆样本，应采用各种适用抗凝剂抗凝的血浆样293本分别与血清样本进行对比实验研究方法为对不少于50例源自同一患者的病原体294特异性IgM抗体阴性、弱阳性（略高于临界值）的血清和血浆样本（不同抗凝剂各29550例）进行检测以验证申报试剂对于血清和血浆样本的检测结果的一致性296

③目前，病原体特异性IgM抗体检测试剂通常采用捕获法（又称双夹心法）和297间接法两种原理后者是将病原体抗原包被在固相载体上，加入含待测IgM抗体的298样本后，待抗原抗体结合后，再加入酶标记的抗IgM抗体进行反应，孵育后洗去未结299合的酶结合物再加入酶底物显色以反应“抗原-抗体-酶标二抗”复合物的存在该300方法在检测特异性IgM抗体时存在一定不足，由于血清中存在的IgM类类风湿因子301能与IgG抗体结合，然后结合到酶标二抗上，易造成假阳性，高效价的病原体特异302性IgG抗体也可与IgM抗体竞争抗原结合位点而导致假阴性因此，采用间接法（固303相包被病原体抗原）的试剂，需要在病原体特异性IgM检测前采用一定的方法去除304样本中的IgG类抗体，例如，在样本缓冲液中加入抗人IgG抗体，可以特异性地结305合血清或血浆中的IgG并沉淀，如果样本中存在类风湿因子，也将被抗人IgG-IgG306的复合物所吸附而去除干扰307基于上述理论，使用间接法原理的试剂盒，在样本处理环节应该设置一定的IgG308消除体系以降低实验中假阳性或假阴性的可能性如果反应体系中使用了相关的IgG309吸附技术（IgG吸附剂）来去除类风湿因子、抗核抗体或病原体特异性IgG抗体的310干扰，应以mg/dL为单位注明IgG311312313314吸附剂对样本中人IgG抗体的吸附能力，并进行以下的实验研究对至少10份临界315值附近的病原体特异性IgM抗体弱阳性并含有多水平病原体特异性IgG抗体的样本316进行检测，比较去除总IgG前后的结果，验证IgG吸附剂消除干扰的效果，以上实317验可以采用人工制备的样本进行318

④对至少10份含有病原体特异性IgM抗体的样本进行IgM破坏实验研究，方319法为采用特定的化学制剂如2—疏基乙醇或二硫苏糖醇处理样本后，重新进行检320测，IgM检测结果应为阴性

3215.精密度322企业应对每项精密度指标的评价标准做出合理要求，如标准差或变异系数的范323围等，针对本类产品的精密度评价主要包括以下要求3241对可能影响检测精密度的主要变量进行验证，除申报试剂本身外，还应对325操作者、实验地点等要素进行相关的验证3262设定合理的精密度评价周期，如有条件，建议申请人选择不同的实验室进327行重复实验以对室间精密度进行评价3283用于精密度评价的质控品应至少包括三个水平329

①阴性质控品待测物浓度低于试剂盒的临界值cut-off value或背景值较330高的零浓度质控品，阴性检出率应为100%n20331

②弱阳性质控品待测物浓度略高于试剂盒的临界值cut-off value,阳性检332出率应在90%〜95%范围n220333

③阳性质控品待测物浓度呈中到强阳性，阳性检出率为100%,且CVW15%334n^20o335另外，建议选择适量临床采集的新鲜病人样本包括所有样本类型作为无靶值336质控品进行精密度评价，以更好地模仿临床检测环境

3376.阳性/阴性参考品338如申报产品有相应的国家参考品，则企业内部阳性/阴性参考品应参考国家参339考品的项目设置在不低于国家参考品要求的前提下，申请人可以结合实际情况设340置合理的内部阳性/阴性参考品对于没有国家参考品的产品，申请人应根据产品性341能验证的实际情况自行设定企业内部参考品，阳性参考品应着重考虑抗体滴度要求，342阴性参考品则主要涉及对分析特异性（交叉反应）的验证情况343申请人应对内部阳性/阴性参考品的来源、抗体滴度等信息进行精确的实验验344证，并提交详细的验证资料

3457.钩状（HOOK）效应346须采用高滴度的病原体特异性IgM抗体的血清进行梯度稀释后由低浓度至高浓347度开始检测，每个梯度的稀释液重复3〜5份，对钩状效应进行合理的验证建议在348产品说明书上明示对钩状效应的研究结果349

（八）参考值（范围）确定资料350重点提交对申报试剂阴性/灰区/阳性等结果判断的临界值确定的实验研究资料，351应包括具体的试验方案、评价标准、统计学分析、研究数据等研究资料建议采用受352试者工作特征曲线（ROC）的分析方式来选择确定合理的临界值，如实验结果分析存353在灰区（equivocal zone）,则应明确灰区建立的基础临界值建立的样本来源选354择应考虑到地域性、年龄、不同生理状态等因素的影响，并明确临界值在不同的样本355类型是否有差异对临界值建立后所产生的临床灵敏度和特异性进行充分判断，使356产生假阴性或假阳性结果的可能性均降至最低357

（九）稳定性研究资料358稳定性研究资料主要涉及两部分内容，申报试剂的稳定性和适用样本的稳定性359研究前者主要包括实时稳定性、高温加速破坏稳定性、运360361362输稳定性及开瓶稳定性（如涉及）等研究，申请人可根据实际需要选择合理的稳定性363研究方案稳定性研究资料应包括研究方法的确定依据、具体的实施方案、详细的研364究数据以及结论对于实时稳定性研究，应提供至少三批样品在实际储存条件下保365存至成品有效期后的研究资料366考虑到低温条件下长时间保存可能造成病原体特异性IgM抗体的活性减弱，申367请人应对样本稳定性进行合理的验证，主要是对冷藏和冷冻两种条件下的有效期进368行验证，以确认不同类型样本的短期、长期保存条件及效期需要冷冻保存的样本应369对冻融次数（重要指标）进行合理的验证某些用于防腐、冷冻用途或起稳定保护作370用的添加剂（如叠氮化物）可能会对IgM抗体的检测造成影响，如涉及，请对该添371加剂的影响进行合理验证372另外，如果要用于加热样本（如热灭活）的检测，则应对加热前后的病原体特373异性IgM抗体阳性及阴性样本进行加热因素的干扰验证方法为对临界值附近的至374少10份弱阳性加热和未加热样本进行对比检测，比较检测结果的差异；对至少10375份阴性加热和未加热的样本进行对比检测，比较检测结果的差异376试剂稳定性和样本稳定性两部分内容的研究结果均应在说明书【储存条件及有377效期】和【样本要求】两项中进行详细说明378

（十）临床试验资料

3791.研究方法380

（1）对于已有同类产品上市的试剂临床研究，选择境内已批准上市、临床普381遍认为质量较好的同类产品作为参比试剂，采用拟申报产品（以下称考核试剂）与之382进行对比试验研究，证明本品与已上市产品等效或优于已上市产品考虑到试剂盒383的预期用途，阳性样本中应包括一定量384385386的新鲜样本比例387另外，申请人还应选择不少于30例、感染急性期患者采集的样本进行考核试剂388与病原体分离培养鉴定方法的比较研究，以确定申报试剂检测结果与金标准方法比389较的符合率并以此判断其临床灵敏度和特异性如果病原体分离培养鉴定的方法不390可行也可以采用其他用于感染急性期判断的方法进行比对研究，例如病原体IgG抗391体的血清学转换（动态监测2份或以上的血清IgG,恢复期与急性期比较IgG呈4倍392以上升高）、病原体核酸检测或直接抗原检测等方法，对于病原体感染急性期的判断393应密切结合患者的临床诊断综合进行394

（2）对于无同类产品上市的申报试剂的临床研究，则必须选择病原体感染检395测的金标准方法并结合临床诊断进行相应的对比试验研究，如病原体分离培养鉴定、396病原体IgG抗体的血清学转换、病原体核酸检测或直接抗原检测等方法

3972.临床研究单位的选择398申请人在国内不同区域选择临床单位，尽量使各单位的临床样本有一定的区域399代表性；临床研究单位应具有特定病原体感染疾患诊疗、病原体分离培养鉴定方法400或分子生物学方法检测的优势，实验操作人员应有足够的时间熟悉检测系统的各环401节（仪器、试剂、质控及操作程序等）,熟悉评价方案在整个实验中，考核试剂和402参比方法都应处于有效的质量控制下，最大限度保证试验数据的准确性及可重复性

4033.临床试验方案404临床试验实施前，研究人员应从流行病学、统计学、临床医学、检验医学等多405方面考虑，设计科学合理的临床研究方案各临床研究机构的方案设置应基本一致，406且保证在整个临床试验过程中遵循预定的方案407408409410实施，不可随意改动整个试验过程应在临床研究机构的实验室内并由本实验室的411技术人员操作完成，申报单位的技术人员除进行必要的技术指导外，不得随意干涉412实验进程，尤其是数据收集过程413试验方案中应确定严格的病例纳入/排除标准，任何已经入选的病例再被排除出414临床研究都应记录在案并明确说明原因在试验操作过程中和判定试验结果时应采415用盲法以保证试验结果的客观性各研究单位选用的参比试剂应保持一致，以便进416行合理的统计学分析另外，考核试剂的样本类型不应超越参比试剂对样本类型的417检测要求，如果选择了参比试剂适用样本类型以外的样本，则应采用病原体分离培418养鉴定或其他合理方法对额外的样本类型进行验证

4194.病例选择及样本类型420临床试验应选择具有特定病原体感染症状/体征、相似症状或有密切接触史等人421群作为研究对象企业在建立病例纳入标准时，应考虑到不同人群的差异，尽量覆盖422各类适用人群在进行结果统计分析时，除总体病例数的要求外，建议对各类人群分423层进行数据统计分析考虑到大样本统计学的要求，临床研究中病原体特异性IgM424抗体的阳性样本例数以不少于120例为宜对于阴性病例的选择，也应考虑到交叉425反应的需要，对靶病原体之外的其他病原体感染急性期的患者样本进行检测，以从426临床角度考察其分析特异性

4275.统计学分析428对临床试验结果的统计应选择合适的统计方法，如检测结果一致性分析、受试429者工作特征（R0C）曲线分析、阴性/阳性符合率等对于本类产品对比实验的等效430性研究，常选择交叉四格表的形式总结两种试剂的定性检测结果，对定性结果进行431四格表卡方或kappa检验以验证两种432433434试剂定性结果的一致性，统计学分析应可以证明两种方法的检测结果无明显统计学435差异在临床研究方案中应明确统计检验假设，即评价考核试剂与参比试剂是否等效436的标准

4376.结果差异样本的验证438在数据收集过程中，对两种试剂检测结果明显不一致的样本，应采用“金标准”439方法或临床上普遍认为质量较好的第三种同类试剂（国内已上市）进行复核，同时结440合患者的临床病情对差异原因及可能结果进行分析如果申报试剂与参比试剂的检441测结果显示不一致样本均是位于二者的临界值附近且例数很少（如低于总例数的1%）,442则对不一致原因作简要分析即可，不须进行第三方复核注意，如果有必要选择第三443方试剂复核，建议先采用第三方试剂对一定数量的申报试剂和参比试剂检测结果一444致的样本（包括阳性和阴性结果）进行检测，以对第三方试剂选择的合理性进行评估

4457.临床试验总结报告撰写446根据《体外诊断试剂临床研究技术指导原则》（国食药监械〔2007〕240号）的447要求，临床试验报告应该对试验的整体设计及各个关键点给予清晰、完整的阐述，应448该对整个临床试验实施过程、结果分析、结论等进行条理分明的描述，并应包括必要449的基础数据和统计分析方法建议在临床总结报告中对以下内容进行详述450

（1）临床试验总体设计及方案描述451

①临床试验的整体管理情况、临床研究单位选择、临床主要研究人员简介等基452本情况介绍453

②病例纳入/排除标准、不同人群的预期选择例数及标准454

③样本类型，样本的收集、处理及保存等45545645726根据结构不同，人免疫球蛋白可分为G型免疫球蛋白（IgG）、M型免疫球蛋白27（IgM）、A型免疫球蛋白（IgA）、E型免疫球蛋白（IgE）和D型免疫球蛋白（IgD）285种类型，IgM占血清免疫球蛋白总量的5%-10%o分泌型IgM为五聚体，是分子量最29大的免疫球蛋白分子，一般不能通过血管壁，主要存在于血液中五聚体IgM含1030个抗原结合片段（Fab段）,有很强的抗原结合能力，含5个可结晶化片段（Fc段），31比G型免疫球蛋白（IgG）更易激活补体，IgM抗体一般为保护性抗体，具有免疫性32IgM是个体发育过程中最早合成和分泌的抗体，在胚胎发育晚期的胎儿即能产生IgM,33且由于IgM分子量大，不能通过母血进入胎儿体内，故脐带血或新生儿血液中特异34性IgM升高常提示胎儿或新生儿存在宫内或围生期感染在病原体感染的初次体液35免疫应答中（原发性感染），特异性IgM抗体首先出现，但其普遍反应短暂，一般几36周后即不易再测到病原体特异性IgM抗体阳性常提示早期感染，可用于感染急性37期的辅助判断人血液样本中病原体特异性IgM抗体的定性检测，对某些传染病如38甲型肝炎、乙型肝炎、TORCH（弓形虫、风疹病毒、巨细胞病毒及单纯疱疹病毒）类39病原体感染等有较高的临床参考价值不具备病原体分离培养鉴定实验室的临床检40测机构常将病原体特异性IgM抗体的检测作为早期感染的唯一依据，因此，病原体41特异性IgM抗体检测结果的准确性显得颇为重要假阳性结果可能导致病人接受不42必要的抗病原体治疗而假阴性结果则有可能造成患者治疗的延误，由特异性IgM抗43体检测造成的误诊或漏诊对孕妇或胎儿可能造成很大伤害相关生产企业必须充分44意识到该类产品的潜在风险，根据本指导原则的要求对该类试剂的安全性和有效性45进行科学合理的验证46

三、基本要求474849458

④统计学方法、统计软件、评价统计结果的标准4592具体的临床试验情况460

①申报试剂和参比试剂的名称、批号、有效期等信息461

②对各研究单位的病例数、人群分布情况进行综合，建议以列表或图示方式给462出具体例数及百分比463

③质量控制，试验人员培训、质控品检测情况，对检测精密度、质控品测量值的464抽查结果评估465

④具体试验过程，样本检测、数据收集、样本长期保存、结果不一致样本的校验466等4673统计学分析468

①数据预处理、差异数据的重新检测或第三方验证以及是否纳入最终数据统计、469对异常值或缺失值的处理、研究过程中是否涉及对方案的修改470

②定性结果的一致性分析471阳性符合率、阴性符合率、总体符合率及其95%或99%的置信区间以交叉472表的形式总结两种试剂的定性检测结果，对定性结果进行四格表卡方或kappa检验473以验证两种试剂定性结果的一致性另外考虑到对不同样本类型以及不同人群的检474测结果可能存在一定差异，故建议对不同样本类型及不同人群分别进行统计分析，以475对考核试剂的临床性能进行综合分析4764讨论和结论477对总体结果进行总结性描述并简要分析试验结果，对本次临床研究有无特别说478明，最后得出临床试验结论479

四、名词解释

4804814821.分析特异性（analytical Specificity）测量程序只测量被测量物483的能力分析特异性用于描述检测程序在样本中有其他物质存在时只测量被测484量物的能力通常以一个被评估的潜在干扰物清单来描述，并给出在特定医学485相关浓度值水平的分析干扰程度486注潜在干扰物包括干扰物和交叉反应物

4872.精密度（precision）在规定条件下，相互独立的测试结果之间的一488致程度精密度的程度是用统计学方法得到的测量不精密度的数字形式表示，489如标准差（SD）和变异系数（CV）0490

五、参考文献

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51413.曹雪涛，《免疫学技术及其应用》，第一版，科学出版社，2010515年5月

（一）综述资料50综述资料主要包括产品临床适用症背景情况、预期用途、产品描述、51有关生物安全性的说明、研究结果的总结评价以及同类产品上市情况介绍等内52容，其中同类产品上市情况介绍部分应着重从方法学及临床适用范围等方面写53明拟申报产品与目前市场上已获批准的同类产品之间的主要区别综述资料注54册申报资料的重要组分之一，其内容应符合《体外诊断试剂注册管理办法（试55行）》（国食药监械

（2007）229号）和《体外诊断试剂注册申报资料基本要56求》（国食药监械〔2007）609号）的相关要求另外，建议申请人对以下几57方面内容进行着重介绍

581.特定病原体的生物学特性、结构与功能、感染过程、潜优期、特异性IgM59抗体产生及可持续存在时间、病理背景等

602.特定病原体感染相关的疾病情况、流行病学以及易患（高危）人群的说61明

623.对申报试剂检测结果可能带来的风险进行合理评估，即由申报试剂的假63阳性/假阴性结果导致的对患者临床诊治、孕妇或胎儿的不恰当处理、疫苗接种、64流行病学等方面的负面影响

654.用于特定病原体特异性IgM抗体检测方法的发展历程摘要及各种检测6667方法的优缺点评价68

（二）产品说明书69说明书承载了产品预期用途、标本采集及处理、实验方法、检测结果解释70以及注意事项等重要信息，是指导实验室工作人员正确操作、临床医生针对检71验结果给出合理医学解释的重要依据，因此，产品说明书是体外诊断试剂注册72申报最重要的文件之一产品说明书的格式应符合73《体外诊断试剂说明书编写指导原则》（国食药监械〔2007〕240号）的74要求，境外试剂的中文说明书除格式要求外，其内容应尽量保持与原文说明书75的一致性，翻译力求准确且符合中文表达习惯产品说明书的所有内容均应与76申请人提交的注册申报资料中的相关研究结果保持一致，如某些内容引用自参77考文献，则应以规范格式对此内容进行标注，并单独注明文献的相关信息78结合《体外诊断试剂说明书编写指导原则》国食药监械〔2007〕240号79的要求，下面对病原体特异性IgM抗体定性检测试剂说明书的重点内容进行详80细说明，以指导注册申报人员更合理地完成说明书编制

811.【预期用途】应至少包括以下几部分内容821试剂盒用于体外定性检测人血清和/或血浆样本中xx的特异性IgM抗体832简单介绍待测目标的特征，如特定病原体的生物学性状、潜伏期、易感84人群、感染后的临床表现等临床背景相关的信息介绍；适用于对哪些患者人群85的检测，如具有何种症状/体征的患者、相关的密切接触者、地域要求或年龄限86制如有等873病原体特异性IgM抗体的产生、持续时间、与特异性IgG、病原体核酸88等其他检测指标的关联；894该试剂盒的应用是否需要配套使用的专用仪器，与靶抗体检测相关的其90他检测技术的介绍

912.【主要组成成分】921说明试剂盒包含组分的名称、数量、比例或浓度等信息，阴性/阳性对93照品可能含有人源组分，应提供其生物学来源、灭活方法及无传染性确认的方94法等952对检测中使用的抗原及抗体的信息进行简单介绍96973试剂盒中不包含但对该项检测必须的组分，企业应列出相关试98剂/耗材的名称、货号及其他相关信息

993.【储存条件及有效期】100对试剂盒的效期稳定性、开封稳定性、运输稳定性等信息做详细介绍101胶体金试纸条产品应对开封后未使用产品允许暴露于空气中的温度、湿度102及期限等条件予以明确

1034.【样本要求】重点明确以下内容1041样本采集前对患者的要求如采集时间、采集顺序等，是否受临床症105状、用药情况等因素的影响1062样本采集说明采集方法及样本类型，如有血浆样本，应注明对抗凝107剂的要求1083样本处理及保存样本处理方法、保存条件及期限短期、长期、运109输条件等冷藏/冷冻样本检测前是否须恢复室温，冻融次数经热处理样本是110否可用、对储存样本的添加剂要求等1111124如果检测系统含有某种IgG抗体的去除技术IgG吸附剂，如抗人113IgG抗体等，则应包括IgG吸附剂使用相关的注意事项例如经IgG吸附剂114处理的样本不能用于IgG类抗体的检测；在检测IgM类抗体的同时，检测处115理过的混合物中的IgG类抗体，以证实对IgG、类风湿因子RF等去除的有效116性等

1175.【检验方法】详细说明试验操作的各个步骤1181实验环境温、湿度条件，检测试剂及样本的复温要求及相关注意事119项例如冻存样本在复融后应经过充分的混匀再行检测1202试剂配制方法、注意事项，试剂开封后使用方法及注意事项等121122

（3）试验条件操作步骤、温度、时间、仪器波长等以及试验过程中的注123意事项不同型号产品，加样方法如有差异，建议分别以图示方式描述清楚

1241.1检验结果的解释】125结果判断或计算详细描述对检测结果的判定或计算方法、对质控品（对照126品）的检测结果要求（试验有效性的判断）等如果质控品和病人样本的使用方127法不同，生产商应注明必要的指导和解释建议在质控品（对照品）结果解释环128节注明以下字样“如果质控结果与预期不符,实验室不应出具检测报告”

1297.【检验方法局限性】130综合产品的预期用途、临床背景、检测方法及适用范围等信息，对可能出现131的局限性进行相关说明，主要包括以下描述，请申请人选择适用的条款在产品说132明书中予以阐述133

（1）本产品检测结果仅供临床参考，不应作为临床诊治的唯一依据,对患134者的临床管理应结合其症状/体征、病史、其他实验室检查（尤其是病原学检测）、135治疗反应及流行病学等信息综合考虑136

（2）感染初期，病原体特异性IgM抗体未产生或滴度很低会导致阴性结137果，如怀疑有病原体感染，应提示患者在7—14天内复查，抽取第二份样本，并138和第一份样本在同条件下同时检测，以确定是否有初次感染的血清转化或病原体139特异IgM或IgG抗体滴度明显升高140

（3）高滴度病原体特异性IgG抗体会与特异性IgM抗体竞争抗原结合部141位，会使检测的敏感性降低，IgM结果可能会出现假性低值或阴性结果尤其是142怀疑先天性病原体感染的新生儿样本，他们的血清中可能含有母亲来源的高水平143病原体特异的IgG抗体和胎儿产生的相对低水平144145146的病原体特异IgM抗体，因此，对于该类样本的阴性结果应慎重分析1474由于脐带血中可能含有源于母体的病原体特异性IgM抗体胎盘渗漏，148因此，最好在出生后5天内再对婴儿的后续样本进行检测，以证实脐带血样本149病原体特异性IgM抗体的阳性结果建议将新生儿与母亲的血清样本平行进行150测试，如果是胎儿的先天性感染,其IgM抗体水平以及IgG抗体水平会持续151存在或呈上升趋势，反之，如果抗体来源于母体，则在在平行实验中婴儿的抗152体水平会逐渐下降或消失1535由于孕妇的实验室检查不能可靠地鉴定胎儿患病的风险，故不建议采154用本试剂对无症状的母体感染进行筛查，不得将本试剂的检测结果单独作为终155止妊娠的依据1566免疫功能受损或接受免疫抑制治疗的患者，如人类免疫缺陷病毒HIV157感染患者或器官移植后接受免疫抑制治疗的患者，其血清学IgM抗体检测的参158考价值有限，可能会导致错误的医学解释1597在近几个月内接受过输血或其他血液制品治疗的人群，对其阳性检测160结果的分析应慎重1618病原体特异性IgM抗体不仅出现于初次感染，当二次感染和复发感染162时也可能出现1639当疾病的流行程度降低时阳性预测值降低，对低危人群阳性结果的解164释应当谨慎建议对申报试剂临床研究中的病例人群特征进行说明，并对适用165人群的性别、年龄、地域等特征进行明示

1668.【产品性能指标】详述以下性能指标1671对相应国家参考品如有检测的符合情况1682最低检测限分析灵敏度说明试剂的最低检测浓度或滴度,169简单介绍最低检测限的确定方法170

（3）企业内部阳性/阴性参考品符合率，简单介绍阳性参考品的来源、171浓度梯度、阴性参考品组成、来源以及浓度梯度设置等信息172

（4）精密度精密度参考品的组分、浓度及评价标准173

（5）分析特异性174

①交叉反应对易产生交叉反应的其他病原体的高水平IgM抗体、特异性175IgG抗体等的验证情况176

②干扰物质样本中常见干扰物质对检测结果的影响，如溶血、高脂、黄177疸等干扰因子研究（结果应量化表示，禁用轻度、严重等模糊表述），有关高浓178度总IgM和IgG抗体、自身抗体、类风湿因子（RF）、嗜异型性抗体等的干扰179验证180

③药物影响较常见的用于病原体感染治疗的外用或内服药物对检测结果181的影响182

（6）钩状（HOOK）效应对高浓度特异性IgM抗体的钩状效应验证情183况184

（7）对比试验研究（如有）简要介绍参比试剂（方法）的信息、所采185用的统计学方法及统计分析结果

1869.【注意事项】应至少包括以下内容187

（1）有关试剂盒内人源组分（如有）生物安全性的警告188

（2）有关实验操作、样本保存及处理等其他注意事项189

（三）拟定产品标准及编制说明190拟定产品标准应符合国食药监械〔2007）229号和国食药监械〔2007）609191号文件的相关规定另外，对于国产试剂，应参考《中国生物制品规程》（2000192年版），将拟申报产品的主要原材料、生产工艺及半成品检定等内容作为附录193附于标准正文后，并在正文的“产品分类”项中引出该附录内容194病原体特异性IgM抗体检测试剂的注册检测应主要包括以下性能指标物195理性状、阳性参考品符合率、阴性参考品符合率、精密度、最低检测限（分析灵196敏度）等阳性参考品主要考察对不同滴度情况下的检测符合性阴性参考品197则是对分析特异性（交叉反应）的验证，应主要包括易发生交叉反应的其他病198原体特异性IgM抗体的假阳性情况的考核199如果拟申报试剂已有相应的国家/行业标准发布，则企业标准的要求不得200低于上述标准要求201

（四）注册检测202根据国食药监械〔2007〕229号文件要求，首次申请注册的第三类产品应203该在国家食品药品监督管理局认可的、具有相应承检范围的医疗器械检测机构204进行连续三个生产批次样品的注册检测对于已经有国家参考品的病原体特异205性IgM抗体项目，在注册检测时应采用相应的国家参考品进行，对于目前尚无206国家参考品的项目，生产企业应自行建立稳定的质控体系并提供相应的内部参207考品208

（五）主要原材料研究资料

2091.试剂盒所用病原体抗原的制备、筛选、纯化以及鉴定等详细试验资料，210主要包括以下两方面211

（1）企业自制抗原212如为天然抗原，则应对病原体毒株选择、病原体培养、抗原提取及纯化、213鉴定等实验过程予以详述；如为重组抗原，则应提交有关特定基因选择、基因214序列、基因克隆、抗原表达及抗原纯化鉴定等详细内容，并对基因克隆的整个215过程进行详述，如特定脱氧核糖核酸（DNA）分子的216217。