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文本内容:
BC3Hl(小鼠脑瘤细胞)细胞说明书.售前须知该细胞贴壁松散,操作时请尽量轻柔;换液时需预热培养基;收货如有大块脱落的细胞团,为正常现象,请按照收货注意事项处理.细胞起源:温度液氮培养条件气相空气,95%;C025%温度37℃
4.传代方法传代步骤吸出原培养液;加入2ml左右PBS轻轻晃动培养瓶润洗细胞,吸出PBS丢
3、加入1ml左右胰酶,轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞;
4、放入培养箱消化,显微镜下看到细胞块中间的细胞明显变圆有间隙时可终止,全程不要拍打培养瓶;
5、加入3ml含血清的培养基终止消化,吹打细胞使之脱壁并在液体里反复吹打使细胞尽量呈单颗细胞的悬浮液;
6、收集细胞悬液离心,1200rpm3分钟,离心完吸出上清丢弃
7、加入新鲜培养基,吹打几下混匀细胞即可,按比例接种到新培养瓶,补足培养基,拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养\消化时间传代比例1:2to1:3everyweek换液频次Twiceperweek倍增时间~70hours
5.收货注意事项:若收到细胞大片脱落,请按照如下处理方式处理
1、将培养瓶内所有培养基转入无菌离心管,离心收集细胞1200rpm3min去除旧培养基;
2、用PBS重悬细胞,将所有细胞收集到一个离心管中,再次离心1200rpm3min去除PBS;
3、加入1ml左右
0.25%胰酶重悬细胞,混匀即可,不能吹打太多次,放入培养箱消化3分钟]
4、消化好后,用移液枪轻轻吹打细胞悬液,使细胞团分散,迅速加入3〜5ml含血清的培养基混匀以终止消化,离心1200rpm3min去除胰酶;
5、加入5ml左右的细胞相应的完全培养基混匀,按比例接入无菌培养瓶/皿中首次传代推荐1:3。