文本内容:
实验报告
一、实验目的
1.学习毒理学实验中有关动物实验的基本操作技术
2.掌握健康小鼠的外观检查方法、性别鉴定、捉拿和固定方法、小鼠灌胃给药与小鼠腹腔注射给药等技术
3.掌握小鼠颈椎脱臼法处死方法、小鼠脏器系数的概念及其测定方法、病理学意义
4.熟悉小鼠的标记、小鼠解剖步骤及正常脏器观察
5.了解实验动物的被毛去除方法、实验动物粪、尿的收集、小鼠血液样本采集方法
二、实验材料和器材
1.动物小鼠
2.器材鼠笼、天平、注射器、灌胃针、止血钳、手术剪、平皿、托盘、烧杯若干
三、实验方法
1.对小鼠进行观察观察的指标主要包括小鼠的体型、发育情况;毛发是否清洁浓密有光泽,是否顺贴不蓬乱;行动是否迅速,反应是否灵敏;眼睛是否明亮有神,瞳孔是否清晰等圆;天然孔道是否干净、有无分泌物
2.小鼠的捉拿右手提起鼠尾,放在鼠笼盖或其他粗糙面上,向后方轻拉,小白鼠则将前肢固定于粗糙面上此时迅速用左手拇指和食指捏任小白鼠颈背部皮肤,并以小指与手掌尺侧夹持其尾根部,固定于手中
3.小鼠性别鉴定主要观察肛门与生殖器之间的距离雄性大鼠的距离较大,雌性的距离较小,且成年雄鼠尾部可见睾丸,成年雌鼠可见乳头
4.小鼠称重打开电子天平,待读数显示稳定后,将平皿置于天平上,去皮;将小鼠置于平皿中,待读数显示稳定后,读数得
25.95g
5.小鼠灌胃1)准备灌胃针头,将注射器针头拔下,更换为灌胃针头;根据小鼠的体重,按O.lml/lOg灌胃量计算V=
25.950*
0.1/10=
0.26ml用注射器取
0.26ml液体(自来水);2)按“三-2-1)”的方法抓住小鼠,使其头、颈和身体呈一直线;3)灌胃针头从小鼠的嘴角进入,压住舌头,抵住上颗,轻轻向内推进,进入食管后会有一个刺空感,进入食道后即可推注药液,然后原方向将灌胃针抽出
6.腹腔注射1)吸取液体(自来水),将针头向上,吸取一段气体后,再缓慢排除气体,以达到取出气泡的效果2)按“三-2-1)”的方法捉拿小鼠,并使小鼠腹腔向上;3)事先吸取好液体的注射器针尖平面朝上,平行扎入皮内后,注射器与腹腔呈45度角刺入腹腔,感觉针尖部分可以移动,将注射针向后抽出一点,注射样品
7.小鼠处死右手抓住鼠用力向后拉,同时左手拇指与食指用力向下按住鼠头,将脊髓与脑髓拉断,鼠即死亡
8.小鼠解剖及脏器称重1)将小鼠尸体仰卧位固定;2)在下腹部作一横切口,再沿腹部正中线切开剑突至外阴、肛门之间的腹前壁;3)沿最低位肋骨分别向左右两侧切开侧腹壁至脊柱两旁,用止血钳拉开外皮,完全暴露腹腔器官;4)观察腹腔组织器官胃、肠、肝脏、脾脏、肾脏等;5)依次取出胃、肠、胰、肝脏、脾脏、肾脏等,将各个脏器在水中荡洗后,称重;6)用镶子夹住胸骨剑突,剪断膈肌与胸骨的连结;7)提起胸骨,在胸椎两侧分别剪断左、右侧胸壁的肋骨;8)取下整个胸壁,暴露胸腔;9)观察胸腔组织器官:胸腺、肺脏、心脏等;10)依次取出胸腺、肺脏、心脏,将各个脏器在水中荡洗后,称重;11)脏器称重前应尽量将周围脂肪组织和结蹄组织剔除,并用滤纸吸去脏器表面血液及体液,新鲜称重,防止器官干燥失水重量减轻,记录数据
四、实验结果经称量m(小鼠)=
25.95gm(肝)=
1.27m(肾)=
0.37gm(脾)=
0.10g脏器系数二湿重/体重脏器系数(肝)=
1.27/
25.95=
0.049脏器系数(肾)=
0.37/
25.95-
0.014脏器系数(脾)=
0.10/
25.95=
0.004
五、讨论
1.为什么开始时灌胃失败?没有找到正确的进针位置从鼠口正中央进针难以进入食管,应从小鼠左侧嘴角进针,先向鼠背侧前进,再向腹侧前进,灌胃针即可进入食管
2.腹腔注射的成功心得?注射器进入腹腔后,针头微微向上倾斜,就不会戳到其他脏器
3.如何防止被小鼠咬伤?熟练掌握小白鼠的捉拿方法,不要将手放在可以被小鼠咬到的地方
4.小鼠灌胃死亡的可能原因有哪些?1)灌胃位置错误,使液体进入气管、肺部2)药物本身的原因,对于小白鼠来说毒性过大3)药物剂量计算错误,给药量过大
5.小鼠腹腔注射死亡的可能原因有哪些?1)注射位置错误,药物未进入腹腔,进入了其他器官中2)药物本身的原因,对于小白鼠来说毒性过大3)药物剂量计算错误,给药量过大
六、实验结论
1.通过观察发现,小鼠体型健壮,发育正常,体重正常;毛发清洁浓密有光泽,顺贴不蓬乱;行动迅速,反应灵敏;眼睛明亮有神,瞳孔清晰等圆;天然孔道干净无分泌物2,小鼠的肝、肾、脾的脏器系数在正常范围内,说明该小鼠的肝、肾、脾未发生水肿、血肿或萎缩。