文本内容:
ph对酶活力的影响实验报告
一、实验目的
1、了解pH对酶的活性的影响机理;
2、掌握如何选择酶催化反应的最适pH和获得最适pH条件的确定
二、实验原理酶的生物学特征之一是它对酸碱的敏感性,这表现在酶的活性和稳定性易受环境pH的影响pH对酶的活性的影响极为显著,通常各种酶只在一定的pH范围内才表现出活性,同一种酶在不同的pll值下所表现的活性不同,其表现活性最高时的pH值称为酶的最适pH各种酶在特定条件下都有它各自的最适pHo在进行酶学研究时一般都要制作一条pH与酶活性的关系曲线,即保持其他条件恒定,在不同pH条件下测定酶促反应速度,以pH值为横坐标,反应速度为纵坐标作图由此曲线,不仅可以了解反应速度随pH值变化的情况,而且可以求得酶的最适pHo
三、实验器材与试剂
1、试剂磷酸氢二钠、乙酸钠、磷酸二氢钠、柠檬酸、乙酸
2、器材可见分光光度计、恒温水浴锅、试管、酸度计
四、操作步骤L配置缓冲溶液按下表配置缓冲溶液,其溶液pH值以酸度计测定值为准管号
0.2mol/L磷酸氢二钠ml
0.Imol/L柠檬酸钠ml缓冲液pH
14.
304.5□
5.
154.
845.
036.
613.
396.2O
7.
722.
286.
859.
080.
927.
469.
720.
288.
02.反应液的配方准备二组各6支试管,第一组6支试管中,在每支都加入
4.5ml上表中相应的缓冲液,然后加入一定量浓度的
6.5%蔗糖酶溶液
1.0ml(此时的蔗糖酶只能用玲稀释,酶的稀释倍数和加入量要选择适当,以便在当时的实验条件下能得到
0.6T.0的光吸收值A,加另一组6支试管也是每支都加入
4.5ml上表中相应的缓冲液,但不再加酶而加入等量的去离子水,分别作为测定时的空白对照管所有的试管都用水补足到
5.Omio
3.终止反应所有的试管按一定时间间隔加入
0.5ml蔗糖(
6.5%)开始反应,反应5min后分别加入
5.0nil
0.Imol/LNaOH溶液,在按测定酶活力的程序操作,测出A52
五、结果与分析以反应速度(葡萄糖量.miZ)为纵坐标,以pH为横坐标,绘制下蔗糖酶活性与pH的关系曲线分析曲线并确定蔗糖酶的最适pH或pH范围(注专业文档是经验性极强的领域,无法思考和涵盖全面,素材和资料部分来自网络,供参考可复制、编制,期待你的好评与关注)。